秋刀魚內(nèi)臟甘油三酯、磷脂定性定量分析及磷脂神經(jīng)保護(hù)作用研究.pdf

1、秋刀魚（Cololabis saira）屬于頜針魚目，竹刀魚科，是秋刀魚屬的獨(dú)有的一種魚類，也是一種重要的食用魚，在部分東亞地區(qū)的食物料理是種很常見的魚種。秋刀魚是一種冷水性表上層洄游性魚類，主要聚集在寒暖海流交匯處，適合10-20℃的溫度范圍，最為適宜的溫度為15-18℃。秋刀魚具有較短的生命周期，一般為兩年左右。秋刀魚主要分布在北太平洋地區(qū)，主要捕撈季節(jié)為每年的秋季。近十年來，許多國家的秋刀魚捕撈量呈現(xiàn)出上升趨勢，主要的國家和地區(qū)有

2、日本、中國臺(tái)灣、韓國、俄羅斯等，我國大陸從2012年起，對秋刀魚的捕撈量也連年增長。
　　秋刀魚營養(yǎng)豐富，尤其是氨基酸、脂肪酸和礦物質(zhì)等的含量非常豐富。其內(nèi)臟中的脂類含量尤為豐富。本文選取每年秋季在北太平洋地區(qū)捕獲的秋刀魚，取其內(nèi)臟為研究對象，從中分別提取甘油三酯和磷脂，對其做脂肪酸定性定量、磷脂組分定性定量及磷脂改善阿爾茲海默等的相關(guān)研究，對其脂質(zhì)做基本的分析評價(jià)。主要研究內(nèi)容如下：（1）采用超臨界二氧化碳萃取法（SC-CO2）

3、和傳統(tǒng)有機(jī)溶劑萃取法從秋刀魚內(nèi)臟中提取磷脂和甘油三酯，對兩種方法提取所得的產(chǎn)物的酸價(jià)、過氧化值和碘價(jià)等化學(xué)性質(zhì)進(jìn)行評價(jià)對比，并分析其脂肪酸的定性定量組成。結(jié)果表明，SC-CO2和有機(jī)溶劑提取的甘油三酯之間、SC-CO2和有機(jī)溶劑法提取的磷脂之間酸價(jià)及過氧化值之間存在極顯著差異（P＜0.01），所得甘油三酯的碘價(jià)和不皂化物之間存在顯著差異（P＜0.05），磷脂兩項(xiàng)性質(zhì)之間無顯著差異（p＞0.05）。兩種方法所的甘油三酯符合SCT3502-

4、2000精制一級魚油的標(biāo)準(zhǔn)，磷脂符合Lecithin(Phospholipids, Phospholipids; INS No.322(ⅰ))標(biāo)準(zhǔn)。
　　SC-CO2所得甘油三酯飽和脂肪酸（ SFA）、單不飽和脂肪酸（MUFA）和多不飽和脂肪酸（PUFA）分別占總脂肪酸（TFA）的26.91％、39.01%、34.08%，有機(jī)溶劑提取法提取的中，UFA、MUFA和PUFA分別占TFA的24.22%、46.31%和29.46%，EP

5、A（C20:5n3）和 DHA（C22:6n3）為主要的多不飽和脂肪酸，含量分別達(dá)到66.05±1.89和47.71±1.77mg/g、82.30±3.58和67.43±4.95mg/g，SC-CO2提取甘油三酯脂肪酸組成更加理想。兩種提取方式所得磷脂中 SFA（飽和脂肪酸）、MUFA（單不飽和脂肪酸）和PUFA（多不飽和脂肪酸）分別為5種、4種和4種，分別占脂肪酸總量的40.23%和38.05%、7.31%和7.57%、52.46%和

6、54.37%。SC-CO2所得磷脂中EPA占脂肪酸總量8.61%，DHA占總量的42.27%，有機(jī)溶劑提取所得磷脂中EPA占脂肪酸總量8.95%，DHA占總量43.82%。總體組成情況接近，原因可能由于兩種方法本質(zhì)上都是利用無水乙醇作為萃取劑，提取所得產(chǎn)物性質(zhì)較為相似。磷脂中PC（磷脂酰膽堿）、PE（磷脂酰乙醇胺）中 DHA和 EPA的含量分別占總脂肪酸8.47％和2.75%、7.43%和3.24%。
　　（2）磷脂中的個(gè)組分采用

7、高效液相系統(tǒng)進(jìn)行定性定量分析。依次使用高效液相聯(lián)用質(zhì)譜系統(tǒng)（HPLC-MS）、高效液相聯(lián)用二極管陣列檢測器（ HPLC-PDA）系統(tǒng)以及高效液相聯(lián)用蒸發(fā)光檢測器（HPLC-ELSD）系統(tǒng)進(jìn)行檢測，最終選用 HPLC-ELSD進(jìn)行分析。結(jié)果表明，秋刀魚內(nèi)臟磷脂中PC含量88.50 mg/g（秋刀魚內(nèi)臟磷脂）， PI（磷脂酰肌醇）含量53.33 mg/g，PE含量39.66 mg/g，PS（磷脂酰絲氨酸）含量4.98mg/g，此外，還將測到

8、兩種溶血磷脂的存在， LPE（溶血磷脂酰乙醇胺）含量19.00 mg/g，LPC（溶血磷脂酰膽堿）含量15.01mg/g.目前有關(guān)水產(chǎn)磷脂的報(bào)導(dǎo)中，鮮有溶血磷脂的檢出，特別是LPE的檢出，幾乎未見報(bào)道。
　?。?）選用 APP/PS1（M146L）雙轉(zhuǎn)細(xì)胞作為模型細(xì)胞，用大豆磷脂作為對比，研究秋刀魚內(nèi)臟所提磷脂及柱層析分離得到PC組分對于模型細(xì)胞上清液中Aβ1-42分泌的影響。對照組Aβ1-42的濃度為19.12 pg/mL，大豆

9、卵磷脂組中為12.32 pg/mL，秋刀魚內(nèi)臟磷脂組中為6.06 pg/mL，秋刀魚內(nèi)臟磷脂PC組分為7.39 pg/mL.相對于模型對照組，三種磷脂對分泌至細(xì)胞外的Aβ1-42有一定抑制效果。相比對照組，大豆磷脂組下35.66%，秋刀魚內(nèi)臟磷脂組下降69.31%，效果最為顯著（P＜0.01），秋刀魚內(nèi)臟磷脂PC組分下降61.55%（P＜0.01）。
　　本研究對秋刀魚內(nèi)臟中的甘油三酯及磷脂進(jìn)行研究，利用超臨界二氧化碳萃取及有機(jī)溶