殼聚糖、膠原及其復合膜性質的AFM研究.pdf

1、　　上世紀九十年代初發(fā)明的原子力顯微鏡是一種新型、先進的表面分析儀器，自其問世的二十幾年來，在生物、醫(yī)學、材料學等領域的應用取得了很大進展，而且，人們正不斷尋求將其用于更廣泛的領域。
　　本論文中利用原子力顯微鏡成像技術觀察了膠原蛋白在UV-B照射前后形態(tài)的變化，發(fā)現UV-B引起膠原纖維交聯度的增加，當交聯達一定程度后，照射時間的增加對交聯度增加的影響不明顯。過度輻射也造成膠原纖維某些點位的斷裂損傷。這在生物體內將意味著膠原纖維功

2、能的缺失。紅外光譜圖顯示在膠原酰胺鍵的特征譜帶區(qū)，輻射時間的變化沒有引起膠原紅外吸收的改變，說明UV-B照射下膠原分子之間只發(fā)生了弱的相互作用，未生成新的化學鍵。AFM作為一種高分辨的表面分析儀器，為分子生物學領域的研究提供了一種有力的手段。是探討膠原光作用機理直觀、有效的方法。
　　用紅外光譜儀研究交聯劑戊二醛對膠原蛋白分子的作用，發(fā)現交聯后膠原分子間氫鍵的作用增強，分子內氫鍵的作用相對減弱，表現在紅外光譜圖上，酰胺Ⅰ、酰胺Ⅱ帶

3、的各子峰的峰值發(fā)生了相應的位移，強度比也發(fā)生了改變。AFM觀測的結果也顯示這種化學交聯劑的引入使膠原纖維的網狀結構遭到破壞，說明戊二醛的加入破壞了膠原的三級、四級結構。
　　本文將膠原和殼聚糖溶液按適當比例混合，澆注成膜，并首次采用原子力顯微鏡成像觀察共混膜表面的微觀結構。發(fā)現純膠原膜纖維束(直徑約100—400nm)交織形成致密的網絡結構；純殼聚糖膜呈線形結構：而共混膜形成互穿網絡結構，隨殼聚糖比例的增加，膠原纖維束變得松散，網

4、孔增大，孑L隙被殼聚糖顆粒填充。二種分子之間的相互作用使共混膜表面吸附力得以調節(jié)，有利于細胞的生長和遷移，共混膜這種結構是其優(yōu)于單一組分膜的基礎。
　　利用AFM觀察殼聚糖、膠原及殼聚糖一膠原混合膜對紅細胞結構的影響，結果顯示殼聚糖膜表面荷正電，黏附聚集紅細胞的現象最明顯，膠原蛋白膜帶負電，不易使紅細胞黏附，紅細胞保持了其基本形態(tài)，而膠原一殼聚糖混合膜表面呈微區(qū)相分離現象，殼聚糖正離子與膠原負離子交互鑲嵌，在酸性溶液制成的膜表面，