關(guān)于萘酰亞胺—羅丹明能量轉(zhuǎn)移體系構(gòu)筑及應(yīng)用.pdf

1、近些年來，基于熒光檢測方法檢測金屬離子和生物小分子越來越受到人們的關(guān)注，熒光檢測方法已經(jīng)常常被用在核苷酸的檢測，蛋白質(zhì)標(biāo)記，免疫分析和環(huán)境保護(hù)等眾多領(lǐng)域。熒光增強(qiáng)型和熒光比率型的單分子熒光團(tuán)熒光探針能夠有效的避免生物體系自發(fā)熒光的干擾，但是它們測試準(zhǔn)確度極易受到環(huán)境因素的影響（比如pH，極性，溫度等等），為了解決這一難題，具有供體-受體能量轉(zhuǎn)移體系的構(gòu)筑顯得很重要，這個(gè)體系能夠同時(shí)發(fā)射出兩個(gè)不同波長處的熒光，實(shí)現(xiàn)熒光比率信號(hào)的變化，從而

2、避免環(huán)境因素的干擾，提高檢測的精確度，同時(shí)達(dá)到大Stokes位移檢測的效果，此時(shí)熒光共振能量轉(zhuǎn)移技術(shù)越來越受到重視。
　　本論文設(shè)計(jì)并合成了基于萘酰亞胺-羅丹明的熒光共振能量轉(zhuǎn)移兩例探針RN1，RN2,實(shí)現(xiàn)了大Stokes位移檢測Cu2+和Fe3+。經(jīng)鍵能量共振轉(zhuǎn)移的熒光探針RN1，在乙腈/Tris-HCl(20∶1，v/v，pH7.4，10 mM)，可以很好的選擇性識(shí)別Cu2+，對(duì)其它常見金屬離子都沒有響應(yīng)，且不受其他陽離子的干

3、擾，銅離子加入前后熒光從綠色變?yōu)辄S色。RN1對(duì)較低濃度Cu2+的檢測仍呈良好的線性關(guān)系，最低檢出限為3.88×10-7 mol/L。經(jīng)過對(duì)細(xì)胞熒光顯微成像實(shí)驗(yàn)表明，探針的細(xì)胞通透性很好，并且細(xì)胞毒性比較低，在MCF-7細(xì)胞中能很好對(duì)Cu2+進(jìn)行熒光顯微成像。
　　基于FRET機(jī)理，探針RN2對(duì)Fe3+有很好的選擇性，并且不受其他陽離子的明顯干擾。用410nm激發(fā)時(shí)，當(dāng)加入Fe3+后，會(huì)在580 nm處出現(xiàn)明顯的羅丹明發(fā)射峰，實(shí)現(xiàn)了