用于高效液相色譜—原子熒光光譜聯(lián)用的硫脲預(yù)還原氫化物發(fā)生接口技術(shù)及其在硒形態(tài)分析中的應(yīng)用.pdf

1、聯(lián)用技術(shù)已經(jīng)成為元素形態(tài)分析中應(yīng)用最廣泛的方法。高效液相色譜和原子光譜聯(lián)用是聯(lián)用技術(shù)中發(fā)展最快、應(yīng)用最多的聯(lián)用技術(shù)。硒元素是一個(gè)典型的雙功能元素，當(dāng)生物體內(nèi)硒含量太低時(shí)，會(huì)出現(xiàn)硒缺乏癥狀；而硒含量太高時(shí)，又有可能導(dǎo)致硒中毒；不僅如此，生物體對(duì)硒的吸收和代謝與其存在的形態(tài)有密切的關(guān)系。硒形態(tài)分析的分析方法學(xué)研究已成為元素形態(tài)分析研究領(lǐng)域的一個(gè)熱點(diǎn)。本論文主要貢獻(xiàn)是提出硫脲(TU)在線預(yù)還原六價(jià)硒(Se(Ⅵ))的方法、并研究了可能的還原機(jī)制

2、；所提出的“在線—?jiǎng)恿W(xué)控制預(yù)還原”方法與傳統(tǒng)硼氫化鉀/鹽酸(KHB4/NaOH-HCl)氫化物發(fā)生(HG)體系聯(lián)合使用，作為離子對(duì)高效液相色譜(IP-HPLC)和非色散原子熒光光譜(AFS)聯(lián)用技術(shù)的接口成功地應(yīng)用于生物樣品中硒形態(tài)分析。此外建立了HPLC與動(dòng)態(tài)反應(yīng)池電感耦合等離子體質(zhì)譜(DRCICP-MS)聯(lián)用的方法并應(yīng)用于血液樣品中硒代氨基酸的分析。本論文含三個(gè)部分： 第一章首先對(duì)硒在自然界中的存在及其生物學(xué)功能進(jìn)行了闡述

3、，解釋了硒形態(tài)分析工作的重要性和現(xiàn)實(shí)意義。其次，對(duì)硒形態(tài)分析中采用的各種聯(lián)用技術(shù)方法進(jìn)行了詳細(xì)的介紹，分為分離方法、接口技術(shù)、檢測(cè)技術(shù)以及樣品處理和保存方法等幾部分。 第二章發(fā)展了TU在線預(yù)還原Se(Ⅵ)的新方法；解決了Se(Ⅵ)直接KBH4/NaOH-HCl還原效率太低的、無(wú)法直接在線進(jìn)樣的困難。經(jīng)在線TU預(yù)還原，Se(Ⅵ)的發(fā)生效率提高了10倍以上。并以此為接口，建立了IP-HPLC分離，TU預(yù)還原HG-AFS檢測(cè)體系，對(duì)四

4、種常見(jiàn)的硒形態(tài)硒代胱氨酸、硒代蛋氨酸、亞硒酸和硒酸進(jìn)行分離檢測(cè)。并將建立的方法成功地應(yīng)用于富硒酵母、培養(yǎng)的富硒大蒜和標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)NIST1946(冷凍魚(yú)器官)中硒形態(tài)分析。 第三章建立了HPLC和DRCICP-MS聯(lián)用的分析方法對(duì)高硒地區(qū)，湖北省恩施自治州湖北民族學(xué)院附屬醫(yī)院門(mén)診患者血漿中含硒蛋白的酶解產(chǎn)物中的硒代氨基酸進(jìn)行形態(tài)分析，結(jié)果顯示樣品血漿中硒代半胱氨酸的含量基本保持在一定范圍；而硒代蛋氨酸的濃度有很大差異，其濃度與總