共振瑞利散射測(cè)定殼聚糖的新方法研究.pdf

1、共振瑞利散射(RRS)技術(shù)是二十世紀(jì)90年代發(fā)展起來的一種新興的定量分析技術(shù)。近年來，因其操作簡(jiǎn)便、靈敏度高的特點(diǎn)日益受到人們的關(guān)注，在生物大分子(如核酸、蛋白質(zhì))、無機(jī)離子、藥物和一些物理化學(xué)參數(shù)的測(cè)定方面得到越來越廣泛的應(yīng)用。RRS法己成功應(yīng)用于一些糖類的研究和測(cè)定，目前主要集中于肝素的研究測(cè)定，但運(yùn)用此法對(duì)另一類在自然界廣泛存在的重要的多糖——?dú)ぞ厶堑难芯?，至今尚未見?bào)道。本文運(yùn)用RRS技術(shù)研究了殼聚糖分別與陰離子表面活性劑、染料

2、分子(剛果紅、曲利本蘭和茜素紅)、金屬鈰(Ⅳ)和金納米之間的相互作用，并建立了幾種測(cè)定殼聚糖的方便、快速的新方法。 本文的主要研究?jī)?nèi)容及成果如下： 1.殼聚糖—陰離子表面活性劑體系 在弱酸性介質(zhì)中，殼聚糖與十二烷基苯磺酸鈉(SDBS)、十二烷基硫酸鈉(SLS)、十二烷基磺酸鈉(SDS)等陰離子表面活性劑相互結(jié)合，會(huì)使各自體系的RRS急劇增強(qiáng)。考察了適宜的反應(yīng)條件，影響因素及共振瑞利散射強(qiáng)度與殼聚糖濃度之間的關(guān)系，

3、發(fā)現(xiàn)殼聚糖在一定的濃度范圍內(nèi)均與RRS強(qiáng)度成正比。方法的靈敏度較高，三個(gè)反應(yīng)體系的殼聚糖檢測(cè)限分別為：29 ng ml-1(SDBS體系)，83 ngml-1(SLS體系)，61 ng ml-1(sDS體系)。其中，SDBS體系的靈敏度最高，被選擇用于實(shí)際樣品中微量殼聚糖的測(cè)定，結(jié)果令人滿意。據(jù)此，建立了一個(gè)簡(jiǎn)單有效的測(cè)定殼聚糖的新方法。 2.殼聚糖—染料體系 2.1殼聚糖—?jiǎng)偣t體系 在弱酸性介質(zhì)中，通過靜電引

4、力和疏水力，酸性偶氮染料剛果紅(CR)能附著在殼聚糖表面結(jié)合成一種離子締合物，導(dǎo)致RRS強(qiáng)度顯著增強(qiáng)。研究了反應(yīng)產(chǎn)物的吸收和RRS光譜特征，適宜的反應(yīng)條件及分析化學(xué)性質(zhì)。結(jié)果顯示，殼聚糖濃度在0.05-10.0 μg mL-1內(nèi)與RRS強(qiáng)度成正比，其檢測(cè)限為5.73 ng mL-1。該方法靈敏度高，選擇性好，應(yīng)用于實(shí)際樣品的測(cè)定，結(jié)果令人滿意。 2.2殼聚糖—曲利本藍(lán)體系 在弱酸性溶液中，利用RRS技術(shù)考察了殼聚糖和曲利

5、本藍(lán)(TB)的反應(yīng)情況。結(jié)果顯示，殼聚糖能夠和TB結(jié)合形成一種離子締合物，導(dǎo)致RRS強(qiáng)度顯著增強(qiáng)并出現(xiàn)新的RRSY光譜。殼聚糖濃度在0.15-5.0 μmL-1范圍內(nèi)與RRS強(qiáng)度成正比，其檢測(cè)限為39.9ngmL-1該方法選擇性較好，用于實(shí)際樣品中的痕量殼聚糖濃度的測(cè)定，獲得滿意結(jié)果。 2.3殼聚糖-茜素紅體系 運(yùn)用RRS技術(shù)研究了殼聚糖和茜素紅(AR)的反應(yīng)情況。結(jié)果顯示，殼聚糖能結(jié)合茜素紅形成一種離子締合物，引起R

6、RS強(qiáng)度的顯著增強(qiáng)，并出現(xiàn)新的RRS光譜。殼聚糖濃度在0.3-10.0μg mL-1范圍內(nèi)與RRS強(qiáng)度成正比，其檢測(cè)限為85.43 ng mL-1。該方法有較寬的線性范圍和較高的靈敏度。用于實(shí)際樣品的測(cè)定，結(jié)果令人滿意。由此，建立了一種利用RRS技術(shù)以茜素紅為探針測(cè)定殼聚糖的的新方法。 3.殼聚糖-金納米體系 利用RRS技術(shù)研究了殼聚糖和金納米的反應(yīng)情況。結(jié)果顯示，加入金納米后，能夠明顯引起殼聚糖RRS強(qiáng)度的增強(qiáng)。在最優(yōu)

7、實(shí)驗(yàn)條件下，殼聚糖在0.5-5.0 μg mL-1濃度范圍內(nèi)與增強(qiáng)的RRS強(qiáng)度成正比，其檢測(cè)限是0.14 μgmL-1。該方法顯示出較寬的線性范圍和較高的靈敏度。用于實(shí)際樣品中殼聚糖含量的測(cè)定，結(jié)果令人滿意。據(jù)此，發(fā)展了一種以金納米為探針利用RRS技術(shù)測(cè)定殼聚糖的靈敏、高效、簡(jiǎn)便的新方法。 4.殼聚糖一鈰(Ⅳ)體系 在稀硫酸溶液中，殼聚糖和金屬離子鈰(Ⅳ)能夠反應(yīng)形成一種復(fù)合物，引起RRS強(qiáng)度的急劇增強(qiáng)，并在470 nm