保健食品有助于維持血糖健康水平檢驗方法

1、保健食品有助于維持血糖健康水平檢驗方法1動物實驗1.1實驗動物選用成年動物，選用小鼠（26±2g）或大鼠（180±20g）,單一性別，每組10-15只。1.2材料1.2.1試劑四氧嗑晚（C4H2N2O4W2O,分子量160.08）或鏈服佐菌素、地塞米松磷酸鈉注射液、葡 萄糖或醫(yī)用淀粉、血糖測定試紙或試劑盒，胰島素、甘油三酯、總膽固醇測定試劑盒1.2.2高熱能飼料豬油10%、蔗糖15%、蛋黃粉15%、酪蛋白5%、膽固醇

2、1.2%、膽酸鈉0.2%、碳酸氫 鈣0.6%、石粉0.4%、鼠維持飼料52.6%1.2.3儀器血糖儀、全自動生化儀、可見光分光光度計、酶標儀、天平。1.3劑量分組及受試樣品給予時間實驗設三個劑量組和一個模型對照組，以人體推薦量的10倍（小鼠）或5倍（大鼠） 為其中的一個劑量組，另設二個劑量組，高劑量一般不超過30倍，必要時設空白對照組。 同時設給予受試樣品高劑量的正常動物組。受試樣品給予時間30天，必要時可延長至45天。1.4實驗方法1

3、.4.1正常動物降糖實驗選健康成年動物按禁食3-5小時的血糖水平分組，隨機選1個對照組和1個劑量組。 對照組給予溶劑，劑量組給予高劑量濃度受試樣品，連續(xù)30天，測空腹血糖值（禁食同實 驗前），比較兩組動物血糖值。1.4.2高血糖模型降糖實驗方案一1.4.2.1胰島損傷高血糖模型1.4.2.1.1 原理四氧啥味（或鏈服佐菌素）是一種”細胞毒劑，可選擇性地損傷多種動物的胰島細 胞，造成胰島素分泌低下，引起實驗性糖尿病。1.4.2.1.2造模

4、方法購入成年動物，適應3-5天后，隨機取15只動物禁食3-5小時，測空腹血糖，作為該 批次動物基礎血糖值。隨后動物禁食24小時（自由飲水），注射四氧H密呢（用前新鮮配制） 造模,小鼠 45-清醒、安靜狀態(tài)下的血壓、心率的測定。實驗開始后每周測壓1-2次。停止給予受試 樣品之后，一般繼續(xù)觀察直至血壓恢復至對照組水平或繼續(xù)觀察7-14天。143正常動物選健康成年動物按142測定血壓、心率。1.5數據處理和結果判定：血壓測定為計量資料，采用方

5、差分析，但需按方差分析的程序先進行方差齊性檢騷，方 差齊，計算F值，F值VFO.05,結論：各組均數間差異無顯著性；F值3凡.05, PW0.05,用 多個實驗組和-個對照組間均數的兩兩比較方法進行統(tǒng)計;對非正態(tài)或方差不齊的數據進行 適當的變量轉換，待滿足止態(tài)或方差齊要求后，用轉換后的數據進行統(tǒng)計；若變量轉換后仍 未達到正態(tài)或方差齊的目的，改用秩和檢驗進行統(tǒng)計。結果判定：實驗組動物血壓明顯低于對照組，差異具有顯著性，且對實驗組動物心率和

6、 正常動物的血壓及心率無影響，可判定該受試樣品有助于維持血壓健康水平動物實驗結果陽 性。1.6注意事項1.6.1測定動物血壓時室溫應保持在25°C。以尾動脈間接測壓法測定大鼠血壓時，需要給大 鼠保溫，應注明恒溫盒溫度及保溫時間。各次血壓測定過程中溫度條件保持一致。1.6.2操作應輕柔，減少動物的應激反應，大鼠放入固定籠中待大鼠安靜后才可進行測量， 大鼠如在測定中出現煩躁、啃咬等應激反應，應重新測量。1.6.3推薦使用無創(chuàng)性小動

7、物血壓測定儀器。鼠尾套袖應放置于鼠尾的根部，選用松緊適當 的套袖。套袖以約20-30mmIIg/s的速度充氣加壓至脈搏波消失之后約20mmHg處。每次 測量間隔一定時間，記錄心率變化W10次/分、血壓變化W6mniHg的連續(xù)三次讀數，取其均 數。1.6.4動物的飼養(yǎng)環(huán)境保持安靜，排除環(huán)境因素對血壓的影響。2人體試食試驗2.1受試對象納入標準：血壓處于正常范圍的偏高區(qū)間（正常高值血壓），收縮壓120?139mniHg和/或舒張壓 80?

8、89mmHg者，滿足兩者任一項即可納入。2.2排除者標準：2.2.1年齡在18歲以下或65歲以上、高血壓癥患者、妊娠或哺乳婦女、對受試樣品過敏者。 2.2.2合并有肝、皆和造血系統(tǒng)等嚴重全身性疾病患者。2.2.3短期內服用與受試功能有關的物品，影響到對結果的判斷者。2.2.4未按照規(guī)定服用受試樣品，無法判斷功效或因資料不全等影響功效判斷者。2.3試驗設計及分組要求：采用組間對照設計。按受試者的血壓水平隨機分為試食組和對照 組，盡可能考慮