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1、針對(duì)瓜類枯萎病篩選拮抗菌劑及菌肥針對(duì)瓜類枯萎病篩選拮抗菌劑及菌肥一、研究現(xiàn)狀一、研究現(xiàn)狀枯萎病是由尖孢鐮刀菌引起的一種土傳病害,由于尖孢鐮刀菌不斷進(jìn)化出新的生理小種,并且其厚垣孢子能夠長(zhǎng)期在土壤中存活,使得枯萎病的防治十分困難。近年來(lái),利用有益微生物或枯抗微生物對(duì)瓜類枯萎病進(jìn)行生物防治枯萎病成為研究熱點(diǎn),根據(jù)生防菌誘導(dǎo)相關(guān)植物產(chǎn)生系統(tǒng)抗性,使其分泌相關(guān)酶及抗生素,從而使病原菌繁殖受到抑制,控制瓜類枯萎病的發(fā)生。主要采用芽孢桿菌、非致病性
2、尖孢鐮刀菌等拮抗微生物降低病原菌的密度或削弱病原菌的致病力,從而達(dá)到控制病害的目的,是一種很有前景的生物防治方法。二、目的和意義二、目的和意義我國(guó)拮抗微生物研究及應(yīng)用的技術(shù)手段多樣性方面與國(guó)外相比,差距較大。拮抗微生物的種類單一、對(duì)農(nóng)藥的反應(yīng)敏感,抗菌譜較窄、生防效果不穩(wěn)定、生防菌在植株上定殖較難,對(duì)拮抗和促生的結(jié)合較難、微生物防治措施不夠完善、可利用的拮抗微生物資源太少,還需進(jìn)一步挖掘與應(yīng)用。研究表明將廣譜的拮抗菌劑應(yīng)用到富含有機(jī)物質(zhì)
3、的土壤中,能提高防治效果,將廣譜拮抗菌和有機(jī)生物菌肥聯(lián)合施用,可以起到防病和促生雙重功效。本項(xiàng)目以多年瓜類連作的根際土壤中分離篩選對(duì)瓜類枯萎病具有拮抗活性的潔抗菌,對(duì)篩選到的高效拮抗菌株進(jìn)行深入研究,以開(kāi)發(fā)廣譜高效的拮抗微生物資源;并將篩選的微人畜無(wú)毒、對(duì)土壤中有益微生物沒(méi)有影響、對(duì)瓜類無(wú)副作用、尖孢鐮刀菌不易產(chǎn)生抗性、使用成本較低等優(yōu)點(diǎn),如與優(yōu)質(zhì)有機(jī)肥配合使用,效果更佳。林緯釆用芽孢桿菌和哈慈木霉單一防治西瓜枯萎病效果達(dá)3550%,與
4、有機(jī)肥混合使用效果可提高到6085%。因此,從土壤中篩選出具有高效詰抗枯萎病菌的菌株,并對(duì)篩選出的捨抗菌株進(jìn)行分類鑒定、括抗活性進(jìn)行初步研究,為生物防治西瓜枯萎病提供了具有應(yīng)用價(jià)值的微生物菌株。四、技術(shù)方案和技術(shù)路線四、技術(shù)方案和技術(shù)路線1、技術(shù)方案通過(guò)系列稀釋涂布平板、對(duì)峙培養(yǎng)等方法,從長(zhǎng)期連作的健康瓜類的根際土壤中分離篩選得到瓜類枯萎病枯抗菌株,通過(guò)形態(tài)特征、生理生化特征及rRNA基因序列相似性分析,鑒定菌系。研究分離得到的瓜類枯萎
5、病致病菌的拮抗菌生物學(xué)特性,包括菌株的生長(zhǎng)情況,最適溫度、pH、接種量、裝液量,以及抗性譜、耐藥性等,對(duì)枯萎病的高效防治和田間應(yīng)用等都具有重要作用。將去除菌體的發(fā)酵液對(duì)瓜類枯萎病菌的抑制率作為判定發(fā)酵條件優(yōu)劣的主要指標(biāo),篩選出最適合菌株產(chǎn)生抗生物質(zhì)的發(fā)酵培養(yǎng)基和發(fā)酵條件,為生產(chǎn)及應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。并進(jìn)一步對(duì)菌株產(chǎn)生的抗生物質(zhì)進(jìn)行分離純化,并對(duì)其理化性質(zhì)進(jìn)行研究。將分離的拮抗菌株進(jìn)行盆栽試驗(yàn),設(shè)置兩組,一組將拮抗菌株直接注入到土壤中,另一組將
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