共振光散射技術(shù)測(cè)定藥物及生物分子新方法的研究與應(yīng)用.pdf

1、使用普通的熒光光度計(jì)進(jìn)行測(cè)量的共振光散射(Resonance light scattering, RLS)技術(shù)是1993年由Pasternack等人提出的。由于RLS技術(shù)具有實(shí)驗(yàn)操作簡(jiǎn)單,方法靈敏度高,選擇性好等優(yōu)點(diǎn)而受到了廣泛的關(guān)注。近幾年來(lái),RLS法作為一種新興的分析測(cè)試方法,被不斷地應(yīng)用到超分子化學(xué)、物理化學(xué)、生命科學(xué)等領(lǐng)域中,并逐步顯示出了巨大的應(yīng)用潛能。進(jìn)一步研究并開(kāi)發(fā)出靈敏度高、選擇性佳、穩(wěn)定性好、操作簡(jiǎn)便的RLS測(cè)定新方法

2、和新體系已然成為分析化學(xué)工作者追求的科研目標(biāo)之一。
　　本學(xué)位論文的主要內(nèi)容是采用新興的RLS技術(shù)建立了八種新的生物與藥物分子的測(cè)定方法,并利用多種光譜學(xué)手段探討了分子間的作用機(jī)理。全文分為共振光散射技術(shù)在藥物與生物分子的分析研究?jī)蓚€(gè)部分。
　　第一部分,藥物分子及藥物中微量元素的分析研究
　　本文首次建立了以二價(jià)錳離子為探針,基于較為少見(jiàn)的RLS信號(hào)減弱現(xiàn)象的藥物分子蘆丁的定量分析方法。另外還利用氨基比林-十六烷基三

3、甲基溴化胺-蘆丁的三體系建立了基于 RLS信號(hào)增強(qiáng)的分析測(cè)定方法。分別研究了反應(yīng)的各種影響因素以及適宜的反應(yīng)條件。在pH7.5的溶液中,二價(jià)錳離子與蘆丁發(fā)生相互作用,引起 RLS信號(hào)減弱的現(xiàn)象,降低的RLS強(qiáng)度與蘆丁的濃度呈良好的線(xiàn)性正比關(guān)系,由此建立的蘆丁測(cè)定方法的檢出限為0.42μg/mL,線(xiàn)性范圍為0.49-24.4μg/mL。而在氨基比林-十六烷基三甲基溴化胺-蘆丁的RLS體系中,表面活性劑以橋聯(lián)作用將三者結(jié)合并引起強(qiáng)烈的RLS

4、信號(hào)增強(qiáng),該方法的檢出限為0.12μg/mL,線(xiàn)性范圍為0.4-24.0μg/mL。本文提出的兩種蘆丁測(cè)定方法較傳統(tǒng)的蘆丁分析方法靈敏度高,選擇性好,可以在較寬的范圍內(nèi)準(zhǔn)確測(cè)定出蘆丁的含量。
　　二價(jià)銅離子以及Gemini型兩性離子表面活性劑磷酸二酯季銨鹽在最佳實(shí)驗(yàn)條件下可與藥物分子姜黃素發(fā)生反應(yīng)并引起強(qiáng)烈的共振光增強(qiáng),且RLS增強(qiáng)的強(qiáng)度與姜黃素的濃度在一定范圍內(nèi)成線(xiàn)性正比關(guān)系。兩個(gè)實(shí)驗(yàn)測(cè)定姜黃素的檢出限分別為:0.07μg/mL

5、和2.6 ng/mL;線(xiàn)性范圍分別為:0.4~60μg/mL和0.08~60μg/mL。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可見(jiàn),以磷酸二酯季銨鹽為探針建立的姜黃素的RLS測(cè)定方法更加靈敏且線(xiàn)性范圍更寬。
　　本文還建立了測(cè)定藥物中的活性成分鉍的RLS新方法。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),PO43+與Bi(III)可以發(fā)生相互作用并形成離子締合物使得RLS信號(hào)明顯增強(qiáng)?；诖爽F(xiàn)象,本文利用極為普通廉價(jià)的磷酸作為RLS探針,建立了一種新的,快速簡(jiǎn)便的測(cè)定溶液中微量鉍的分析方法,

6、實(shí)驗(yàn)測(cè)定出鉍的檢出限為2.4 ng/mL,線(xiàn)性范圍在0.05~30μg/mL之間。該方法操作簡(jiǎn)單,靈敏度高,選擇性和重現(xiàn)性好,可直接用于胃藥中鉍含量的測(cè)定。
　　第二部分,生物分子的分析研究
　　本文研究發(fā)現(xiàn),糊精和生物多糖海藻酸鈉具有在溶液中發(fā)生自身聚集特性并使得自身粒徑變大從而導(dǎo)致RLS信號(hào)增強(qiáng)。在其它條件一定時(shí),RLS信號(hào)的強(qiáng)度與散射粒子的濃度呈線(xiàn)性正比關(guān)系。由此我們確定了用RLS法測(cè)定溶液中糊精和生物多糖海藻酸鈉濃度

7、的定量基礎(chǔ)。糊精和多糖測(cè)定的檢出限分別為0.012 mg/mL和0.15μg/mL;線(xiàn)性范圍分別為0.2~14 mg/mL和0.05~18 mg/mL。這是RLS方法在免探針的情況下建立的分析測(cè)定實(shí)驗(yàn),進(jìn)一步簡(jiǎn)化了操作的同時(shí)是新興RLS技術(shù)的革新。
　　以致癌物質(zhì)聯(lián)苯胺為RLS探針研究了蛋白質(zhì)與環(huán)境化學(xué)污染物的相互作用,并利用它們?cè)谒嵝詶l件下產(chǎn)生的增強(qiáng)的RLS光譜信號(hào)建立了一種測(cè)定蛋白質(zhì)的RLS新方法。在波長(zhǎng)392.0 nm處,聯(lián)