定量分析課件

1、第一節(jié) 樣品分析的前處理,一、幾類典型藥物 1、有機鹵素藥物 所含鹵原子均直接和碳原子相連，但不同藥物中鹵素所處位置不同，則與碳原子結合的牢固程度就有差異，與芳環(huán)相連則結合牢固，與脂肪鏈相連則結合不牢固。,在藥物定量分析前，一般需要根據(jù)分析方法的特點和化學原料藥的結構與性質(zhì)及藥物制劑的處方組成采用不同的方法對試樣進行前處理，以滿足所選分析方法對試樣的要求。,碘番酸（iopanoic acid）：,三氯叔丁醇（

2、chlorobutanol）,2、含金屬有機物,酒石酸銻鉀：,金屬原子不直接與碳原子相連，通常為有機酸及酚的鹽或配位化合物，稱為金屬的有機藥物。其分子結構中的金屬原子結合不牢固，在水中即可離解出金屬離子。,卡巴胂（carbarsone）：,金屬離子直接與碳原子以共價鍵的形式相連接，結合狀態(tài)比較牢固，稱為有機金屬藥物。在溶液中其金屬離子一般不能解離成離子狀態(tài)。,二、前處理的方法,分析含金屬和鹵素的有機藥物之前，應經(jīng)過適當?shù)奶幚恚菇饘俸望u

3、素轉(zhuǎn)變?yōu)檫m于分析的狀態(tài)，方可進行鑒別和含量測定。 1、不經(jīng)有機破壞的分析方法 ⑴直接測定法 凡金屬原子不直接與碳原子相連的含金屬藥物或某些C-M鍵結合不牢固的有機金屬藥物，在水溶液中可以電離，因而不需要有機破壞，可直接選用適當?shù)姆椒ㄟM行測定。,如：①富馬酸亞鐵的測定：富馬酸亞鐵 溶于熱稀礦酸（不溶于水） 分解放出Fe2+ 硫酸鈰滴定

4、 領二氮菲作指示劑 指示劑與 Fe2+形成紅色配位化合物 （2） 經(jīng)水解后測定法① 直接回流后測定法： 適用于含鹵素有機藥物結構中鹵素原子結合不牢固的藥物； 方法：將含有鹵素的有機藥物溶于適當溶劑（如乙醇）中，加NaOH溶液或AgNO3溶液后，加熱回流使其水解，將有機結合的鹵素經(jīng)過水解作用轉(zhuǎn)變?yōu)闊o機的鹵素離子，然后用間接銀量法進行測定，如：三氯叔丁醇的測定：,,,

5、,,,原理： 三氯叔丁醇+NaOH CL-解離下來 與硝酸銀生成氯化銀沉淀 過量硝酸銀用硫氰酸銨液回滴定②硫酸水解后測定：如：硬脂酸鎂，與定量的硫酸溶液共沸，水解生成硬脂酸和硫酸鎂，剩余的酸以NaOH液滴定。,,,,（3）經(jīng)氧化還原后測定法① 堿性還原后測定： 鹵素結合于芳環(huán)上時，由于分子中碘的 結合較固定，需在堿性溶液中加還原劑（如鋅粉）

6、回流，使C-I鍵斷裂，形成無機碘化物后測定。如碘番酸、泛影酸的測定。② 酸性還原后測定： 碘番酸在醋酸酸性條件下用鋅粉還原，使C-I鍵斷裂，形成無機碘化物后用銀量法測定。,③ 利用藥物中可游離的金屬離子的氧化性測定含量。 a、含銻藥物：利用五價銻有機藥物中可游離的Sb5+的氧化性，在酸性液中氧化碘化鉀，并定量析出碘，可用硫代硫酸鈉滴定。 b、含鐵藥物：將含鐵藥物加酸溶解后，便游離出Fe3+，利用在酸性溶液中

7、氧化碘化鉀，析出的碘可用硫代硫酸鈉液滴定以測定含量。,2、經(jīng)有機破壞的分析方法,含金屬有機物及有機鹵素藥物結構中的金屬原子、鹵素與碳原子結合牢固者，用上述方法難以將有機結合的金屬原子及鹵素轉(zhuǎn)變?yōu)闊o機的金屬化合物及鹵素化合物，此時必須采用有機破壞的方法將藥物分子破壞，使有機結合狀態(tài)的金屬及鹵素轉(zhuǎn)變?yōu)榭蓽y定的無機化合物，方可選用適合的分析方法進行測定。,(1) 濕法破壞法①、硝酸-高氯酸法（HNO3-HCLO4） 破壞能力強，反應比較激

8、烈。本法適用于血、尿、組織等生物樣品的破壞。所得到的無機金屬離子一般為高價態(tài)。 ②、硝酸-硫酸法（ HNO3-H2SO4 ） 本法適用于大多數(shù)有機物質(zhì)的破壞，如染料、中間體或藥物等。無機離子為高價態(tài)。③、硫酸-硫酸鹽法（H2SO4-MSO4）： 本法適用于含砷和銻有機藥物的破壞分解，最后得到低價態(tài)的金屬離子。④、其它濕法,（2） 干法破壞 本法適用于含有鹵素、硫、磷等有機藥物定量分析的前處理。①高溫灼燒法

9、 本法是將含有待測元素的有機物經(jīng)高溫灼燒灰化，使有機物結構分解，而待測元素轉(zhuǎn)化為無機元素或可溶性無機鹽的前處理方法。 適用于濕法不易破壞完全的有機物以及某些不能用硫酸進行破壞的有機藥物；不適用于含易揮發(fā)性金屬有機藥物的破壞。 常加無水碳酸鈉、硝酸鎂、氫氧化鈣、氧化鋅等輔助灰化。,②氧瓶燃燒法 a、原理：將有機藥物放入充滿氧氣的密閉的燃燒瓶中進行燃燒，并將燃燒所產(chǎn)生的待測物質(zhì)吸收于適當?shù)奈找褐?，然后根?jù)待測物質(zhì)的

10、性質(zhì)，采用適宜的分析方法進行鑒別、檢查或測定含鹵素有機藥物或含硫、氮、硒等其他元素的有機藥物。,b、儀器裝置： 燃燒瓶為500、1000或2000ml磨口、硬質(zhì)玻璃錐形瓶，瓶塞應嚴密、空心,底部熔封鉑絲一根（直徑為1mm），鉑絲下端作成網(wǎng)狀或螺旋狀，長度約為瓶身長度的2/3。,例：碘苯酯的測定方法： 取樣品約20mg，精密稱定，照氧瓶燃燒法進行有機破壞。用NaOH 試液2ml與水10ml為吸收液，待

11、吸收完全后，加溴醋酸溶液（取醋酸鉀10g，加冰醋酸適量使溶解，加溴0.4ml，再加冰醋酸使成100ml）10ml，密塞，振搖，放置數(shù)分鐘，加甲酸約1ml，用水洗滌瓶口，并通入空氣約3-5min以除去剩余的溴蒸汽，加碘化鉀2g，密塞，搖勻，用硫代硫酸鈉滴定液（0.02mol/ml）滴定，至近終點時，加淀粉指示液，繼續(xù)滴定至藍色消失，并將滴定的結果用空白試驗校正。每1ml的硫代硫酸鈉滴定液（0.02mol/ml）相當于1.388mg的C19

12、H29IO2.,三、生物樣品中藥物的分析前處理：,生物樣品：包括各種體液和組織，但實際上最常用的是比較容易得到的血液（血漿、血清和全血）、尿液和唾液，在特定情況下運用乳汁、脊髓、精液等。藥物及其代謝物從血漿或尿中分離的實驗步驟： （1）藥物從蛋白結合物或綴合物中釋出 ①、蛋白變性：如應用三氯醋酸、HCLO4、有機溶劑（乙醇、丙酮、乙氰）使蛋白沉淀。 ②、鹽酸水解 ③、酶消化法（最常用的是蛋白水解酶——枯草菌溶素）,（2）凈化

13、 ①、溶劑提取加鹽或其他試劑 ②、固相提取柱法：離子交換樹脂、氧化鋁、XAD-2型樹脂、活性炭、凝膠、ODS（十八烷基硅烷。）（3）測定 ①、薄層色譜 ②、柱色譜CC（column chromatogr） ③、衍生化后進行氣相色譜GLC：,第二節(jié) 藥物含量測定方法,一、重量分析法基本原理： 稱取一定重量的樣品，用適當?shù)姆椒▽⒋郎y組分與樣品中其他組分分離，根據(jù)被測組分和供試品的重量比計算組分

14、的百分含量。,優(yōu)點 準確度高，精密度好,缺點 操作繁瑣、費時 靈敏度低,方法：,揮發(fā)法萃取法沉淀法,（1）揮發(fā)法,利用被測組分具有揮發(fā)性或?qū)⑵滢D(zhuǎn)化為揮發(fā)性物質(zhì)，稱取揮發(fā)前后供試品的重量，計算被測組分的含量。,,,a 直接揮發(fā)法 稱得的重量或增加的重量就是被測組分的重量,①. 用高氯酸鎂吸收揮發(fā)的結晶水 計算其增加的重量,,,②. 熾灼殘渣測定法,b 間接揮發(fā)法

15、 樣品減少的重量是被測組分重量,干燥失重測定法,,（2）萃取法（提取重量法）,將待測組分從一種溶劑萃取到另一易揮發(fā)的溶劑中，揮去溶劑，稱量干燥物的重量進行計算,如： 苯巴比妥中“中性和堿性物質(zhì)”的檢查,（3）沉淀法,將待測組分以沉淀形式從溶液中分離，并轉(zhuǎn)化成稱量形式，稱定其重量進行計算。,,,①基本原理,操作步驟：,取樣,濾渣,沉淀,,過濾,洗滌,稱重,沉淀形式,稱量形式,沉淀形式： 沉淀時物質(zhì)的化學組成形式,稱量

16、形式： 稱量時物質(zhì)的化學組成形式,如 Fe(OH)3·nH2O,如 Fe2O3,對沉淀形式的要求： 溶解度小，純凈，易過濾洗滌，易轉(zhuǎn)化為稱量形式。,對稱量形式的要求： 組成固定，化學穩(wěn)定性高，分子量大。,2、沉淀條件的選擇,（1）晶形沉淀 稀、攪、熱、慢、陳,（2）無定形沉淀 濃、熱、電解質(zhì)、不陳化,3、計算,①. 被測組分與稱

17、量形式的組成 相同時,如 SiO2,②. 被測組分與稱量形式的組成不同時,如 Fe Fe2O3,×a×b,換算因數(shù) 被測組分的摩爾質(zhì)量（或原子量）與稱量形式摩爾質(zhì)量的比值。,如 Fe(55.847) O(15.9994),×2,被測物 沉淀形式 稱量形式 換算因數(shù) Fe Fe(OH)3·nH2O

18、 Fe2O3 2Fe / Fe2O3 FeO Fe(OH)3·nH2O Fe2O3 2FeO / Fe2O3 SO42- BaSO4 BaSO4 SO4 / BaSO4 MgO MgNH4PO4 Mg2P2O7 2MgO / Mg2P2O7 SiO2

19、 SiO2 SiO2 SiO2 / SiO2,,二、容量分析法（滴定分析法）,根據(jù)已知濃度的滴定液與待測組分作用時所消耗的體積來計算待測物的含量的定量分析方法。,等當點（化學計量點） 消耗的滴定液的摩爾數(shù)＝被測物摩爾數(shù),滴定終點指示劑的變色點（允許與化學計量點的誤差≤0.1％）,滴定方式,直接滴定法 剩余滴定法 置換滴定法,,滴定度

20、： 是指每毫升滴定液相當于被測物質(zhì)的質(zhì)量（毫克）,T→滴定度(mg/ml) c→滴定液濃度(mol/L)M→被測物質(zhì)分子量n→為反應式配平后滴 定液與被測物的摩 爾比或電子轉(zhuǎn)移數(shù),1、酸堿滴定法,基本原理： 利用酸和堿在水溶液中以質(zhì)子轉(zhuǎn)移為基礎的滴定分析方法 。,酸 能給出質(zhì)子的物質(zhì),堿 能接受質(zhì)子的物質(zhì),酸給出質(zhì)子后剩余部分是該酸的共軛堿,,堿接受質(zhì)子后，即成為該堿的共軛酸,,,,越容易給

21、出質(zhì)子的物質(zhì)酸性越強強酸的共軛堿是弱堿,越容易接受質(zhì)子的物質(zhì)堿性越強強堿的共軛酸是弱酸,（1）強酸強堿的滴定,化學計量點時，溶液呈中性,突躍范圍 pH 4.30～9.70,酚酞 （8.3 ~ 10.0）無色→紅甲基紅（4.2 ~ 6.3） 紅→黃甲基橙（3.2 ~ 4.4） 紅→黃,（2）強堿滴定弱酸,化學計量點時，溶液偏堿性,酚酞 （8.0 ~ 10.0）無色→紅百里酚酞（9.4 ~

22、10.6）無色→藍,c · Ka＞10-8,（3）強酸滴定弱堿,化學計量點時，溶液偏酸性,甲基紅 （4.4 ~ 6.2）紅→黃溴甲酚綠（3.8 ~ 5.4）黃→藍,c · Kb＞10-8,（4）多元酸的滴定,如 甲基橙和酚酞,可選擇混合指示劑,酸堿指示劑：,常用的酸堿指示劑是有機弱酸或弱堿，與其共軛堿或共軛酸呈現(xiàn)不同的顏色,指示劑變色范圍,酚酞 pKIn= 9.1,（8.0 ~ 10.0）,滴

23、定突躍 在化學計量點附近發(fā) 生突變的pH范圍,選擇原則 指示劑的變色范圍全 部或部分落在滴定突 躍范圍內(nèi),滴定液的標定 ：,NaOH滴定液 基準物 鄰苯二甲酸氫鉀 指示劑 酚酞（無色→粉紅）,HCl滴定液 基準物 無水Na2CO3 指示劑 甲基

24、紅-溴甲酚綠(綠→暗紫),H2SO4滴定液 基準物 無水Na2CO3 指示劑 甲基紅-溴甲酚綠(綠→暗紫),2 、 氧化還原滴定法,以氧化還原反應（通過電子轉(zhuǎn)移）為基礎的滴定分析法。,氧化還原反應 電子得失,在一個氧化還原反應中,得到電子的物質(zhì) → 氧化劑失去電子的物質(zhì) → 還原劑,氧化劑,還原劑,電位越高 氧化態(tài)的氧化能力越強電位越低 還原態(tài)的還原能力越強,氧化劑

25、 可氧化電極電位比它低的物質(zhì)還原劑 可還原電極電位比它高的物質(zhì),常見氧化還原滴定方法,碘量法 溴酸鉀法鈰量法 亞硝酸鈉法高錳酸鉀法 高碘酸鉀法重鉻酸鉀法,氧化還原反應中常用的滴定液,碘液 硫代硫酸鈉液溴液 溴酸鉀液草酸液

26、高錳酸鉀液 硫酸鈰液,（1）碘量法,以碘為氧化劑，或以碘化物為還原劑的滴定法。,直接碘量法間接碘量法,注 反應摩爾比 以碘原子數(shù)計,指示終點 自身指示終點（無→黃） 淀粉指示液（無→藍紫）,a、 直接碘量法,用碘滴定液直接滴定的方法,測定條件,A、pH條件 酸性、中性、弱堿性,B、避光、立即滴定,b、間接碘量法,①、剩余碘量法,②、置換碘量法,,A、需用碘

27、量瓶,,測定條件 :,B、需做空白滴定,C、pH條件 弱酸性、中性、弱堿性,水解,加大 I- 濃度,A、增加 I2溶解度，并減少 I2 揮發(fā),B、降低 I2/I -氧化電位，反應完全,配制碘滴定液時 加大量碘化鉀,滴定液的標定：,碘滴定液 基準物 三氧化二砷 指示劑 淀粉指示液（無→藍紫）,硫代硫酸鈉滴定液 基準物 重鉻酸鉀 指示劑 淀粉指示液(藍紫→亮綠),（2）溴量

28、法（剩余溴量法）,原理：,,指示劑 淀粉指示液（藍紫→無）,測定條件：,B、反應摩爾比 以溴原子數(shù)計,C、需空白滴定,A、溴酸鉀與溴化鉀在鹽酸條件 下反應產(chǎn)生新生態(tài)溴,溴滴定液的標定：,加入碘化鉀，被剩余的溴氧化生成碘，再用硫代硫酸鈉液滴定指示劑 淀粉指示液（藍紫→無),（3）鈰量法,指示劑 鄰二氮菲亞鐵 還原型 → 氧化型 （紅色）

29、 （淺藍色）,原理：,優(yōu)點：,A、硫酸鈰滴定液穩(wěn)定,B、pH條件 HCl（防止Ce4+水解）,C、干擾因素少 適用于糖漿劑、片劑 如 硫酸亞鐵 高錳酸鉀法 硫酸亞鐵片 鈰量法,硫酸鈰滴定液的標定:,基準物 三氧化二砷指示劑 鄰二氮菲亞鐵 （紅→淡綠）,(4) 亞硝酸鈉滴定法,原理:,利用亞硝酸鈉在

30、鹽酸存在下可與具有芳伯氨基的化合物發(fā)生重氮化反應，定量生成重氮鹽，根據(jù)滴定時消耗亞硝酸鈉的量可計算藥物的含量,具游離芳伯氨基的藥物可用本法直接測定。具潛在芳伯氨基的藥物，如具芳酰胺基藥物（對乙酰氨基酚等）經(jīng)水解，芳香族硝基化合物（如無味氯霉素）經(jīng)還原，也可用本法測定。,測定條件:,a、pH條件 過量HCl,穩(wěn)定重氮鹽，防止偶氮氨基化合物生成,1:2.5～6,b 反應溫度,t ↑→ v↑,10 ~ 30℃,t ↑ 重氮鹽易分

31、解,t ↑ HNO2易分解逸失,c 催化劑 KBr,比 [ NO+ · Cl- ] 多300倍,快速滴定法： 滴定管尖插入液面下2／3處，在攪拌下一次性放下大部分滴定液，近終點前才提出滴定管，沖洗管尖，再緩緩滴定至終點。,d 滴定方式,ν↑ 來不及反應,ν↓ 亞硝酸分解逸失,e 指示終點的方法,A、永停滴定法 ChP（2010）,B、電位法,C、內(nèi)指示劑法 中性紅,D、外指

32、示劑法 KI－淀粉糊劑或試紙,亞硝酸鈉滴定液的標定:,基準物 對氨基苯磺酸指示終點方法 永停法,4、非水滴定法,在水以外的溶劑中進行的滴定反應。,分類 非水堿量法 非水酸量法,對象 酸或堿性較弱的藥物 難溶于水的藥物,(一)溶劑 非水溶劑,溶劑的分類:,（a）酸性溶劑 冰醋酸 給出

33、質(zhì)子能力強,（1）質(zhì)子性溶劑,（c）兩性溶劑 甲醇、乙醇 既能給出質(zhì)子，又能接受質(zhì)子,（b）堿性溶劑 乙二胺 接受質(zhì)子能力強,（2） 無質(zhì)子溶劑 非質(zhì)子性溶劑 無轉(zhuǎn)移性質(zhì)子,（b）惰性溶劑 苯、氯仿 與質(zhì)子性溶劑混合使用 增大溶解度、滴定突躍,（a）偶極親質(zhì)子溶劑 二甲基甲酰胺 與被測組分形成氫鍵,

34、溶劑的性質(zhì),①、溶劑的離解性,僅惰性溶劑不能離解,溶劑的自身離解常數(shù)越大，突躍范圍越大，終點越敏銳,弱酸性藥物 溶于堿性溶劑時可增 加其相對酸性,弱堿性藥物 溶于酸性溶劑時可增 加其相對堿性,②、溶劑的酸堿性,③、溶劑的介電常數(shù),化合物在介電常數(shù)大的溶劑中易離解,化合物在介電常數(shù)

35、小的溶劑中難離解，多形成離子對,均化效應與區(qū)分效應:,均化效應： 將不同強度酸或堿拉 平到同一強度的效應。,均化性溶劑 具有均化效應的溶劑,均化性溶劑,均化效應,共軛堿,（液氨）,堿性溶劑 是酸的均化性溶劑,酸性溶劑 是堿的均化性溶劑,區(qū)分效應 能區(qū)分出酸或堿的不同強 度的效應,區(qū)分溶劑 具有區(qū)分效應的溶劑,HClO4 ＞ HCl ＞ H2SO4 ＞ HNO3

36、,,酸性溶劑 是堿的均化性溶劑,堿性溶劑 是酸的均化性溶劑,酸性溶劑 對酸有區(qū)分效應,堿性溶劑 對堿有區(qū)分效應,(二)、堿的滴定 （非水堿量法）,（1）溶劑 酸性溶劑 （冰醋酸、醋酐）（2）滴定液 高氯酸（冰醋酸） 基準物 鄰苯二甲酸氫鉀（3）指示劑 結晶紫

37、、電位法（4）測定對象 弱堿性藥物,有機弱堿 胺類、生物堿類有機酸的堿金屬鹽 枸櫞酸鉀有機堿的氫鹵酸鹽（加醋酸汞）鹽酸麻黃堿 有機堿的硫酸鹽 （硫酸在冰醋酸為一元酸） 硫酸奎寧有機堿的硝酸鹽 （電位法指示終點）有機堿的有機酸鹽 重酒石酸去甲腎上腺素,(三)酸的滴定 （非水酸量法）,（1）溶劑 乙二胺

38、 二甲基甲酰胺（2）滴定液 甲醇鈉（甲醇-苯） 基準物 苯甲酸（3）指示劑 溴酚藍、百里酚藍（4）測定對象 有機弱酸性藥物,DMF,有機弱酸類藥物,芳酸類 苯甲酸酚類 苯酚磺酰胺類 磺胺嘧啶巴比妥類 苯巴比妥,（四）滴定液的標定,高氯酸滴定液 基準物 鄰苯二甲酸

39、氫鉀 指示劑 結晶紫（紫→藍）,甲醇鈉滴定液的標定 基準物 苯甲酸 指示劑 麝香草酚藍（ 黃→藍）,5、 沉淀滴定法,以沉淀反應為基礎的滴定分析法,應用較廣的是銀量法,銀量法,鉻酸鉀法（Mohr法）鐵銨礬指示劑法（Volhard法）吸附指示劑法（Fajans法）,,（1）鉻酸鉀法（Mohr法）,原理（AgNO3滴定液）,終點時:,終點前:,鉻酸鉀指示劑,測定條件,①、指示劑用量:

40、 25 ~ 50ml 溶液中 + 1ml 5%鉻酸鉀,②、溶液的酸度: pH6.5~10.5,③、滴定時要劇烈振搖 防止 AgCl 膠體吸附 Cl-,④、不宜測定 I- 和 SCN- (AgI↓)I- (AgSCN↓)SCN-,（2）鐵銨礬指示劑法（Volhard法）,原理（NH4SCN滴定液）,終點前,測定條件：,①、測 Cl- 時要防止沉淀轉(zhuǎn)化,,防止沉淀轉(zhuǎn)化的措施,A

41、、將沉淀過濾除去后再回滴B、用有機溶劑包裹沉淀 鄰苯二甲酸二丁酯、硝基苯C、高濃度的硫酸鐵銨 指示劑 0.2mol/L 的 Fe3+,②、在強酸性介質(zhì)中滴定,③、測 I- 時，指示劑須后加,④、除去干擾性物質(zhì) 能與SCN-作用的強氧化劑等,（3）吸附指示劑法（Fajans法）,原理（AgNO3滴定液）,測定條件:,①、要保護AgCl膠體 淀粉或糊精,I - ＞ 二甲基二碘

42、熒光黃 ＞ Br - ＞ 曙紅 ＞ Cl- ＞ 熒光黃,②、膠體顆粒對指示劑陰離子的吸 附應小于對被測離子的吸附,③、選擇合適的pH 要保證指示劑電離，故常選在 指示劑的電離常數(shù)附近 熒光黃 pH7 ~ 10 曙紅 pH2 ~ 10,④、避免光照 AgX易感光變色,AgNO3滴定液

43、 基準物 NaCl 指示劑 熒光黃（黃綠→微紅）,NH4SCN滴定液 基準液 AgNO3滴定液 指示劑 硫酸鐵銨(無色→淡棕紅),（4）滴定液的標定,6、配位（絡合）滴定法,基本原理： 以配位反應為基礎的滴定分析法 配位劑中應用最廣的是乙二胺四乙酸（EDTA） 配位滴定主要是指EDTA滴定，它可滴定數(shù)十種含金屬離子的藥物,（1）滴定劑

44、 EDTA,四元酸（H4Y）,,,,,兩個羧基上的H+轉(zhuǎn)移到兩個堿性氮原子上，形成雙偶極離子，故實際上它只是一種較強的二元酸（H2Y2-）,由于EDTA難溶于水，通常制成二鈉鹽（NaH2Y·2H2O），簡稱EDTA或EDTA二鈉鹽,EDTA與金屬離子絡合的特點,①、EDTA能與大多數(shù)金屬離子 形成穩(wěn)定的絡合物②、反應摩爾比1 ：1③、絡合物大多數(shù)易溶于水④、絡合物大多數(shù)無色,滴定條件的選擇

45、 ①、化學計量點的pM ②、滴定條件的判斷 ③、最高酸度控制 緩沖液,（2）金屬指示劑,終點前,原理（以絡黑T為例）,對指示劑的要求：,① 、MIn 與 In 的顏色應不同② 、MIn 的穩(wěn)定性應＜EDTA－M③、MIn 應易溶于水④、In 應穩(wěn)定,（3）滴定液的標定,鋅滴定液 EDTA滴定液 指示劑 絡黑T（紫→純藍）,

46、乙二胺四醋酸二鈉滴定液 基準物 ZnO 指示劑 絡黑T（紫→純藍）,例：下列測定中選擇的指示劑為 A. 硫酸鐵銨 B. 結晶紫 C. 淀粉 D. 二甲酚橙 E. 酚酞86. 以K2Cr2O7為基準物標定Na2S2O3滴定液87. 用EDTA滴定液測定氫氧化鋁88. 用HClO4滴定液測定鹽酸麻黃堿89. 用NaOH滴定液測定十一

47、烯酸90. 用AgNO3滴定液測定三氯叔丁醇,C,D,B,E,A,例：錯誤的操作有 A.將AgNO3滴定液裝在堿式滴定管中 B.將K2Cr2O7滴定液裝在堿式滴定管 C.以K2Cr2O7標定Na2S2O3溶液時用碘量瓶 D.上述滴定（C）中，淀粉指示劑宜在近 終點時加入 E.用EDTA滴定液直接滴定Al3+時，滴定速 度應快,,,,例：配位滴定法中，EDTA和金屬離子

48、 配位的特點為 A、形成的配位物穩(wěn)定 B、形成的配位物溶于水 C、形成的配位物多無色 D、EDTA和金屬離子比為1:1 E、形成的配位物應具顏色,,,,,三、儀器分析法,（一）光譜分析法 1、紫外-可見分光光度法 2、熒光分析法（二）色譜分析法 1、高效液相色譜法 2、氣相色譜法,第三節(jié) 分析方法的驗證,1、藥品質(zhì)量標準分

49、析方法驗證的目的與范圍： 目的：證明采用的方法適合于相應的檢測要求； 適用范圍：藥品質(zhì)量標準的制定；藥物生產(chǎn)方法變更，制劑的組分（主要指輔料）變更，原分析方法進行修訂時。2、具體內(nèi)容： （1）準確度（accuracy）： 指測得結果與真實值（或參考值）接近的程度，表示分析方法測量的正確性。通常用回收率試驗來表示。,2、制劑的含量測定,1、原料藥的含量測定 可以用已知純度的對照品或供試品進行測定，并按下

50、式計算回收率；或用本法測定的結果與已知準確度的另一方法測定結果進行比較。,數(shù)據(jù)要求： ①、做高中低3個濃度：100%±20% ②、n=9次（樣本數(shù)為9，每個濃度取3個樣） ③、當只有一個濃度時，n=6（即取該濃度下的6個樣） 回收率越接近100%表明分析方法準確度越高,（2）精密度（precision）： 指用該法測定同一均勻供試品的一組測量值彼此接近的程度，它們越接近就越精密。在藥物分

51、析中用標準偏差（s）和相對標準偏差（RSD）表示：,（3）重現(xiàn)性（ruggedness）： 利用相同的方法在各種正常實驗條件下對同一樣品進行分析所得結果的重現(xiàn)程度。 分析方法的重現(xiàn)性的測定是通過不同實驗室由不同的實驗者對同一樣品的分別測試而獲得的。重現(xiàn)性是指不同實驗室中使用此分析方法的精密度。（4）專屬性（specificity）： 指一種分析方法僅對一種分析成分產(chǎn)生唯一信號。

52、 鑒別反應、雜質(zhì)檢查和含量測定方法，均應考察其專屬性。,（5）檢測限（limit of detection，LOD）： 指分析方法能夠從背景信號中區(qū)分出藥物時，所需樣品中藥物的最低濃度，無需定量測定。 ①、非儀器分析目視法：用已知濃度的被測物，試驗出能夠被可靠地檢測出的最低濃度或量作為LOD。 ②、信噪比法：當用儀器分析方法時，可用已知濃度的樣品與空白試驗對照，記錄測得的被測物藥物信號強度S與噪音（或背景信號）強度

53、N，以能達到S/N=2或S/N=3時的樣品濃度最低藥物濃度為LOD。（6）定量限（（limit of quantitation，LOQ）： 指在保證具有一定可靠性的前提下，分析方法能夠測定出的 樣品中藥物的最低濃度。（即能準確定量的最低濃度或量） 用非儀器分析方法時，與（5）相同的確定方法；用儀器分析時S/N=10/1。,（7）線性： 分析方法的線性是在給定范圍內(nèi)獲取與樣品中供試物濃度成正比的試驗結果的能力。即；供試物

54、的濃度變化與試驗結果成線性關系：A=ac+b（或y=ax+b）相關系數(shù)r越接近1，表示線性越好。（8）范圍（range）： 線性范圍：指利用一種方法取得精密度、準確度均符合要求的試驗結果，而且成線性的供試物濃度的變化范圍，其最大量與最小量之間的間隔，可用mg/l ～ mg/l；或μg/ml ～μg/ml表示。若有C1 ，C2 ，C3 ，C4 ，C5五個濃度，當r越接近于1，則范圍為C1～ C5。（9）耐用性（robustness）