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1、第一章 第一章1.生物工藝學(xué)定義:生物工藝學(xué),也稱生物技術(shù),是指以現(xiàn)代生命科學(xué)為基礎(chǔ),結(jié)合其他基礎(chǔ)學(xué)科的科學(xué)原理,采用先進(jìn)的過程技術(shù)手段,按照設(shè)計(jì)改造生物體或生物原料,為人類生產(chǎn)出所需要產(chǎn)品或達(dá)到某種目的的技術(shù)。 2.研究?jī)?nèi)容:在生物反應(yīng)過程中具有普遍意義的工藝技術(shù)問題。以探討生物產(chǎn)品生產(chǎn)過程中共性為目的,從工藝角度闡明細(xì)胞生長(zhǎng)和代謝產(chǎn)物與細(xì)胞的培養(yǎng)條件之間的相互關(guān)系,為生產(chǎn)過程的優(yōu)化提供理論基礎(chǔ)。3.生物技術(shù)的發(fā)展簡(jiǎn)史: (1).傳
2、統(tǒng)經(jīng)驗(yàn)制造技術(shù)——天然發(fā)酵階段特點(diǎn):自然發(fā)酵、歷史悠久、工藝獨(dú)特、經(jīng)驗(yàn)豐富(2).純種培養(yǎng)技術(shù)的成功——初級(jí)代謝產(chǎn)物生產(chǎn)階段標(biāo)志:了解微生物在發(fā)酵過程中的作用 特點(diǎn)是:大多數(shù)為厭氧發(fā)酵過程的產(chǎn)物;產(chǎn)物的化學(xué)結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,初級(jí)代謝產(chǎn)物;其生產(chǎn)通常是在敞開環(huán)境中進(jìn)行;生產(chǎn)過程簡(jiǎn)單,生產(chǎn)設(shè)備相對(duì)要求不高,規(guī)模一般不大。 (3).攪拌技術(shù)成熟——好氧培養(yǎng)階段標(biāo)志:抗生素工業(yè)的通風(fēng)機(jī)械攪拌罐的應(yīng)用 特點(diǎn):產(chǎn)品類型多,不但有初級(jí)代謝產(chǎn)物,也
3、出現(xiàn)了次級(jí)代謝產(chǎn)物,還有生物轉(zhuǎn)化及酶反應(yīng)等產(chǎn)品;技術(shù)要求高,主要使用純種發(fā)酵,在發(fā)酵過程中通入無菌空氣;規(guī)模巨大;技術(shù)發(fā)展快。(4).基因重組技術(shù)的成熟——現(xiàn)代生物技術(shù)階段標(biāo)志: DNA 是遺傳物質(zhì)。4.生物技術(shù)的應(yīng)用:農(nóng)業(yè),食品工業(yè),醫(yī)藥工業(yè),化學(xué)冶金工業(yè),能源工業(yè),環(huán)境保護(hù)第二章 第二章5.常用工業(yè)生產(chǎn)微生物菌種:工業(yè)常用細(xì)菌、放線菌、酵母菌、霉菌6.誘變育種的一般步驟:出發(fā)菌株-自然分離純化-制備單孢子懸液-誘變劑處理-稀釋涂平板
4、-培養(yǎng),計(jì)數(shù)-突變株分離-初篩-復(fù)篩-突變性能檢測(cè)-篩選出高產(chǎn)菌株-保存7.初篩,復(fù)篩概念與篩選方法初篩:目的是刪去明確不符合要求的大部分菌株,把生產(chǎn)性狀類似的菌株盡量保留下來,使優(yōu)良菌種不致于漏網(wǎng)。初篩工作以量為主,測(cè)定的精確性還在其次。初篩的手段應(yīng)盡可能快速、簡(jiǎn)單。復(fù)篩的目的是確認(rèn)符合生產(chǎn)要求的菌株,所以,復(fù)篩步驟以質(zhì)為主,應(yīng)精確測(cè)定每個(gè)菌株的生產(chǎn)指標(biāo)。初篩選方法 平皿快速檢測(cè)法:紙片培養(yǎng)顯色法,變色圈法,透明圈法,生長(zhǎng)圈法,抑制圈
5、法等復(fù)篩方法:(1)微生物初篩鑒定(——何屬?何種? 目的:預(yù)知微生物對(duì)人、動(dòng)物或植物是否有致病性。但分類復(fù)雜。 )(2)發(fā)酵培養(yǎng)基的選擇(3) 培養(yǎng)與發(fā)酵(4) 抽提試驗(yàn)8.微生物雜交育種基本程序:選擇原始親本-誘變篩選直接親本-親和力鑒定-雜交-分離到基本培養(yǎng)基和選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng)-篩選重組體-鑒定9.什么是原始親本,直接親本?原始親本是微生物雜交育種中具有不同遺傳背景的優(yōu)質(zhì)出發(fā)菌株,主要根據(jù)雜交的目的來選擇.從育種角度出發(fā)。通常選
6、擇具有優(yōu)良性狀如產(chǎn)量高,代謝快,產(chǎn)孢子能力強(qiáng),無色素,泡沫少,粘性小等發(fā)酵性能好的菌株為原始親本。直接親本 微生物雜交育種所使用的配對(duì)菌株稱為直接親本。特點(diǎn):經(jīng)原始親本菌株誘變而來;具有營(yíng)養(yǎng)缺陷型標(biāo)記或其他標(biāo)記。10.孢子制備分為放線菌孢子制備,霉菌孢子制備,細(xì)菌培養(yǎng)物制備 各自特點(diǎn)?(1)放線菌孢子制備 瓊脂斜面培養(yǎng)基、不豐富碳源和氮源,溫度多數(shù) 28°C,少數(shù) 37°C,培養(yǎng)時(shí)間 5-14 天。反應(yīng) 1:
7、酶催化,淀粉水解成葡萄糖——主要反應(yīng)反應(yīng) 2:酸、熱作用發(fā)生的復(fù)合反應(yīng)——次要反應(yīng)反應(yīng) 3:分解反應(yīng)——次要反應(yīng)19.酸水解條件選擇及其控制:1)淀粉的質(zhì)量 :酸水解法以酸為催化劑,無專一性 2)淀粉乳濃度的選擇 淀粉乳濃度下降,DE 值上升,副反應(yīng)減少;濃度過低,設(shè)備利用率低。3)酸的種類和用量 4)糖化溫度、壓力和時(shí)間 5)淀粉中含蛋白質(zhì)等雜質(zhì)對(duì)糖液質(zhì)量的影響 6)糖化終點(diǎn)的控制和檢查20.淀粉酶水解的的兩個(gè)
8、步驟:液化和糖化酶 水解位置 水解次序 水解產(chǎn)物液化 淀粉酶 1,4 糖苷鍵 無先后次序葡萄糖、麥芽糖、麥芽三塘、異麥芽糖、低聚糖糖化 糖化酶 1,4 和 1,6 糖苷鍵 從非還原性末端開始 葡萄糖21.糊化和老化的概念:1)淀粉的糊化:指淀粉受熱后,淀粉顆粒膨脹,晶體結(jié)構(gòu)消失,互相接觸變成糊狀液體,即使停止攪拌,淀粉也不會(huì)再沉淀的現(xiàn)象。2)淀粉的老化:分子間氫鍵已斷裂的糊化淀粉又重新排列形成新的氫鍵的過程,也就是復(fù)結(jié)晶過程。22.糖化
9、的概念:利用糖化酶(也稱葡萄糖淀粉酶)將淀粉液化產(chǎn)物糊精及低聚糖進(jìn)一步水解成葡萄糖的過程。第四章 第四章23.培養(yǎng)基的概念,作用,要求?培養(yǎng)基:指一切可供微生物細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖和生物合成各種代謝產(chǎn)物所需的,按一定比例配制的多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的混合物。作用:滿足微生物生長(zhǎng)、促進(jìn)產(chǎn)物生成?;疽螅海?)滿足微生物生長(zhǎng)所需的各種營(yíng)養(yǎng)成分:碳源、氮源、生長(zhǎng)因子等;(2)針對(duì)不同發(fā)酵規(guī)模的生產(chǎn),有不同成分的培養(yǎng)基。24.微生物營(yíng)養(yǎng)的五大要素:碳源,氮源,
10、無機(jī)鹽及微量元素,生長(zhǎng)因子、前體、產(chǎn)物促進(jìn)劑,水25.葡萄糖效應(yīng):又稱葡萄糖阻遏或分解代謝產(chǎn)生阻遏作用。葡萄糖或某些容易利用的碳源,其分解代謝產(chǎn)物阻遏某些誘導(dǎo)酶體系編碼的基因轉(zhuǎn)錄的現(xiàn)象。26.碳源的作用:提供微生物菌種的生長(zhǎng)繁殖所需的能源和合成菌體所必需的碳成分 ;提供合成目的產(chǎn)物所必須的碳成分。27.氮源的定義,作用,類型?定義:指構(gòu)成微生物細(xì)胞和代謝產(chǎn)物中的氮素來源的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。作用:用于構(gòu)成菌體細(xì)胞物質(zhì)(氨基酸,蛋白質(zhì)、核酸等)和
11、含氮代謝物。類型:分為無機(jī)氮源和有機(jī)氮源兩種。28.生長(zhǎng)因子定義:微生物生長(zhǎng)不可缺少的微量的有機(jī)物質(zhì),如氨基酸、嘌呤、嘧啶、維生素等。 只對(duì)于無法合成這些成分的微生物必不可少。29.培養(yǎng)基按純度分為哪 3 種?按用途分為哪 3 種?按純度分為合成培養(yǎng)基、天然培養(yǎng)基和半合成培養(yǎng)基按用途分為孢子、種子和發(fā)酵培養(yǎng)基30.培養(yǎng)基成分選擇的原則:(1)菌體的同化能力(2)代謝的阻遏與誘導(dǎo)(3)合適的碳氮比(4)Ph 的要求31.正交試驗(yàn)的實(shí)質(zhì)和步
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