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文檔簡介
1、人血管內(nèi)皮細胞生長因子人血管內(nèi)皮細胞生長因子C(VEGFC)C(VEGFC)酶聯(lián)免疫分析(酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明書試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測定人血清,血漿及相關液體樣本中人血管內(nèi)皮細胞生長因子C(VEGFC)含量。實驗原理:實驗原理:本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人血管內(nèi)皮細胞生長因子C(VEGFC)水平。用純化的人血管內(nèi)皮細胞生長因子C(VEGFC)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被
2、單抗的微孔中依次加入血管內(nèi)皮細胞生長因子C(VEGFC),再與HRP標記的血管內(nèi)皮細胞生長因子C(VEGFC)抗體結合,形成抗體抗原酶標抗體復合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的血管內(nèi)皮細胞生長因子C(VEGFC)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人血管內(nèi)皮細胞生長因子C(VEGFC)濃度。試劑盒組成:
3、試劑盒組成:試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個1個酶標包被板14819628℃保存標準品0.5ml1瓶0.5ml1瓶28℃保存標準品稀釋液1.5ml1瓶1.5ml1瓶28℃保存酶標試劑3ml1瓶6ml1瓶28℃保存樣品稀釋液3ml1瓶6ml1瓶28℃保存顯色劑A液3ml1瓶6ml1瓶28℃保存顯色劑B液3ml1瓶6ml1瓶28℃保存終止液3ml1瓶6ml1瓶28℃保存濃縮洗滌液(20
4、ml20倍)1瓶(20ml30倍)1瓶28℃保存樣本處理及要求:樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固1020分鐘,離心20分鐘左右(20003000轉分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心。2.血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、者檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合1020分鐘后,離心20分鐘左右(20003000轉分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(200
5、03000轉分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。4.細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(20003000轉分)。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.27.4)稀釋細胞懸液,細胞濃9本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。計算:計算:以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準
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