香蕉枯萎病拮抗細(xì)菌的篩選及其利用研究.pdf

1、本文報(bào)道了兩株香蕉枯萎病(Fusarium oxysporum f.sp.cubense race4)的拮抗細(xì)菌篩選及其利用研究，初步探究了兩株拮抗細(xì)菌的防病效果、定殖情況、經(jīng)不同處理后的酶活變化及BTSF菌株的促生作用及防病機(jī)理，對(duì)香蕉枯萎病的生物防治具有一定的實(shí)際參考價(jià)值。 從香蕉枯萎病病區(qū)健株香蕉中分離的26株細(xì)菌在室內(nèi)平板拮抗測定中均具有拮抗活性，經(jīng)初篩及不同方式復(fù)篩最終篩選出2株拮抗效果最好的菌株，編號(hào)分別為BTWC、

2、BTSF。 通過不同時(shí)間接種處理室內(nèi)的盆栽香蕉苗的防治試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)澆灌兩菌株BTWC和BTSF的5×106 cfu/mL發(fā)酵液對(duì)防治香蕉枯萎病具有較好效果。接種病菌前3 d澆灌發(fā)酵液于香蕉苗根部，兩株拮抗細(xì)菌的防效分別為72.49％、83.10％，而接種病菌后3 d再進(jìn)行防治，BTWC和BTSF的防效已分別降至46.43％、38.77％，兩菌株發(fā)酵液對(duì)香蕉盆栽苗的防效變化規(guī)律相似。其中，菌株BTSF的防效要好于菌株BTWC和50％

3、多菌靈WP800倍液藥劑的對(duì)照。初步推測拮抗菌的防病作用可能是因?yàn)橄冉臃N拮抗細(xì)菌后菌體占領(lǐng)了病原菌的侵入位點(diǎn)同時(shí)又可分泌抗菌物質(zhì)，既可阻止病原菌的侵入又抑制了病原菌的生長，因而提高了防病效果。 用灌根法和涂抹葉片法接種拮抗細(xì)菌發(fā)酵液，不同時(shí)間取樣，發(fā)現(xiàn)在植物的根莖葉中均可分離回收到抗 Rif400μg/mL的標(biāo)記突變株，表明兩菌株均能主動(dòng)進(jìn)入香蕉體內(nèi)并在植株各個(gè)組織部位穩(wěn)定定殖并進(jìn)行繁殖、傳導(dǎo)，這一結(jié)論為探討拮抗菌對(duì)香蕉枯萎病的

4、抗病性機(jī)制研究提供了理論依據(jù)。 分別采用愈創(chuàng)木酚氧化法、NBT光還原法等酶活性測定方法對(duì)灌根接種病菌懸浮液和拮抗細(xì)菌液的香蕉苗體內(nèi)的POD、SOD、PAL、PPO等5種防御酶活性變化進(jìn)行了研究，旨在探明香蕉抗枯萎病的作用機(jī)理以及拮抗細(xì)菌的誘導(dǎo)抗病機(jī)制。研究結(jié)果表明：經(jīng)拮抗菌液處理后的5種防御酶的活性變化呈現(xiàn)一定的規(guī)律，其中，SOD活性較清水對(duì)照和僅接種病菌液處理的低，PAL、PPO、CAT、POD活性均比清水對(duì)照要高，說明香蕉苗

5、經(jīng)拮抗細(xì)菌液誘導(dǎo)處理后的防御酶活性普遍會(huì)升高。 將拮抗細(xì)菌BTSF菌株(經(jīng)鑒定為枯草芽孢桿菌Bacillus subtilis)發(fā)酵液過濾離心去除菌體后添加不同量于香蕉的不同組織培養(yǎng)基中使含其體積分?jǐn)?shù)為10％(VN)、20％(VN)、30％(V/V)，研究由此菌體產(chǎn)生的代謝物質(zhì)對(duì)香蕉生長的影響。結(jié)果表明，BTSF菌株能產(chǎn)生對(duì)各種香蕉組培體具促生性的代謝物質(zhì)，其能很好地提高誘導(dǎo)愈傷組織、增強(qiáng)叢生芽的分化和生根苗的生根作用，具有較好