新型稀土絡(luò)合物BC-EDTA的制備、表征及納米顆粒標(biāo)記用于時(shí)間分辨免疫檢測(cè).pdf

1、本文主要圍繞超靈敏診斷技術(shù)的研究展開。時(shí)間分辨熒光免疫診斷(TRFIA)以及生物發(fā)光免疫診斷技術(shù)是現(xiàn)代免疫診斷方法中兩個(gè)引人注目的熱點(diǎn)領(lǐng)域，適合于臨床上微量抗原、抗體的檢測(cè)和病原微生物痕量檢測(cè)等。本論文選題在這兩個(gè)研究方向開展相關(guān)的研究工作。全文主要包括三個(gè)部分：綜述各種類型的高靈敏免疫檢測(cè)技術(shù)；新型稀土絡(luò)合物2，9-雙[N，N-雙(羧甲基)氨甲基]-4，7-(苯基)-1，10-(菲咯啉)(BC-EDTA)的合成及其標(biāo)記二氧化硅納米生顆

2、粒并運(yùn)用于時(shí)間分辨熒光免疫診斷。 第一章為緒論，介紹了各種類型的超靈敏免疫檢測(cè)技術(shù)，并簡(jiǎn)要介紹超靈敏檢測(cè)技術(shù)發(fā)展的最新成果。 第二章主要為稀土絡(luò)合物BC-EDTA的制備與表征。首先合成了一種新型稀土絡(luò)合物BC-EDTA，該螯合劑具有良好的水溶性，可與稀土金屬離子(Eu3+)形成強(qiáng)熒光絡(luò)合物，不需要加入增強(qiáng)液，且與銪離子形成的絡(luò)合物熒光強(qiáng)度十分穩(wěn)定。利用四極桿飛行時(shí)間質(zhì)譜、紅外吸收光譜、紫外吸收光譜和核磁共振氫譜對(duì)其進(jìn)行表

3、征，結(jié)果表明，我們合成的絡(luò)合物與設(shè)計(jì)完全一致。 第三章描述了利用稀土絡(luò)合物BC-EDTA標(biāo)記二氧化硅納米應(yīng)用于時(shí)間分辨熒光免疫檢測(cè)。將納米熒光材料制備技術(shù)與時(shí)間分辨熒光免疫測(cè)定法相結(jié)合，建立了以熒光納米顆粒為生物標(biāo)記物的高靈敏度時(shí)間分辨熒光免疫分析方法。利用油包水型(W/O)微乳液體系，通過(guò)優(yōu)化乳液中各組分的配比和氨水的量來(lái)控制納米顆粒的大小和四乙氧基硅烷的水合化、聚合速度，得到了直徑為55 nm左右的空二氧化硅納米顆粒，再加入

4、(APTMS)，室溫反應(yīng)2 h，引入氨基。稀土螫合劑BC-EDTA與碳二亞胺(EDC)、(NHS)室溫?cái)嚢柘路磻?yīng)30 min，與懸浮于pH為6.8的磷酸鹽緩沖液中的顆粒反應(yīng)2 h，在加入Eu離子敏化發(fā)光，重復(fù)此過(guò)程4次，制得時(shí)間分辨熒光納米顆粒。再在熒光納米顆粒表面引入氨基，可以與抗體、抗原、寡核糖核苷酸等生物大分子交聯(lián)。這種熒光納米作為生物標(biāo)記物在免疫檢測(cè)，細(xì)胞成像及DNA雜化等領(lǐng)域?qū)⒕哂袕V闊的應(yīng)用空間。我們采用雙抗體夾心法對(duì)人血清中