gb 6195-1986 水果、蔬菜維生素c含量測定法(2.6-二氯靛酚滴定法)

1、中華人 民共和國國家標準UDC 6 3 4 水果、蔬菜維生素C 含量測定法 8 8 5 5 4 3 GB 6 1 8 5 一 . 6 ( 2 , 6 一 二氛 靛酚滴定法)D e t e r m i n a t i o n o f v i t a m i n C I n v e g e t a b l e s a n d f r u i t s( 2 . 6 - d i c h l o r o - i n d o p

2、h e n o l t i t r a t i o n me t h o d )1 適用范圍本標準適用于果品、 蔬菜 及其加工制品中 還原型 抗壞血 酸的測定 ( 不含二價鐵、 二 價錫、 一 價銅、二 氧化 硫、亞硫酸鹽或硫代硫 酸鹽) ，不適用于深色 樣品。2 測定原理染料 2 , 6 一 二氯靛酚的 顏色反 應(yīng)表現(xiàn)兩種特性，一 是取決于 其氧化還原狀態(tài)，氧 化態(tài)為深藍色， 還原態(tài)變?yōu)闊o色， 二是受其 介質(zhì)的酸度影響， 在堿 性

3、溶液中 呈深 藍色，在酸 性介質(zhì)中 呈淺 紅色。用藍色的堿性染料標準溶液，對含維生素C 的酸性浸出 液進行氧化還原滴定， 染料被還原為無色， 當(dāng) 到 達 滴定 終點 時，多 余 的 染 料 在酸 性介 質(zhì)中 則 表 現(xiàn)為 淺 紅色 ，由 染 料 用 量計 算 樣 品中 還 原 型 抗 壞血酸的含量。3 儀器設(shè)備: 一: ’高 速 組 織 搗 碎 機 : 8 0 0 0 一 1 2 0 0 0 r / m i n e分析天平。 滴 定

4、管 : 2 5 m l 、 1 O m i o 容量 瓶: 1 0 0 m l o 錐形 瓶: 1 0 0 m l 、 5 0 m l 。吸管: 1 0 m 1 、 5 . 1 、 2 M I 、 I M I 。 燒杯: 2 5 0 m l 、 5 0 m t o漏 斗。4 試劑 ( 凡未加說明者 均為 分 析純)4 . 1 浸提劑4 . 1 . 1 偏磷酸:2 %溶液 ( W/ V ) *4 . 1 . 2 草酸:2

5、 % 溶液 ( W/ V ) 。4 . 2 抗壞血 酸標準溶液 ( 1 m g / m l ) : 稱取1 0 0 m g( 準確至0 . l m g ) 抗壞血 酸* * ， 溶于 浸提劑中 并 稀至1 0 0 m l 。 現(xiàn)配 現(xiàn)用。4 . 3 2 . 6 一 二氯 靛酚( 2 , 6 一二 氯靛 酚A 5 ' I 噪酚鈉鹽) 溶液: 稱取碳酸氫鈉5 2 m g 溶解在2 0 0 m l 熱蒸 餾水。 偏磷酸不

6、穩(wěn)定，切勿加熱。。 。一 般 抗壞血酸純度為9 9 . 5 % 以上 ，可不標定。如試劑 發(fā)黃，則棄去不用。若要檢查其純度，可按附錄B 方法標 定。國 家標準 局1 9 8 6 一 0 卜1 8 發(fā)布 1 9 8 6 一 0 8 一 o f 實施GB 6 1 9 5 一 8 6附 錄 A 二甲 苯一 二 銀靛酚比 色法( 補充件)A. 1 適用范圍測 定深色樣品中 還原型 抗壞血 酸。A. 2 測定原理用 定量 的2 , 6 一 二

7、氯靛酚染 料與 試 樣中 的維 生索C 進行氧 化還原反應(yīng)，多余的染料在 酸 性環(huán)境中 呈 紅色， 用 二 甲 苯 萃 取后比 色， 在一 定范 圍內(nèi)， 吸 光 度 與 染 料濃 度呈 線 性相關(guān)， 由 剩 余染 料 濃 度用 差減法計算維生素C含量。A . 3 儀器 設(shè)備A. 3 . 1 分光 光度 計或比 色計。A . 3 . 2 具 塞試管: 5 0 m l oA . 4 試 劑 〔 皆 為 分 析 純)A. 4 . 1 偏磷酸:

8、 2 % 溶液 ( W/ V ) 。A. 4 . 2 乙酸鈉 緩沖溶液 ( P H 4 . 0 ) : 5 0 0 - 1 5 0 % ( W/ V )的乙 酸鈉溶液與 5 0 0 - 1 冰乙 酸混合 。A. 4 . 3 2 , 6 一 二氯靛酚溶液:參照4 . 3 條。A. 4 . 4 二甲 苯。A . 5 測定 步驟A . 5 . 1 標準曲線 的繪制: 用6 只 5 0 m l 具 塞試管加 人5 m l 2 %偏 磷

9、酸和5 m l p H 4 . 0 的乙酸鈉緩沖 液，然后 依次加人 0 . 0 , 0 . 1 , 0 . 3 , 0 . 6 , 0 . 9 , 1 . 2 及1 . 5 m 1 2 , 6 一 二氯靛 附溶液， 用力 搖 動5 5 ， 再向 各 試 恰 中 加 人 J O m l 二 甲 苯 ， 再 激 烈 搖 動2 0 s , 靜 置 分 層 后 與 試 樣 管 同 時 比 色 ( 無 染 料 的 試 液 作

10、空白 ) ， 以 吸光度為 縱坐標， 2 , 6 一二 氯靛 酚的毫升 數(shù)為 橫坐標繪制 標準曲 線。A . 5 . 2 吸取5 m l 2 % 偏磷酸樣品浸出 液 ( 參照5 . 1 條) 于5 0 m l 具塞試 管中， 加5 m l p H 4 . 。 的乙酸 鈉 緩沖 液和2 m l 染 料 溶 液 ， 激 烈 搖 動5 s ， 立 即 加 人l o m l 二甲 苯， 再 激烈 搖 動2 0 5 ，待 靜 置分 層

11、后， 從二甲 苯層中 小 心吸取一 份， 放人l c m 比色 杯中于5 0 0 n - 波長下 進行比色。記 錄吸光度A,在標準 曲 線上 查出二 甲 苯 層中 2 , 6 一 二 氯靛酚的毫升數(shù)。整個 操作應(yīng) 在3 0 m i n 內(nèi)完 成。A. 6 計算公式維生素 c ( m g 八 O O g )式仁 卜 2 - 所 用 2 , 6 一二 氯 靛 酚染 料的 體積，I j - 查 得 2 , 6 一 二 氯 靛 酚 溶 液