基于結(jié)晶質(zhì)量增大效應(yīng)的石英晶體微天平檢測(cè)技術(shù)研究.pdf

1、為了提高石英晶體微天平對(duì)生物活性分子的靈敏度，建立了基于石英晶體微天平的原位選擇性結(jié)晶方法。在之前的很多研究中，都對(duì)自組裝膜進(jìn)行了科學(xué)的論述以及研究，自組裝膜的調(diào)控作用具有成熟的理論依據(jù)，并在實(shí)際應(yīng)用中展現(xiàn)了良好的性能。在我們的試驗(yàn)中所建立的自組裝膜主要是通過(guò)具有不同調(diào)控作用的官能團(tuán)的暴露情況實(shí)現(xiàn)對(duì)碳酸鈣原位結(jié)晶的調(diào)控作用。在我們建立的信號(hào)放大機(jī)制中，選用的兩種功能基團(tuán)分別為-N(CH3)3和-COOH，其中-N(CH3)3作為碳酸鈣在

2、表面的結(jié)晶抑制劑，-COOH作為碳酸鈣在表面的結(jié)晶誘導(dǎo)劑，在這兩種功能基團(tuán)的共同調(diào)配下，實(shí)現(xiàn)了對(duì)碳酸鈣在石英晶體微天平晶片表面原位結(jié)晶的調(diào)控，為我們的方法在信號(hào)放大方面提供了可能性。我們對(duì)其他常用的檢測(cè)腫瘤標(biāo)志物的方法以及應(yīng)用石英晶體微天平的信號(hào)放大技術(shù)做了一定的學(xué)習(xí)與比較。相比之下，我們建立的基于石英晶體微天平的原位選擇性結(jié)晶方法具有原理簡(jiǎn)單、不依賴生物碼、靈敏度高和選擇性高的優(yōu)點(diǎn)，在癌癥的早期診斷方面展現(xiàn)了了良好的發(fā)展前景。本文的主

3、要內(nèi)容如下：
　　1.碳酸鈣晶體在金片上的表面結(jié)晶過(guò)程可以通過(guò)石英晶體微天平檢測(cè)，通過(guò)調(diào)節(jié)兩種不同功能基團(tuán)的用量比例可以實(shí)現(xiàn)晶體生長(zhǎng)的定量控制。本實(shí)驗(yàn)中碳酸鈣原位選擇性結(jié)晶過(guò)程用到的兩種功能基團(tuán)分別為-N(CH3)3和-COOH，獲得的晶體具有均勻的尺寸大小，相同的形態(tài)及晶型。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)隨著-COOH組分比例的增加，晶體的量呈現(xiàn)一定規(guī)律的增加趨勢(shì)。實(shí)驗(yàn)證明對(duì)金表面晶體生長(zhǎng)的定量控制可以作為一個(gè)有效的質(zhì)量擴(kuò)增機(jī)制，該擴(kuò)增機(jī)制可以用于石

4、英晶體微天平的信號(hào)放大，以此可以提高石英晶體微天平的分析靈敏度。
　　2.將上述基于碳酸鈣原位選擇性結(jié)晶技術(shù)應(yīng)用到QCM對(duì)DNA分子的檢測(cè)中，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，該方法將檢測(cè)DNA信號(hào)擴(kuò)大了1000多倍,提高了DNA檢測(cè)的靈敏度。在檢測(cè)DNA時(shí)，最低檢測(cè)限LOD達(dá)到了2aM,并且線性檢測(cè)范圍寬，為10aM到1nM。該方法同時(shí)具有很高的選擇性，可以區(qū)分識(shí)別完全配對(duì)的DNA與1個(gè)堿基錯(cuò)配的DNA,可應(yīng)用于單核苷酸的多態(tài)性（SNP）檢測(cè)。

5、　　3.基于碳酸鈣原位結(jié)晶的石英晶體微天平信號(hào)放大技術(shù)，在檢測(cè)DNA時(shí)展現(xiàn)了良好的性能。為了擴(kuò)大其檢測(cè)領(lǐng)域，我們將其用于細(xì)胞的檢測(cè)，本實(shí)驗(yàn)選用的是Ramos細(xì)胞。在引入適配體后，結(jié)合碳酸鈣原位結(jié)晶的石英晶體微天平信號(hào)放大技術(shù)檢測(cè)DNA的方法，實(shí)現(xiàn) Ramos細(xì)胞的檢測(cè)，其最低檢測(cè)限LOD為5個(gè)/ml，檢測(cè)范圍為5個(gè)/ml到6000個(gè)/ml。最后，我們將該方法與其他基于質(zhì)量信號(hào)放大的石英晶體微天平檢測(cè)方法進(jìn)行了對(duì)比，通過(guò)對(duì)比，證明了我們的