毛細管電泳分析條件優(yōu)化方法研究.pdf

1、毛細管電泳是一種高效、快速和高靈敏的分離分析技術,已在藥學和生命科學等領域得到廣泛應用。由于影響毛細管電泳分離的因素較多且各因素間存在著復雜的交互作用,因而除需選擇合適的分離模式外,還需綜合考察毛細管柱、緩沖液體系、溫度、電壓和進樣條件等諸多因素,這使得毛細管電泳儀器分析條件的選擇較為困難。尤其在復雜樣品的分析中,往往難以建立適用的CE分析方法。因此,優(yōu)選CE分析條件已成為構建CE分析方法的重要環(huán)節(jié)。顯然,研究CE分析條件優(yōu)化方法對于藥

2、物分析學科和CE分析技術的發(fā)展具有重要的科學意義及實際應用價值。本文針對復雜樣品分析條件選擇難題,研究用試驗設計法、遺傳算法和粒子群優(yōu)化算法等構建毛細管電泳分析條件優(yōu)化方法。其主要研究內(nèi)容包括以下幾個方面:(1)以黃芩藥材為分析對象,采用試驗設計法優(yōu)化毛細管電泳分析條件。用中心組成試驗設計法考察硼砂濃度、NaH2PO4濃度、SDS濃度、乙腈含量和異丙醇含量等因素對分離效果的影響,以譜圖中所有峰的總分離度為評價指標,確定最優(yōu)分析條件。在該

3、分析條件下,分析測試了18個不同來源的黃芩樣品,黃芩苷等成分在14min內(nèi)得到較好分離,檢測出8個共有峰,并同時測定了黃芩苷、黃芩素和漢黃芩素等3種指標性成分含量,結果令人滿意。(2)以尿樣核苷類成分為分析對象,用中心組成試驗設計法系統(tǒng)考察硼砂濃度、SDS濃度、pH值和運行電壓等因素對毛細管電泳分離效果的影響,以色譜指數(shù)方程(CEF)為指標對分離情況進行評價,并建立CEF值與各因素間的關系模型,運用遺傳算法對所建關系模型進行全局尋優(yōu),獲

4、取最優(yōu)分析條件。實驗驗證結果表明,在該最優(yōu)分析條件下各核苷類成分在12min內(nèi)得到較好分離。(3)以丹參藥材為分析對象,采用正交試驗設計法篩選出硼砂濃度、NaH2PO4濃度、乙腈含量和運行電壓等主要影響因素,進而用中心組成試驗設計法對這些主要因素進行系統(tǒng)考察。以改良色譜指數(shù)方程(MCEF)為指標對毛細管電泳分離情況進行評價,建立MCEF值與各主要因素間的關系模型,并運用粒子群優(yōu)化算法對該模型進行全局尋優(yōu),獲取最優(yōu)分析條件。實驗驗證結果表