人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子cvegf-c酶聯(lián)免疫分析elisa

1、人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子C(VEGFC)C(VEGFC)酶聯(lián)免疫分析（酶聯(lián)免疫分析（ELISA）試劑盒使用說(shuō)明書(shū)試劑盒使用說(shuō)明書(shū)本試劑僅供研究使用目的：本試劑盒用于測(cè)定人血清，血漿及相關(guān)液體樣本中人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子C(VEGFC)含量。實(shí)驗(yàn)原理：實(shí)驗(yàn)原理：本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子C(VEGFC)水平。用純化的人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子C(VEGFC)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被

2、單抗的微孔中依次加入血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子C(VEGFC)，再與HRP標(biāo)記的血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子C(VEGFC)抗體結(jié)合，形成抗體抗原酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子C(VEGFC)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品中人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子C(VEGFC)濃度。試劑盒組成：

3、試劑盒組成：試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說(shuō)明書(shū)1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個(gè)1個(gè)酶標(biāo)包被板14819628℃保存標(biāo)準(zhǔn)品0.5ml1瓶0.5ml1瓶28℃保存標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml1瓶1.5ml1瓶28℃保存酶標(biāo)試劑3ml1瓶6ml1瓶28℃保存樣品稀釋液3ml1瓶6ml1瓶28℃保存顯色劑A液3ml1瓶6ml1瓶28℃保存顯色劑B液3ml1瓶6ml1瓶28℃保存終止液3ml1瓶6ml1瓶28℃保存濃縮洗滌液(20

4、ml20倍)1瓶(20ml30倍)1瓶28℃保存樣本處理及要求：樣本處理及要求：1.血清：室溫血液自然凝固1020分鐘，離心20分鐘左右（20003000轉(zhuǎn)分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。2.血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、者檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合1020分鐘后，離心20分鐘左右（20003000轉(zhuǎn)分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。3.尿液：用無(wú)菌管收集，離心20分鐘左右（200

5、03000轉(zhuǎn)分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。4.細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（20003000轉(zhuǎn)分）。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.27.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃9本試劑不同批號(hào)組分不得混用。10.如與英文說(shuō)明書(shū)有異，以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。計(jì)算：計(jì)算：以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)