基于液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)定量分析組蛋白翻譯后修飾.pdf

1、組蛋白翻譯后修飾(Post-translational modifications，PTMs)使組蛋白的結(jié)構(gòu)更為復雜，功能更為完善，作用更為專一，具有十分重要的生物學意義。了解細胞內(nèi)組蛋白PTMs的變化規(guī)律，對于揭示疾病機制，以及發(fā)現(xiàn)新的生物標志物和藥物靶標的具有重要的意義。然而由于細胞中組蛋白的PTMs種類繁多且動態(tài)范圍廣，導致其相關(guān)研究極具挑戰(zhàn)性。當前生物質(zhì)譜結(jié)合同位素標記的蛋白質(zhì)組學技術(shù)在組蛋白修飾定量分析方面具有很大的潛力。

2、r>　　 細胞中組蛋白的乙?；揎梾⑴c包括基因表達在內(nèi)的多種細胞過程。研究表明組蛋白賴氨酸殘基上的乙?；娜笔Щ蛉哂嗯c腫瘤細胞的形成和侵襲密切相關(guān)。組蛋白去乙?；?HDAC)可催化去除組蛋白的乙酰化，是近年來腫瘤治療研究的新型靶點，因此HDAC抑制劑已經(jīng)成為一類新型的靶向抗癌藥物。
　　 第一部分工作，采用體內(nèi)穩(wěn)定同位素標記(stable isotope labeling by aminoacids in cell cult

3、ure，SILAC)策略結(jié)合高分辨質(zhì)譜技術(shù)，建立了組蛋白修飾的定量分析方法；定量分析了一種新的抗腫瘤藥物Largazole對直腸癌細胞(HCT116)中組蛋白賴氨酸乙?；降恼{(diào)控；鑒定了組蛋白其它修飾在Largazole作用下的變化規(guī)律。
　　 誘導性多能干細胞(induced pluripotent stem cells，iPS)是通過體細胞重編程獲得的具有胚胎干細胞(embryonic stem cells，ES)特性的多

4、能干細胞，可以分化成任何組織和器官，因此iPS在再生醫(yī)學和疾病機理等方面極具應用價值。然而，目前iPS技術(shù)仍然存在致癌性、效率低等一系列問題。有研究表明，組蛋白PTMs對干細胞的多能性維持以與自我更新具有重要意義。因此，研究iPS細胞與ES細胞在組蛋白PTMs上的異同點，可以為深入了解iPS細胞的表觀遺傳特征以及與ES細胞生物學差異提供一定的依據(jù)。
　　 第二部分工作，針對干細胞的特點，采用體外化學同位素標記和LC-MS/MS技