間接毛細(xì)管電泳-安培檢測技術(shù)及其應(yīng)用基礎(chǔ)研究.pdf

1、本文對間接毛細(xì)管電泳-安培檢測技術(shù)及其應(yīng)用基礎(chǔ)進(jìn)行了研究。本研究分為四個部分：
　　 第一章：緒論。毛細(xì)管電泳(Capillary Electrophoresis CE)又稱高效毛細(xì)管電泳(HighPerformance Capillary Electrophoresis，HPCE)，具有分離效率高、快速、樣品用樣量少等特點。CE的分離對象包括無機離子、有機分子、DNA、生物大分予以及對映體等，在分析化學(xué)、生物化學(xué)、分子化學(xué)、藥

2、物化學(xué)、食品化學(xué)、環(huán)境化學(xué)和臨床化學(xué)等許多領(lǐng)域，有著廣泛的應(yīng)用前景。緒論中回顧了CE技術(shù)的發(fā)展歷史，介紹了其原理、分離模式、儀器系統(tǒng)和技術(shù)特點；重點對毛細(xì)管電泳一安培檢測(CE-AD)技術(shù)進(jìn)行了詳細(xì)的介紹；根據(jù)本論文的研究內(nèi)容，側(cè)重論述了CE技術(shù)在食品和臨床分析中的應(yīng)用。本文采用間接CE-AD技術(shù)著重探討了飲料及調(diào)味品中四種電活性和兩種非電活性防腐劑的同時檢測；苯丙酮尿癥患者兩種尿樣標(biāo)志物，即具有電活性的苯丙酮酸及非電活性苯乙酸的快速分

3、析；以及運動前后乳母體液中乳酸含量的變化，進(jìn)一步拓展了CE-AD技術(shù)在食品分析和臨床分析中的應(yīng)用。
　　 第二章：間接毛細(xì)管電泳-安培檢測法同時測定電活性和非電活性食品添加劑。采用間接毛細(xì)管電泳-安培檢測法(CE-AD)同時測定了食品中的多種電活性和非電活性防腐劑。實驗以長度為75 cm的熔融石英毛細(xì)管(內(nèi)徑25μm，外徑360μm)為分離通道，以直徑300μm的碳圓盤電極為工作電極，電極電位為+1100 mV(vs.SCE)，

4、分離電壓為16 kV，進(jìn)樣時間為8 s/16 kV，運行液為含有0.018 mmol/L電活性物質(zhì)3，4-二羥基芐胺、12 mmol/L表面活性劑SDS、濃度40 mmol/L的硼砂-硼酸緩沖液(pH8.2)。在上述優(yōu)化條件下，食品中的四種電活性(對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸乙酯、對羥基苯甲酸丙酯和對羥基苯甲酸丁酯)和兩種非電活性防腐劑(山梨酸鉀和乳酸鈉)達(dá)到了較好的分離，最低檢測限(S/N=3)范圍為1.06×10-8～2.73×1

5、0-6g/mL。此法已被成功用于乳飲料、醬油等食品中電活性和非電活性防腐劑的同時檢測，結(jié)果令人滿意。
　　 第三章：基于間接毛細(xì)管電泳-安培檢測的新生兒苯丙酮尿癥早期無創(chuàng)診斷。采用間接毛細(xì)管電泳-安培檢測法(CE-AD)同時測定了苯丙酮尿癥患者尿液中的兩種疾病標(biāo)志物：具有電活性的苯丙酮酸及非電活性的苯乙酸?？疾炝诉\行液添加劑、SDS濃度、工作電極電位等因素對分離和檢測的影響。優(yōu)化實驗條件下，以直徑300μm碳圓盤電極作為工作電極

6、，電極電位為+950 mV(vs.SCE)，在運行液為0.018 mmol/L3，4-二羥基芐胺/20 mmol/L SDS/60 mmol/L硼砂-硼酸緩沖液(pH7.8)中，兩種標(biāo)志物在15 min內(nèi)可實現(xiàn)基線分離。苯丙酮酸和苯乙酸的檢測限分別為0.50和0.92 mg/L(S/N=3)。苯丙酮酸和苯乙酸的濃度與峰高分別在3.0～1.0×103 mg/L、2.0～5.0×103mg/L范圍內(nèi)呈良好線性，峰高與遷移時間的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差分

7、別為4.4％、3.2％(苯丙酮酸)和2.2％、4.3％(苯乙酸)。該方法已成功用于健康嬰兒和苯丙酮尿癥患兒尿液中兩種標(biāo)志物的分析測定，且完全避免了尿液中主要同存物尿酸對標(biāo)志物測定的干擾，有望用于苯丙酮尿癥患兒的早期無創(chuàng)診斷。
　　 第四章：間接毛細(xì)管電泳-安培檢測方法研究中等運動強度對乳母體液中乳酸含量的影響。采用間接毛細(xì)管電泳-安培檢測法(CE-AD)測定了哺乳期婦女在運動前后體液中乳酸含量的變化?？疾炝司彌_液添加劑濃度、工作

8、電極電位、緩沖溶液pH和濃度、分離電壓和進(jìn)樣時間等實驗參數(shù)對CE-AD分離檢測的影響。在最佳實驗條件下，以300μm碳圓盤電極為工作電極，氧化電位為+1100 mV(vs.SCE)，在毛細(xì)管長90 cm，運行液為4.0×10-6g/mL3，4-二羥基芐胺/40 mmol/L硼砂-硼酸緩沖液(pH7.8)中，乳酸與實際乳汁、尿液中的干擾物可實現(xiàn)基線分離，其檢測限為5.0×10-7g/mL(S/N=3)。該法已成功用于哺乳期女性在中等運動前