蛹蟲草基質(zhì)多糖納米硒復(fù)合物的制備及其生物活性初探.pdf

1、蛹蟲草基質(zhì)多糖是優(yōu)良的保健調(diào)節(jié)劑，能提高機(jī)體的免疫、抗氧化功能，并且對(duì)正常細(xì)胞無(wú)毒副作用。近年來(lái)，人們已發(fā)現(xiàn)多種真菌多糖的生物活性與其結(jié)構(gòu)和溶液中的分子鏈構(gòu)象有密切關(guān)系。納米硒是一種高效低毒的優(yōu)于無(wú)機(jī)硒和有機(jī)硒的硒形態(tài)，具有獨(dú)特的光電功能以及良好的生物活性，已成為材料、電子、醫(yī)學(xué)、生物、化學(xué)等多學(xué)科鄰域研究的焦點(diǎn)和前沿。我們以廢棄的蛹蟲草培養(yǎng)基質(zhì)為原料，從中提取多糖，作為穩(wěn)定劑和包覆試劑，在比較溫和的氧化還原體系中制備硒納米粒子，并對(duì)其

2、生物活性進(jìn)行初步探索。
　　1.首先研究了蛹蟲草基質(zhì)多糖的高效提取，通過(guò)復(fù)合酶法（纖維素酶、果膠酶）協(xié)同超聲波法從廢棄的蛹蟲草培養(yǎng)基質(zhì)中提取基質(zhì)多糖，對(duì)提取工藝進(jìn)行優(yōu)化。利用Box-benhnken中心組合試驗(yàn)設(shè)計(jì)優(yōu)化基質(zhì)多糖的提取工藝，建立了復(fù)合酶添加量、酶解-超聲溫度、pH值、酶解-超聲時(shí)間的四因素回歸模型，確定了最佳提取工藝為在料液比為1∶30的條件下，復(fù)合酶添加量3％、酶解-超聲溫度54℃、pH值6.0、酶解-超聲時(shí)間50

3、min的最佳提取條件下，蛹蟲草基質(zhì)多糖得率為26.38％。
　　2.以蛋白脫除率、多糖損失率和清除DPPH自由基的能力為指標(biāo)，比較Sevag法，三氯乙酸(TCA)法，木瓜蛋白酶-Sevag法以及木瓜蛋白酶-TCA法脫除從蛹蟲草的廢棄固體培養(yǎng)基中提取的蟲草基質(zhì)粗多糖蛋白的效果。結(jié)果表明:木瓜蛋白酶-TCA法脫蛋白效果最好。粗多糖經(jīng)木瓜蛋白酶處理過(guò)后，TCA法脫除蛋白1次時(shí)，蛋白脫除率為92.90％，多糖損失率為9.82％，清除DPP

4、H自由基能力為55.20％，得到蛹蟲草基質(zhì)多糖(CMSP)。
　　3.為了得到理想形貌和粒徑并能夠穩(wěn)定保存的蛹蟲草基質(zhì)多糖納米硒復(fù)合物(CMSP-SeNPs)，以提取出的蛹蟲草基質(zhì)多糖為調(diào)控劑和修飾劑，以納米硒粒子的粒徑分布、平均粒徑、分散性和穩(wěn)定性為指標(biāo)，進(jìn)行單因素實(shí)驗(yàn)。確定了在蛹蟲草基質(zhì)多糖濃度為10mg/mL，混合時(shí)間為4h，亞硒酸濃度為1.0M，滴加速度為1.5rpm的條件下時(shí)，能夠制備出含硒量為54.8mg/L的蛹蟲草基

5、質(zhì)多糖納米硒復(fù)合物，以分散均勻的球形顆粒存在，粒徑均一，分散性好，穩(wěn)定性高，基質(zhì)多糖和納米硒粒子是以較弱的物理吸附方式結(jié)合在一起。
　　4.以對(duì)DPPH和羥自由基的清除能力以及對(duì)人宮頸癌細(xì)胞株Hela、乳腺癌細(xì)胞株MCF-7和人肺腺癌細(xì)胞株A549的細(xì)胞毒作用為指標(biāo)，考察了四種粒徑大小不同的CMSP-SeNPs的體外抗氧化和抗腫瘤能力。結(jié)果顯示，最小粒徑CMSP-SeNPs(d)對(duì)DPPH和羥自由基的清除能力均大于CMSP、Na2