香蕉枯萎病拮抗細菌的篩選及其利用研究.pdf

1、本文報道了兩株香蕉枯萎病(Fusarium oxysporum f.sp.cubense race4)的拮抗細菌篩選及其利用研究，初步探究了兩株拮抗細菌的防病效果、定殖情況、經(jīng)不同處理后的酶活變化及BTSF菌株的促生作用及防病機理，對香蕉枯萎病的生物防治具有一定的實際參考價值。 從香蕉枯萎病病區(qū)健株香蕉中分離的26株細菌在室內(nèi)平板拮抗測定中均具有拮抗活性，經(jīng)初篩及不同方式復(fù)篩最終篩選出2株拮抗效果最好的菌株，編號分別為BTWC、

2、BTSF。 通過不同時間接種處理室內(nèi)的盆栽香蕉苗的防治試驗，發(fā)現(xiàn)澆灌兩菌株BTWC和BTSF的5×106 cfu/mL發(fā)酵液對防治香蕉枯萎病具有較好效果。接種病菌前3 d澆灌發(fā)酵液于香蕉苗根部，兩株拮抗細菌的防效分別為72.49％、83.10％，而接種病菌后3 d再進行防治，BTWC和BTSF的防效已分別降至46.43％、38.77％，兩菌株發(fā)酵液對香蕉盆栽苗的防效變化規(guī)律相似。其中，菌株BTSF的防效要好于菌株BTWC和50％

3、多菌靈WP800倍液藥劑的對照。初步推測拮抗菌的防病作用可能是因為先接種拮抗細菌后菌體占領(lǐng)了病原菌的侵入位點同時又可分泌抗菌物質(zhì)，既可阻止病原菌的侵入又抑制了病原菌的生長，因而提高了防病效果。 用灌根法和涂抹葉片法接種拮抗細菌發(fā)酵液，不同時間取樣，發(fā)現(xiàn)在植物的根莖葉中均可分離回收到抗 Rif400μg/mL的標記突變株，表明兩菌株均能主動進入香蕉體內(nèi)并在植株各個組織部位穩(wěn)定定殖并進行繁殖、傳導(dǎo)，這一結(jié)論為探討拮抗菌對香蕉枯萎病的

4、抗病性機制研究提供了理論依據(jù)。 分別采用愈創(chuàng)木酚氧化法、NBT光還原法等酶活性測定方法對灌根接種病菌懸浮液和拮抗細菌液的香蕉苗體內(nèi)的POD、SOD、PAL、PPO等5種防御酶活性變化進行了研究，旨在探明香蕉抗枯萎病的作用機理以及拮抗細菌的誘導(dǎo)抗病機制。研究結(jié)果表明：經(jīng)拮抗菌液處理后的5種防御酶的活性變化呈現(xiàn)一定的規(guī)律，其中，SOD活性較清水對照和僅接種病菌液處理的低，PAL、PPO、CAT、POD活性均比清水對照要高，說明香蕉苗

5、經(jīng)拮抗細菌液誘導(dǎo)處理后的防御酶活性普遍會升高。 將拮抗細菌BTSF菌株(經(jīng)鑒定為枯草芽孢桿菌Bacillus subtilis)發(fā)酵液過濾離心去除菌體后添加不同量于香蕉的不同組織培養(yǎng)基中使含其體積分數(shù)為10％(VN)、20％(VN)、30％(V/V)，研究由此菌體產(chǎn)生的代謝物質(zhì)對香蕉生長的影響。結(jié)果表明，BTSF菌株能產(chǎn)生對各種香蕉組培體具促生性的代謝物質(zhì)，其能很好地提高誘導(dǎo)愈傷組織、增強叢生芽的分化和生根苗的生根作用，具有較好