關(guān)于萘酰亞胺—羅丹明能量轉(zhuǎn)移體系構(gòu)筑及應(yīng)用.pdf

1、近些年來，基于熒光檢測方法檢測金屬離子和生物小分子越來越受到人們的關(guān)注，熒光檢測方法已經(jīng)常常被用在核苷酸的檢測，蛋白質(zhì)標(biāo)記，免疫分析和環(huán)境保護等眾多領(lǐng)域。熒光增強型和熒光比率型的單分子熒光團熒光探針能夠有效的避免生物體系自發(fā)熒光的干擾，但是它們測試準(zhǔn)確度極易受到環(huán)境因素的影響（比如pH，極性，溫度等等），為了解決這一難題，具有供體-受體能量轉(zhuǎn)移體系的構(gòu)筑顯得很重要，這個體系能夠同時發(fā)射出兩個不同波長處的熒光，實現(xiàn)熒光比率信號的變化，從而

2、避免環(huán)境因素的干擾，提高檢測的精確度，同時達(dá)到大Stokes位移檢測的效果，此時熒光共振能量轉(zhuǎn)移技術(shù)越來越受到重視。
　　本論文設(shè)計并合成了基于萘酰亞胺-羅丹明的熒光共振能量轉(zhuǎn)移兩例探針RN1，RN2,實現(xiàn)了大Stokes位移檢測Cu2+和Fe3+。經(jīng)鍵能量共振轉(zhuǎn)移的熒光探針RN1，在乙腈/Tris-HCl(20∶1，v/v，pH7.4，10 mM)，可以很好的選擇性識別Cu2+，對其它常見金屬離子都沒有響應(yīng)，且不受其他陽離子的干

3、擾，銅離子加入前后熒光從綠色變?yōu)辄S色。RN1對較低濃度Cu2+的檢測仍呈良好的線性關(guān)系，最低檢出限為3.88×10-7 mol/L。經(jīng)過對細(xì)胞熒光顯微成像實驗表明，探針的細(xì)胞通透性很好，并且細(xì)胞毒性比較低，在MCF-7細(xì)胞中能很好對Cu2+進(jìn)行熒光顯微成像。
　　基于FRET機理，探針RN2對Fe3+有很好的選擇性，并且不受其他陽離子的明顯干擾。用410nm激發(fā)時，當(dāng)加入Fe3+后，會在580 nm處出現(xiàn)明顯的羅丹明發(fā)射峰，實現(xiàn)了