石英晶體微天平快速檢測殺線蟲劑的研究.pdf

1、植物線蟲病已成為世界農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中的重要病害之一,每年造成嚴(yán)重的經(jīng)濟損失。至今,植物線蟲病害的防治手段仍以化學(xué)農(nóng)藥防治為主,但其農(nóng)藥殘留不僅影響人與牲畜的健康,也嚴(yán)重破壞生態(tài)環(huán)境。壓電式生物傳感器法檢測農(nóng)藥殘留是一種新型的檢測手段,具有靈敏、特異、微型并且能夠快速實時檢測食品和農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留的優(yōu)勢,因此成為殘留檢測研究的新熱點和方向。但是,壓電式生物傳感器仍存在著同定化酶重復(fù)使用率低、酶固定量低、穩(wěn)定性差、不易實現(xiàn)多組分檢測和非特異性吸附

2、信號干擾等缺點。該試驗利用石英晶體微天平對質(zhì)量的敏感度,研究了用于檢測殺線蟲劑的乙酰膽堿酯酶固定的新方法,提高了乙酰膽堿酯酶的固定量及穩(wěn)定性。對于進一步研究與開發(fā)快速、敏感、特異性高并且能夠檢測農(nóng)藥殘留的新型乙酰膽堿酯酶壓電式生物傳感器提供理論依據(jù)。
　　 試驗以聚二烯丙基二甲基胺鹽酸鹽(PDDA)和聚苯乙烯磺酸鈉(PSS)為組裝材料,在石英晶體微天平的電極上進行了層層自組裝研究。試驗在自組裝薄膜的最外吸附裝羧基化多壁納米碳管(

3、MWNTs-COOH)后進行羧基化多壁納米碳管表面固定乙酰膽堿酯酶技術(shù)的探討。對PDDA和PSS層層自組裝的濃度、羧基化多壁納米碳管的濃度、緩沖液的Ph和乙酰膽堿酯酶濃度等條件進行了優(yōu)化。經(jīng)研究篩選出了聚二烯丙基二甲基胺鹽酸鹽(PDDA)和聚苯乙烯磺酸鈉(PSS)的最佳濃度為1mg/ML;羧基化納米碳管的濃度為0.3mg/ML;乙酰膽堿酯酶的最佳固定條件為0.1mg/ML;緩沖溶液最佳Ph為7.0。證實了乙酰膽堿酯酶電極的穩(wěn)定性,明確了

4、4℃條件下至少可以保存7d。證明了多壁納米碳管的引入可大大提高乙酰膽堿酯酶固定量。采用石英晶體微天平(QCM)方法檢測了殺線蟲劑毒死蜱和辛硫磷標(biāo)準(zhǔn)品,并繪制了毒死蜱和辛硫磷的標(biāo)準(zhǔn)曲線,用于毒死蜱和辛硫磷實際樣品的定量檢測。
　　 應(yīng)用層層自組裝法固定酶的技術(shù),建立的石英晶體微天平(QCM)法檢測殺線蟲劑,進行了應(yīng)用檢測。日光溫室中,以盆栽方法種植蘿卜(Raphanus),出苗后噴施毒死蜱或辛硫磷農(nóng)藥,用藥4d和8d后,與目前國際