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文檔簡介
1、核酸樣本的質(zhì)量保證,,,,,,,,,,,,,,檢測前,采血后,,,,關(guān)鍵點(diǎn)是什么?,,第一步:標(biāo)本的采集-采血管? 需考慮的因素:1. 試劑要求:EDTA會(huì)螯合部分二價(jià)離子,PCR反應(yīng)中需Mn2+或Mg2+2. 混樣設(shè)備/檢測設(shè)備適用3. 運(yùn)輸要求有分離膠更適合運(yùn)輸4.使用前必須評(píng)估結(jié)果重復(fù)性:PPT,防污染、防溶血,第二步:標(biāo)本的采集-離心? 離心條件800-1600g 20min? 離心分離的時(shí)間要求—HCV
2、RNA 和HIV RNA研究方式不同(樣本、檢測)結(jié)論差異大2hr 2(RT)4hr 16(RT) √6hr 6(RT)24hr 下降 2(RT) × 穩(wěn)定4(RT) √,及時(shí)離心,,第三步:標(biāo)本的運(yùn)送? 2-8°C穩(wěn)定48hr第四步:標(biāo)本的接收、保存? 確認(rèn)標(biāo)本數(shù)量? 運(yùn)輸狀態(tài)? 標(biāo)本狀態(tài):溶血、脂血? 保存:用于檢測的樣本管:檢測前保存用于留樣備查的樣本:樣本量第五步:檢測前核對(duì)?
3、狀態(tài)? 標(biāo)識(shí)? 接收時(shí)間離心后至檢測前2-8°C保存不超過48小時(shí),2-8°C穩(wěn)定→盡量-70℃保存→檢測前恢復(fù)至常溫檢測優(yōu)點(diǎn):提高HCV、HIV檢出率缺點(diǎn):給實(shí)際工作帶來困難,很難按時(shí)完成工作 (ˇ?ˇ) 思考~,,,專門的留樣設(shè)備可大大增加存儲(chǔ)空間,? 理論上-80 °C? 保存量:核酸檢測樣本量及酶免確認(rèn)實(shí)驗(yàn)
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