蓬萊玉參的早期發(fā)育及其遺傳特性的研究.pdf

1、蓬萊玉參是仿刺參（Apostichopus japonicus）的一個(gè)特殊品系，隸屬于棘皮動(dòng)物門(Echinodermata)、海參綱(Holothuroidea)、楯手目(Aspidochirotida)、刺參科(Stichopodidae)，仿刺參屬(Apostichopus)。蓬萊玉參來源于煙臺(tái)蓬萊，全身純白色。野生數(shù)目極少，近幾年剛被重視，受到海參養(yǎng)殖業(yè)的熱切關(guān)注。隨著刺參養(yǎng)殖技術(shù)的成熟和發(fā)展，蓬萊玉參的繁育技術(shù)也實(shí)現(xiàn)了突破，因

2、此對蓬萊玉參的生物學(xué)、遺傳學(xué)的研究亟待解決。
　　本論文以蓬萊玉參為研究對象，對其早期發(fā)育過程的形態(tài)學(xué)進(jìn)行顯微觀察和不同日齡幼參的生長性狀進(jìn)行灰色關(guān)聯(lián)度分析，以及對其不同時(shí)期的胚胎和成體的呼吸樹進(jìn)行染色體制備研究，以期對蓬萊玉參的形態(tài)特征、生長規(guī)律和染色體進(jìn)一步了解，為蓬萊玉參的增殖與人工選育提供參考依據(jù)。
　　實(shí)驗(yàn)一：蓬萊玉參早期發(fā)育的形態(tài)學(xué)觀察
　　本實(shí)驗(yàn)對蓬萊玉參產(chǎn)卵、受精、胚胎及幼體發(fā)育過程進(jìn)行顯微觀察，并與普

3、通仿刺參進(jìn)行比較。在19~21℃水溫下，蓬萊玉參受精卵分別在受精12 min和24 min后釋放第一、二極體，1 h后卵裂成2細(xì)胞期，之后每30 min左右完成一次卵裂，6 h后進(jìn)入囊胚期，19 h后發(fā)育成原腸胚；40 h后進(jìn)入耳狀幼體階段，在其后側(cè)臂的一端出現(xiàn)一個(gè)不規(guī)則形的石灰質(zhì)骨片，水體腔也將出現(xiàn)在這一側(cè)；5 d和8 d后發(fā)育為中耳狀幼體和大耳狀幼體，10 d后變態(tài)發(fā)育為樽形幼體，骨片由不規(guī)則狀發(fā)育為齒輪狀，并出現(xiàn)第二個(gè)石灰質(zhì)骨片；

4、12 d后發(fā)育為五觸手，14 d后發(fā)育成稚參，40 d后發(fā)育為幼參。蓬萊玉參胚胎和幼體發(fā)育時(shí)序與當(dāng)前已報(bào)道的仿刺參無顯著差異。蓬萊玉參終生發(fā)育體色始終為白色，而普通仿刺參在45日齡時(shí)體表局部出現(xiàn)多種色素，疣足處較為明顯，60日齡幼體一半以上全身布滿多種色素。蓬萊玉參因通體純白色而受到了眾多養(yǎng)殖企業(yè)和研究領(lǐng)域的關(guān)注，本文的結(jié)果為其今后的研究提供可靠的基礎(chǔ)資料。
　　實(shí)驗(yàn)二：蓬萊玉參的生長性狀分析
　　本實(shí)驗(yàn)對象取自出生于201

5、5年4月29日的蓬萊玉參，分別取112日齡、142日齡、206日齡、262日齡和320日齡幼體，使用0.3~0.4 mol/L濃度的MgSO4溶液進(jìn)行麻醉1小時(shí)，挑取20個(gè)完全舒展的幼體進(jìn)行體長、疣足數(shù)目、管足數(shù)目和體質(zhì)量四個(gè)生長性狀的測量。然后使用灰色關(guān)聯(lián)度對四個(gè)生長性狀與日齡的關(guān)聯(lián)度分析；同時(shí)也對體長、疣足數(shù)目、管足數(shù)目與體質(zhì)量的關(guān)聯(lián)度分析。分析結(jié)果顯示管足數(shù)目與日齡的關(guān)聯(lián)度是0.8219，關(guān)系最為密切；體質(zhì)量、體長與日齡的關(guān)系較為

6、密切，分別是0.7772和0.7732；疣足數(shù)目與日齡不密切，僅為0.4655。同時(shí)，管足數(shù)目與質(zhì)量關(guān)聯(lián)度是0.8370，關(guān)系最為密切；體長與體質(zhì)量較為密切，是0.7592；疣足與體質(zhì)量不密切，僅為0.4178。最后得出結(jié)論：100~300日齡的蓬萊玉參的管足數(shù)目與日齡和體質(zhì)量關(guān)系密切，管足數(shù)目或?qū)⒊蔀榕袛嗥淠挲g和人工選育的一個(gè)新依據(jù)。
　　實(shí)驗(yàn)三：蓬萊玉參染色體的初步研究
　　本實(shí)驗(yàn)比較了蓬萊玉參胚胎階段的囊胚期、原腸胚末

7、期和成參的呼吸樹，經(jīng)過不同濃度（0.04％、0.06%、0.08%、0.1%）的秋水仙素和不同作用時(shí)間處理（30 min、45 min、1h），在不同濃度（0.075 mol/L與0.0375 mol/L的KCl）的低滲液處理后染色體制備的效果。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，以蓬萊玉參的囊胚期為實(shí)驗(yàn)材料沒能獲取染色體；以原腸胚末期為材料時(shí)，0.06%濃度的秋水仙素處理1 h能獲得形態(tài)較好的中期分裂相染色體；以成體的呼吸樹為材料時(shí)，0.04%濃度的秋水仙