穗花杉雙黃酮在大鼠體內的藥動學及組織分布研究.pdf

1、目的：中藥卷柏為卷柏科(Selaginellaceae)植物卷柏(Selaginella tamariscina(Beauv.)Spring)或墊狀卷柏(Selaginella pulvinata(Hook. et Grev.) Maxim)的干燥全草，其功效為活血通經(jīng)，主治經(jīng)閉通經(jīng)，癥瘕痞塊，跌撲損傷等癥。卷柏主要有效成分為卷柏黃酮，而卷柏黃酮主要含有穗花杉雙黃酮。隨著對其研究的深入，發(fā)現(xiàn)穗花杉雙黃酮具有多種活性，包括抗炎、抗氧化、抗

2、病毒、抗腫瘤、降血糖、降血壓等作用。目前國內外對黃酮類化合物的體內的藥代動力學研究較多，但是對雙黃酮類化合物的體內研究甚少。本課題主要對穗花杉雙黃酮在大鼠體內的藥代動力學及組織分布進行研究，有助于優(yōu)化卷柏黃酮制劑處方，并為制定最佳給藥方案、提高給藥安全性提供依據(jù)。
　　方法：穗花杉雙黃酮的制備：取卷柏藥材10kg，95％的乙醇回流提取2次,每次2小時，合并提取液減壓濃縮回收溶劑，得浸膏560g。稱取一定量浸膏，適量95%乙醇溶解后

3、，聚酰胺拌樣，上聚酰胺樹脂柱，80%乙醇洗脫，得到卷柏總黃酮。卷柏總黃酮經(jīng)硅膠、Sephadex LH-20等柱層析，結合半制備液相色譜，得到穗花杉雙黃酮單體。穗花杉雙黃酮在大鼠體內的藥動學研究：大鼠灌胃穗花杉雙黃酮60mg/kg后，分別在：0,10,15,30,45,60,90,120,180,240,300,420min時斷尾取血0.3mL，建立高效液相色譜法測定穗花杉雙黃酮在大鼠體內的血藥濃度并研究其藥動學特征。穗花杉雙黃酮在大鼠

4、體內的組織分布研究：大鼠經(jīng)灌胃穗花杉雙黃酮0.5g/kg后，分別于10min、0.5h、1h、2h、4h、8h、12h后脫頸椎處死，立即取心、肝、脾、肺、腎、胃、大腸、小腸、腦等組織。組織勻漿處理后，建立高效液相色譜法測定穗花杉雙黃酮在大鼠體內各組織濃度并研究其組織分布特點。
　　結果：穗花杉雙黃酮的制備：經(jīng)高效液相色譜分析，從卷柏中提取分離純化得到的穗花杉雙黃酮純度達到98%，可用于大鼠體內的藥動學及組織分布研究；穗花杉雙黃酮在

5、大鼠體內的藥動學研究：大鼠給藥穗花杉雙黃酮后，其藥動學參數(shù)Tmax為90min，Cmax為(0.469±0.046）μg/mL，AUC(0-t)為（27.731±1.128） mg/L*min，AUC(0-∞)為(24.944±1.093) mg/L*min，t1/2為(57.008±2.765) min，V/F為(198.36±17.422) L/kg，CL/F為(2.408±0.103) L/min/kg。穗花杉雙黃酮在大鼠體內的組

6、織分布研究：大鼠灌胃給予穗花杉雙黃酮后，穗花杉雙黃酮不同程度的分布于心、肝、脾、肺、腎、胃、大腸、小腸中，且在胃、大腸、小腸、肝等組織中濃度較高，給藥0.5h后，脾臟、心組織中藥物達到峰值；給藥1h后，胃、小腸組織中藥物達到峰值，給藥2h后，肝臟組織中藥物達到峰值。各組織中藥物分布的最大百分比（各組織中濃度最大時間點的含藥量比上大鼠灌藥量）分別為：心：0.145%；肝：4.853%；脾：0.289%；肺：0.785%；腎：0.493%；