CP-25在大鼠體內(nèi)藥代動力學(xué)及組織分布的研究.pdf

1、白芍總苷(Total glucoside of paeony, TGP)是白芍根部中提取的有效成分。TGP作為抗炎免疫調(diào)節(jié)藥于1998年被中國食品藥品監(jiān)督管理局批準上市，用于治療類風濕性關(guān)節(jié)炎(rheumatoid arthritis, RA)有較好的治療效果，在長期的臨床使用中沒有明顯的不良反應(yīng)。但是，起效慢和生物利用度低等原因限制了TGP在臨床的應(yīng)用。芍藥苷(Paeoniflorin, Pae),是一種水溶性的單帖苷類，是TGP的主

2、要有效成分，含量超過總苷的40%。課題組已研究證明Pae有較好的抗炎效果和調(diào)節(jié)免疫。然而，Pae生物利用度(3%-4%)較低，口服吸收較差。因此，課題組前期對Pae的6位羥基進行酯化修飾，得到新的化合物苯磺酰芍藥苷(benzenesulfonyl paeoniflorin,代號：CP-25)。目前課題組研究證實了CP-25擁有相比于Pae更好的抗炎活性，CP-25的吸收機制主要是被動吸收，在大鼠小腸中CP-25的吸收要明顯高于Pae，同

3、時CP-25在大鼠體內(nèi)的口服生物利用度要高于Pae（10.6%）。性別、食物和疾病等因素對藥物的藥代動力學(xué)性質(zhì)有明顯的影響。因此，本研究主要考察性別、食物和佐劑型關(guān)節(jié)炎（adjuvant arthritis，AA）對CP-25在大鼠體內(nèi)藥代動力學(xué)影響及CP-25組織分布的研究。
　　目的：
　　1.考察性別、食物和AA等因素對CP-25及其血漿代謝物Pae（M1）在大鼠體內(nèi)藥代動力學(xué)的影響。
　　2.考察CP-25和P

4、ae在大鼠體內(nèi)組織分布的差異，對比CP-25在雌雄大鼠的組織分布中的差異。
　　方法：
　　1.建立了CP-25和Pae在生物樣品（血液和組織）中檢測的超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜(ultra-performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry, UPLC-MS/MS)方法。
　　2.單次灌胃CP-25（50 mg·kg-1），對比大鼠在不同的狀態(tài)下(雌/雄，

5、喂食/禁食，健康/疾病，單次/連續(xù)多次給藥)，CP-25和M1藥代動力學(xué)的差異。
　　3.組織分布研究中，在正常大鼠連續(xù)多次灌胃給藥（50 mg·kg-1）CP-25和Pae后，取其心、肝、脾、肺、腎、小腸、胃、脂肪、肌肉、腦、頜下腺和滑膜組織，測其藥物濃度。
　　結(jié)果：
　　1. CP-25、Pae和內(nèi)標（internal standard, IS）的出峰時間分別為1.84，0.46和1.49 min，出峰時間適宜，

6、無明顯的大鼠血漿內(nèi)源性物質(zhì)的干擾。CP-25和Pae的標準曲線分別為y=0.0056x-0.0122(r2=0.9990)和y=0.0049x-0.0148(r2=0.9990)，濃度范圍為2~800 ng·mL-1，線性關(guān)系良好；CP-25和Pae定量下限為2 ng·mL-1，其濃度適用于后續(xù)的藥物檢測；CP-25和Pae的日內(nèi)和日間精密度和準確度均在15%以內(nèi)；CP-25和Pae的回收率的范圍分別為88.5%~102.9%和99.5

7、%~112.4%，IS（200 ng·mL-1）的回收率為103.0±3.3%。CP-25和Pae的基質(zhì)效應(yīng)的范圍分別為100.9%~113.7%和102.3%~113.8%，IS（200 ng·mL-1）的基質(zhì)效應(yīng)為99.7±4.4%；CP-25和Pae在不同條件下均較穩(wěn)定。
　　2.性別對CP-25藥代動力學(xué)的影響：CP-25單次灌胃給藥后（50 mg·kg-1），其表觀分布容積（V）在雌雄大鼠中有顯著性差異（P<0.05）。

8、達峰時間（Tmax）在2-3h之間，分布半衰期（t1/2α）和消除半衰期（t1/2β）分別是1-2h和7-8h。M1藥代動力學(xué)參數(shù)在雌雄大鼠中沒有顯著性差異。
　　3.食物對CP-25藥代動力學(xué)的影響：單次灌胃給藥CP-25（50 mg·kg-1），禁食組和喂食組的藥代動力學(xué)參數(shù)對比如下：清除率（CL）（CP-25:19.51±2.32 L·h·-1kg-1 versus16.55±0.58 L·h·-1kg-1; M1:23.3

9、1±2.58 L·h·-1kg-1 versus16.40±2.92 L·h·-1kg-1），禁食組CL明顯低于喂食組（P<0.05）。藥時曲線下面積（AUC(0-∞)）（CP-25:2892.48±89.53μg·L-1·h versus3024.34±107.15μg·L-1·h;M1:2166.64±247.61μg·L-1·h versus3137.30±584.25μg·L-1·h），禁食組AUC(0-∞)明顯低于喂食組（P<

10、0.05）。此外，M1的AUC(0-t)（2062.02±206.48μg·L-1·h versus2871.64±409.82μg·L-1·h）和達峰濃度（Cmax）（233.36±32.67μg·L-1versus322.00±45.22μg·L-1），喂食組明顯高于禁食組（P<0.05）。
　　4. AA對CP-25藥代動力學(xué)的影響：在AA狀態(tài)下，CP-25的AUC明顯低于在正常大鼠(AUC(0-t),2461.90±168

11、.25μg·L-1*h versus2727.59±215.01μg·L-1·h;AUC(0-∞),2685.91±60.97 ug·L-1·h versus2892.48±89.53 ug·L-1·h)(P<0.05)。M1在AA狀態(tài)下的藥代動力學(xué)參數(shù)V明顯高于正常大鼠（127.18±21.24 L·kg-1 versus96.55±9.76 L·kg-1, P<0.05）。
　　5.多次給藥對CP-25藥代動力學(xué)的影響：AUC

12、和達峰濃度（Cmax）相比于單次給藥有顯著性差異（AUC(0-t),2461.90±168.25μg·L-1·h versus2856.62±263.54μg·L-1·h; AUC(0-∞),2685.91±60.97μg·L-1·h versus2909.34±302.84μg·L-1·h; Cmax,354.14±23.62μg·L-1 versus392.82±10.69μg·L-1）（P<0.05）。此外，CP-25的穩(wěn)態(tài)藥時曲

13、線下面積（AUCss），穩(wěn)態(tài)血藥濃度（Cav）和波動系數(shù)（undulate factors，DF）分別為2512.02±114.83μg·L-1·h,209.34±9.57μg·L-1和1.88±0.07。
　　6. CP-25和Pae在大鼠體內(nèi)的組織分布：CP-25在大鼠組織中有較廣泛的分布，存在雌雄差異。雄性大鼠的肝、滑膜、肌肉、小腸和脾臟中有較高的藥物濃度，靶組織滑膜中在3h發(fā)現(xiàn)較高的藥物濃度。在雌性大鼠中，在肝臟、小腸、肌

14、肉和腦中CP-25濃度較高，其它組織均有一定的分布。同時，對比Pae，CP-25在組織中的藥物濃度均高于Pae，其中腦中的CP-25濃度要明顯高于Pae。
　　結(jié)論：
　　1.CP-25和M1在雌雄大鼠體內(nèi)表觀分布容積有顯著性差異，其它藥代動力學(xué)參數(shù)沒有顯著的藥代動力學(xué)差異，
　　2.食物的攝取會增加CP-25在大鼠體內(nèi)的吸收，減慢其清除率。
　　3.AA會降低CP-25在大鼠體內(nèi)的吸收。
　　4.CP-2