殼聚糖-膠原納米復(fù)合膜的研制及其引導(dǎo)骨再生的初步研究.pdf

1、目的：
　　引導(dǎo)骨再生(Guided Bone Regeneration，GBR)作為一種有效的骨增量技術(shù)，已被廣泛用于臨床，其中屏障膜的性能是決定療效的關(guān)鍵。本實(shí)驗(yàn)以殼聚糖和膠原為材料，采用靜電紡絲技術(shù)制備納米纖維膜，對(duì)其成分結(jié)構(gòu)及生物相容性檢測(cè);初步評(píng)級(jí)納米纖維膜與凍干膜聯(lián)合應(yīng)用于引導(dǎo)骨缺損再生的效果。
　　方法：
　　1)、對(duì)殼聚糖、膠原、聚環(huán)氧乙烷(PEO)三者不同配比混合液的可紡性研究，制備殼聚糖-膠原納米纖

2、維膜;通過(guò)戊二醛蒸汽交聯(lián)，獲得結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的納米纖維膜。
　　2)、通過(guò)掃描電鏡(SEM)、傅里葉紅外光譜(FT-IR)分析殼聚糖-膠原納米纖維膜交聯(lián)前后的結(jié)構(gòu)及成分變化;通過(guò)細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)及細(xì)胞體外生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)，評(píng)估納米纖維膜的生物相容性。
　　3)、殼聚糖-膠原混合液序列冷凍，經(jīng)真空低溫干燥獲得多孔凍干膜;常溫機(jī)械加壓處理后，進(jìn)行拉伸強(qiáng)度檢測(cè)。
　　4)、構(gòu)建SD大鼠臨界顱骨缺損模型，應(yīng)用殼聚糖-膠原納米纖維膜和凍干膜雙層膜

3、、Bio-gide膜、凍干膜覆蓋骨缺損，通過(guò)影像學(xué)及組織學(xué)方法評(píng)價(jià)其引導(dǎo)骨再生的效果。
　　結(jié)果：
　　1)、當(dāng)PEO濃度為3.5％時(shí)，殼聚糖為1％，膠原為0～6％或殼聚糖為1.5％，膠原為0～3.5％，三者的混合液具有良好的紡絲性，電紡制備的納米纖維結(jié)構(gòu)均一、表面光滑，且通過(guò)連續(xù)電紡可制備具有一定厚度的納米纖維膜。
　　2)、經(jīng)過(guò)戊二醛蒸汽交聯(lián)，納米纖維膜在水中的穩(wěn)定性明顯增加，同時(shí)SEM觀察發(fā)現(xiàn)交聯(lián)后的纖維直徑變大

4、。
　　3)、MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示殼聚糖-膠原納米纖維膜無(wú)明顯細(xì)胞毒性，并可促進(jìn)細(xì)胞早期快速增殖;SEM觀察發(fā)現(xiàn)納米纖維膜能為細(xì)胞的快速附著、增殖提供良好的微環(huán)境。
　　4)、殼聚糖-膠原凍干膜加壓處理后，拉伸強(qiáng)度由0.69±0.28MPa增至11.9±2.9MPa;彈性模量達(dá)到192.2±39MPa，基本滿足了臨床應(yīng)用的強(qiáng)度要求。
　　5)、大鼠顱骨缺損再生實(shí)驗(yàn)中，雙層膜和Bio-gide膜覆蓋組的新骨面積百分比分別為