生物化學實驗技術操作指導

1、生物化學實驗技術操作指導生物化學實驗技術操作指導天津科技大學生物化學課程組2006.12目錄目錄生物化學實驗須知生物化學實驗須知????????????????????????????????????????????????????????????2實驗室一些常用知識介紹實驗室一些常用知識介紹??????????????????????????????????????????????????????3實驗一：離子交換法分離氨基酸實驗一：

2、離子交換法分離氨基酸??????????????????????????????????????????????7實驗二：實驗二：垂直板聚丙烯酰胺凝膠電泳分離蛋白質(zhì)垂直板聚丙烯酰胺凝膠電泳分離蛋白質(zhì)??????????????????????????????????9實驗三：實驗三：馬鈴薯多酚氧化酶制備及性質(zhì)實驗馬鈴薯多酚氧化酶制備及性質(zhì)實驗??????????????????????????????????????1313實驗四：實驗

3、四：堿性蛋白酶活力的測定堿性蛋白酶活力的測定??????????????????????????????????????????????1616實驗五實驗五:植物組織中植物組織中DNA和RNA的提取和鑒定的提取和鑒定????????????????????????????????1919實驗六：糖酵解中間產(chǎn)物的鑒定實驗六：糖酵解中間產(chǎn)物的鑒定????????????????????????????????????????????????

4、2222實驗七：綜合設計實驗實驗七：綜合設計實驗—蛋白質(zhì)的制備及其含量測定蛋白質(zhì)的制備及其含量測定??????????????????????????????2424實驗八：還原糖和總糖的測定（實驗八：還原糖和總糖的測定（3，5二硝基水楊酸法）二硝基水楊酸法）??????????????????????????3535實驗九：發(fā)酵過程中無機磷的利用實驗九：發(fā)酵過程中無機磷的利用??????????????????????????????

5、????????????????3737實驗十：氨基酸的分離鑒定實驗十：氨基酸的分離鑒定—紙層析法紙層析法??????????????????????????????????????????3939實驗十一：細菌血栓溶解酶活性測定實驗十一：細菌血栓溶解酶活性測定????????????????????????????????????????????4141實驗十二：實驗十二：可溶性糖的硅膠可溶性糖的硅膠G薄層層析薄層層析????????

6、??????????????????????????????????4343（3）實驗原理應簡述基本原理，不要完全照抄實驗指導書。（4）操作步驟操作步驟(或方法)可以采用流程圖的方式或自行設計的表格來表達。（5）實驗結(jié)果將實驗中的現(xiàn)象、數(shù)據(jù)進行整理、分析，得出相應的結(jié)論。建議盡量使用圖表法來表示實驗結(jié)果，這樣可以使實驗結(jié)果清楚明了。（6）討論包括對實驗結(jié)果及觀察現(xiàn)象的小結(jié)、對實驗中遇到的問題和思考題的探討以及對實驗的改進意見等。4生物化

7、學實驗課評分標準生物化學實驗課評分標準?實驗預習情況（10%）?實驗操作情況（20%）?實驗報告情況（30%）?實驗考試成績（40%）實驗室一些常用知識介紹實驗室一些常用知識介紹一玻璃儀器的洗滌及一些常用的洗滌劑一玻璃儀器的洗滌及一些常用的洗滌劑1.玻璃儀器的洗滌玻璃儀器的洗滌（1）新購買的玻璃儀器首先用自來水洗去表面灰垢然后用洗衣粉刷洗自來水沖凈后浸泡在1%~2%鹽酸溶液中過夜以除去玻璃表面的堿性物質(zhì)。最后用自來水沖洗干凈并用蒸餾水沖

8、洗2次。（2）對于使用過的玻璃儀器應先用自來水沖洗再用毛刷蘸取洗衣粉刷洗。用自來水充分沖洗后再用蒸餾水沖洗2次。凡洗凈的玻璃儀器壁上都不應帶有水珠否則表示尚未洗凈需重新洗滌。（3）比較臟的儀器或不便刷洗的儀器使用前應用流水沖洗以除去粘附物如果儀器上有凡士林或其他油污應先用軟紙擦除再用有機溶劑擦凈，最后用自來水沖洗。待儀器晾干后放入鉻酸洗液中浸泡過夜。取出后用自來水充分沖洗再用蒸餾水沖洗2次。（4）普通玻璃儀器可在烘箱內(nèi)烘干但定量的玻璃儀

9、器如吸管、滴定管、量筒、容量瓶等不能加熱應晾干備用。另外分光光度計中的比色杯的四壁是用特殊膠水粘合而成受熱后會散架所以也不能烘干。對疑有傳染性的樣品(如肝炎病人的血清)其容器應先消毒再清洗。盛過劇毒藥物或放射性同位素物質(zhì)的容器應先經(jīng)過專門處理后再清洗。2.一些常用的洗滌劑一些常用的洗滌劑a.肥皂水或洗衣粉溶液這是最常用的洗滌劑主要是利用其乳化作用以除去污垢一般玻璃儀器均可用其刷洗。b.鉻酸洗液(重鉻酸鉀一硫酸洗液)鉻酸洗液廣泛用于玻璃儀