板藍(lán)根提取液對(duì)小鼠免疫機(jī)能的影響

1、板藍(lán)根提取液對(duì)小鼠免疫機(jī)能的影響（一）材料：1.板藍(lán)根提取液（直接可灌胃）（蒸餾水一瓶，生理鹽水一瓶，95%乙醇一瓶，量筒小3支，量筒大1支，燒杯3個(gè)，玻璃棒3個(gè)，吸管10個(gè)，注射器一天預(yù)計(jì)三支總數(shù)為3x試驗(yàn)天數(shù)，托盤天平2個(gè)，培養(yǎng)基3套）2.酒精燈3個(gè)，消毒酒精棉一套3.大小鑷子各3把，小剪刀3把4.小鼠（46周，1822g20只，雌雄隨機(jī)分兩組）5.雞細(xì)胞懸液6.移液槍3把（大小規(guī)格），槍頭1盒，EP管10個(gè)，濾紙10張，試管10個(gè)

2、，膠頭滴管3個(gè)7.染色裝置，（瑞氏染色）8.顯微鏡，解剖盤，固定針，載破片蓋破片（各6個(gè)），平皿（6個(gè)），96孔培養(yǎng)板3個(gè)，離心機(jī)，培養(yǎng)箱9.試驗(yàn)用手套（20個(gè)）口罩（20個(gè)）生理鹽水，待其稍干后，進(jìn)行瑞氏染色。油鏡觀察吞噬細(xì)胞數(shù)量，計(jì)算指數(shù)，雞紅細(xì)胞為淡黃色橢圓形有核的細(xì)胞，數(shù)量多體積較大不規(guī)則的細(xì)胞，表面有許多似毛刺裝的小突起即為吞噬細(xì)胞。3.小鼠淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)無(wú)菌條件下分別取出A組B組小鼠脾臟，放入培養(yǎng)液中稀釋，用RPMI164

3、0培養(yǎng)液稀釋至細(xì)胞濃度為2106個(gè)mL，各取400μL至96孔培養(yǎng)板中，加入200mgLConA溶液10μL，培養(yǎng)基代替ConA溶液做對(duì)照，于37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)72h。培養(yǎng)結(jié)束前4h各取上清液200μL，加入已除菌的5mgmLMTT溶液40μL，繼續(xù)培養(yǎng)至結(jié)束。離心保留沉淀，各加入37℃DMSO300μL，振蕩10min，酶標(biāo)儀測(cè)定570nm處吸光值，計(jì)算淋巴細(xì)胞增殖指數(shù)，淋巴細(xì)胞增殖指數(shù)按式（4）計(jì)算。脾淋巴細(xì)胞增殖指數(shù)%