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文檔簡介
1、第一章 第一章1.生物工藝學定義:生物工藝學,也稱生物技術,是指以現代生命科學為基礎,結合其他基礎學科的科學原理,采用先進的過程技術手段,按照設計改造生物體或生物原料,為人類生產出所需要產品或達到某種目的的技術。 2.研究內容:在生物反應過程中具有普遍意義的工藝技術問題。以探討生物產品生產過程中共性為目的,從工藝角度闡明細胞生長和代謝產物與細胞的培養(yǎng)條件之間的相互關系,為生產過程的優(yōu)化提供理論基礎。3.生物技術的發(fā)展簡史: (1).傳
2、統(tǒng)經驗制造技術——天然發(fā)酵階段特點:自然發(fā)酵、歷史悠久、工藝獨特、經驗豐富(2).純種培養(yǎng)技術的成功——初級代謝產物生產階段標志:了解微生物在發(fā)酵過程中的作用 特點是:大多數為厭氧發(fā)酵過程的產物;產物的化學結構簡單,初級代謝產物;其生產通常是在敞開環(huán)境中進行;生產過程簡單,生產設備相對要求不高,規(guī)模一般不大。 (3).攪拌技術成熟——好氧培養(yǎng)階段標志:抗生素工業(yè)的通風機械攪拌罐的應用 特點:產品類型多,不但有初級代謝產物,也
3、出現了次級代謝產物,還有生物轉化及酶反應等產品;技術要求高,主要使用純種發(fā)酵,在發(fā)酵過程中通入無菌空氣;規(guī)模巨大;技術發(fā)展快。(4).基因重組技術的成熟——現代生物技術階段標志: DNA 是遺傳物質。4.生物技術的應用:農業(yè),食品工業(yè),醫(yī)藥工業(yè),化學冶金工業(yè),能源工業(yè),環(huán)境保護第二章 第二章5.常用工業(yè)生產微生物菌種:工業(yè)常用細菌、放線菌、酵母菌、霉菌6.誘變育種的一般步驟:出發(fā)菌株-自然分離純化-制備單孢子懸液-誘變劑處理-稀釋涂平板
4、-培養(yǎng),計數-突變株分離-初篩-復篩-突變性能檢測-篩選出高產菌株-保存7.初篩,復篩概念與篩選方法初篩:目的是刪去明確不符合要求的大部分菌株,把生產性狀類似的菌株盡量保留下來,使優(yōu)良菌種不致于漏網。初篩工作以量為主,測定的精確性還在其次。初篩的手段應盡可能快速、簡單。復篩的目的是確認符合生產要求的菌株,所以,復篩步驟以質為主,應精確測定每個菌株的生產指標。初篩選方法 平皿快速檢測法:紙片培養(yǎng)顯色法,變色圈法,透明圈法,生長圈法,抑制圈
5、法等復篩方法:(1)微生物初篩鑒定(——何屬?何種? 目的:預知微生物對人、動物或植物是否有致病性。但分類復雜。 )(2)發(fā)酵培養(yǎng)基的選擇(3) 培養(yǎng)與發(fā)酵(4) 抽提試驗8.微生物雜交育種基本程序:選擇原始親本-誘變篩選直接親本-親和力鑒定-雜交-分離到基本培養(yǎng)基和選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng)-篩選重組體-鑒定9.什么是原始親本,直接親本?原始親本是微生物雜交育種中具有不同遺傳背景的優(yōu)質出發(fā)菌株,主要根據雜交的目的來選擇.從育種角度出發(fā)。通常選
6、擇具有優(yōu)良性狀如產量高,代謝快,產孢子能力強,無色素,泡沫少,粘性小等發(fā)酵性能好的菌株為原始親本。直接親本 微生物雜交育種所使用的配對菌株稱為直接親本。特點:經原始親本菌株誘變而來;具有營養(yǎng)缺陷型標記或其他標記。10.孢子制備分為放線菌孢子制備,霉菌孢子制備,細菌培養(yǎng)物制備 各自特點?(1)放線菌孢子制備 瓊脂斜面培養(yǎng)基、不豐富碳源和氮源,溫度多數 28°C,少數 37°C,培養(yǎng)時間 5-14 天。反應 1:
7、酶催化,淀粉水解成葡萄糖——主要反應反應 2:酸、熱作用發(fā)生的復合反應——次要反應反應 3:分解反應——次要反應19.酸水解條件選擇及其控制:1)淀粉的質量 :酸水解法以酸為催化劑,無專一性 2)淀粉乳濃度的選擇 淀粉乳濃度下降,DE 值上升,副反應減少;濃度過低,設備利用率低。3)酸的種類和用量 4)糖化溫度、壓力和時間 5)淀粉中含蛋白質等雜質對糖液質量的影響 6)糖化終點的控制和檢查20.淀粉酶水解的的兩個
8、步驟:液化和糖化酶 水解位置 水解次序 水解產物液化 淀粉酶 1,4 糖苷鍵 無先后次序葡萄糖、麥芽糖、麥芽三塘、異麥芽糖、低聚糖糖化 糖化酶 1,4 和 1,6 糖苷鍵 從非還原性末端開始 葡萄糖21.糊化和老化的概念:1)淀粉的糊化:指淀粉受熱后,淀粉顆粒膨脹,晶體結構消失,互相接觸變成糊狀液體,即使停止攪拌,淀粉也不會再沉淀的現象。2)淀粉的老化:分子間氫鍵已斷裂的糊化淀粉又重新排列形成新的氫鍵的過程,也就是復結晶過程。22.糖化
9、的概念:利用糖化酶(也稱葡萄糖淀粉酶)將淀粉液化產物糊精及低聚糖進一步水解成葡萄糖的過程。第四章 第四章23.培養(yǎng)基的概念,作用,要求?培養(yǎng)基:指一切可供微生物細胞生長繁殖和生物合成各種代謝產物所需的,按一定比例配制的多種營養(yǎng)物質的混合物。作用:滿足微生物生長、促進產物生成?;疽螅海?)滿足微生物生長所需的各種營養(yǎng)成分:碳源、氮源、生長因子等;(2)針對不同發(fā)酵規(guī)模的生產,有不同成分的培養(yǎng)基。24.微生物營養(yǎng)的五大要素:碳源,氮源,
10、無機鹽及微量元素,生長因子、前體、產物促進劑,水25.葡萄糖效應:又稱葡萄糖阻遏或分解代謝產生阻遏作用。葡萄糖或某些容易利用的碳源,其分解代謝產物阻遏某些誘導酶體系編碼的基因轉錄的現象。26.碳源的作用:提供微生物菌種的生長繁殖所需的能源和合成菌體所必需的碳成分 ;提供合成目的產物所必須的碳成分。27.氮源的定義,作用,類型?定義:指構成微生物細胞和代謝產物中的氮素來源的營養(yǎng)物質。作用:用于構成菌體細胞物質(氨基酸,蛋白質、核酸等)和
11、含氮代謝物。類型:分為無機氮源和有機氮源兩種。28.生長因子定義:微生物生長不可缺少的微量的有機物質,如氨基酸、嘌呤、嘧啶、維生素等。 只對于無法合成這些成分的微生物必不可少。29.培養(yǎng)基按純度分為哪 3 種?按用途分為哪 3 種?按純度分為合成培養(yǎng)基、天然培養(yǎng)基和半合成培養(yǎng)基按用途分為孢子、種子和發(fā)酵培養(yǎng)基30.培養(yǎng)基成分選擇的原則:(1)菌體的同化能力(2)代謝的阻遏與誘導(3)合適的碳氮比(4)Ph 的要求31.正交試驗的實質和步
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