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1、中文 中文 6120 字出處: 出處:Wang L, Pan J, Wang T, et al. Pathological cyclic strain-induced apoptosis in human periodontal ligament cells through the RhoGDIalpha/caspase-3/PARP pathway[J]. PloS one, 2013, 8(10): e75973.病理周期應(yīng)變通過
2、病理周期應(yīng)變通過 RhoGDIα/Caspase-3 RhoGDIα/Caspase-3/PARP /PARP 通路引發(fā)人體牙周膜細(xì)胞凋亡 通路引發(fā)人體牙周膜細(xì)胞凋亡Pathological Cyclic Strain-Induced Apoptosis in Human Periodontal Ligament Cells through the RhoGDIa/Caspase-3/PARP Pathway學(xué) 部(院):
3、 電子信息與電氣工程學(xué)部 專 業(yè): 生物醫(yī)學(xué)工程 病理周期應(yīng)變通過 病理周期應(yīng)變通過 RhoGDIα/Caspase-3/PARP RhoGDIα/Caspase-3/PARP 通路引發(fā)人體牙周膜細(xì)胞凋亡 通路引發(fā)人體牙周膜細(xì)胞凋亡- 2 -力導(dǎo)致牙槽骨吸收和牙齒移位,但過度正畸力會引發(fā)過度周期應(yīng)變,進(jìn)而導(dǎo)致局部貧血、組織透明變化及 PDL 細(xì)胞死亡。細(xì)胞死亡有兩種機(jī)制:一是壞死,細(xì)胞的新
4、陳代謝和膜完整性受到主要破壞;二是凋亡,凋亡是細(xì)胞內(nèi)部的自殺程序。程序細(xì)胞死亡(凋亡)整合了多重生理學(xué)和病理學(xué)的死亡信號,對長壽命哺乳動物調(diào)節(jié)組織更新有著重要意義。許多凋亡信號通路已被證實,包括 Fas/Fasl 通路,caspase 家族通路,細(xì)胞色素C 信號通路和線粒體通路。在這些信號通路中,caspase 家族通路被認(rèn)為是最重要的通路,因為許多信號通路最終激活的是 caspase 串聯(lián)體。Caspase 是半胱氨酸蛋白酶家族成員,
5、在細(xì)胞凋亡起著重要作用。Caspases 被激活后可以切開底物蛋白如 PARP,進(jìn)而引發(fā)蛋白降解和細(xì)胞不可逆凋亡。Rho 家族參與了細(xì)胞的極性調(diào)控、增殖、粘附、擴(kuò)散、細(xì)胞骨架組合及凋亡。因為RhoGDlα 在人類腫瘤、抗藥物癌癥細(xì)胞品系中頻繁過度表達(dá),所以可能是癌癥細(xì)胞的抗凋亡分子。對于正常細(xì)胞,有研究顯示 RhoGDlα 在低剪應(yīng)力引發(fā)平滑肌細(xì)胞凋亡這一過程中起到了決定性作用。因此,RhoGDlα 也被認(rèn)為參與到人體內(nèi)其他正常細(xì)胞如人
6、體 PDL 細(xì)胞的凋亡過程中。至今為止,還沒有體外實驗明確的研究在病理狀態(tài)下的周期性應(yīng)變引發(fā)人體 PDL 細(xì)胞凋亡的機(jī)制。在這次研究中,我們評估了 RhoGDlα、caspase-3 和 PARP 蛋白在周期性應(yīng)變引發(fā)的人體 PDL 細(xì)胞凋亡中的作用。首先,我們研究了周期性拉伸、細(xì)胞形態(tài)和持續(xù) 6 小時和 24 小時病理層面拉伸力(20%周期應(yīng)變)之間的關(guān)系。細(xì)胞應(yīng)變后,我們立即發(fā)現(xiàn) PDL 細(xì)胞凋亡的范圍取決于其發(fā)生應(yīng)變的時間。我們利
7、用倒置相差顯微鏡觀測凋亡細(xì)胞形態(tài),并用流式細(xì)胞儀對每組的凋亡凋亡細(xì)胞計數(shù)。另外,我們利用Western blot 對 PDL 細(xì)胞中的 RhoGDIα,caspase-3 和 PARP 蛋白進(jìn)行分析。我們的研究表明病理周期性應(yīng)變通過 RhoGDIα 信號串聯(lián)體激活 caspase-3 引發(fā) PDL 細(xì)胞凋亡。實驗材料及方法 實驗材料及方法抗體和試劑 抗體和試劑Western blot 和免疫細(xì)胞化學(xué)所用的抗體包括單克隆的 anti-cy
8、tokeratin(D1E4)(1:500) ,anti-vimentin(D21H3) (1:500) ,單克隆的 anti-caspase(8G10)(1:500),單克隆 anti-PARP(46D11)(Cell Signaling,Beverly,MA,USA)。多克隆 anti-RhoGDlα antibody(1:500),來源于 Sigma(St.Louis,MO,USA) 。倫理申明 倫理申明這項研究草案被上海交通大學(xué)
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