
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1、低分子量的巰基化合物廣泛分布在生物體的細(xì)胞和組織當(dāng)中,對(duì)機(jī)體的新陳代謝和維持細(xì)胞平衡起著至關(guān)重要的作用。谷胱甘肽(GSH)是細(xì)胞內(nèi)最豐富的非蛋白巰基化合物,是機(jī)體內(nèi)巰基和硫化物的調(diào)節(jié)劑,對(duì)維持生物體內(nèi)合適的氧化還原環(huán)境起著至關(guān)重要的作用。本文合成了一種含有Se-N鍵的電活性物質(zhì)苤硒腦,在適當(dāng)?shù)臈l件下,苤硒腦可以和GSH發(fā)生親核反應(yīng)使得苤硒腦的濃度降低,通過(guò)測(cè)量苤硒腦峰電流的降低情況可以間接的測(cè)量出GSH的濃度。具體研究?jī)?nèi)容及創(chuàng)新研究成果
2、如下:
1.合成電活性物質(zhì)苤硒腦,并用元素分析、紅外光譜的方法對(duì)其進(jìn)行表征,然后用循環(huán)伏安法(CV)和微分脈沖伏安法(DPV)對(duì)苤硒腦和GSH的反應(yīng)機(jī)理進(jìn)行研究。結(jié)果顯示,苤硒腦有很強(qiáng)的電化學(xué)活性,GSH可以在適當(dāng)?shù)臈l件下使苤硒腦中的Se-N鍵斷裂。用苤硒腦檢測(cè)GSH,不但反應(yīng)快速、靈敏度高,而且具有良好的選擇性。在0.20 mol·L-1 B-R緩沖溶液中(pH=2.0),GSH和苤硒腦反應(yīng)生成鄰苯二胺(OPD)。苤硒腦
3、對(duì)GSH檢測(cè)的線(xiàn)性范圍為5.0×10-10~2.2×10-8 mol.L-1,相關(guān)系數(shù)為0.9940,檢測(cè)限為8.3×10-11 mol·L-1(3σ,n=11)。論文對(duì)探針在檢測(cè)GSH過(guò)程中的抗干擾能力進(jìn)行了分析,結(jié)果顯示,多種的生物活性試劑對(duì)于檢測(cè)過(guò)程沒(méi)有或者有很小、可以忽略的影響,說(shuō)明苤硒腦對(duì)GSH的檢測(cè)有著很強(qiáng)的抗干擾能力。論文還就苤硒腦對(duì)蛋白硫醇化合物和非蛋白硫醇的相應(yīng)進(jìn)行了進(jìn)一步討論,結(jié)果顯示,相對(duì)于其它的非蛋白硫醇化合物如
4、β-巰基乙醇(β-ME)、半胱氨酸(Cys)、巰基乙酸(TA)和二硫蘇糖醇(DTT),苤硒腦對(duì)于GSH有著更好的響應(yīng),但是,GSH和蛋白巰基化合物像谷胱甘肽還原酶(GR)以及金屬硫因(MT)相比,在相同條件下,后者的峰電流的降低趨勢(shì)更加明顯,說(shuō)明蛋白巰基化合物對(duì)苤硒腦有著更好的響應(yīng)。從小鼠的乳腺癌細(xì)胞4T-1和白血病細(xì)胞P388的檢測(cè)效果可以看到,在不加入巰基封鎖劑N-乙基馬來(lái)酰亞胺(NEM)的情況下,苤硒腦對(duì)細(xì)胞中蛋白巰基的萃取液相對(duì)
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