以P-,GMA-EDMA-樹(shù)脂為基質(zhì)的離子色譜填料的制備及應(yīng)用研究.pdf

1、本文以實(shí)驗(yàn)室自合成的大孔單分散親水性交聯(lián)聚甲基丙烯酸環(huán)氧丙酯樹(shù)脂(PGMA/EDMA)為載體，制備了兩種新型離子色譜固定相，考察了填料的色譜性能，并將其應(yīng)用于實(shí)際樣品的分離分析，取得較好的效果。另外，論文以自合成的大孔單分散親水性PGMA/EDMA樹(shù)脂為載體，制備了親水性弱陽(yáng)離子交換色譜填料，并放大弱陽(yáng)離子交換色譜填料和兩性離子交換色譜填料，考察填料對(duì)標(biāo)準(zhǔn)蛋白的分離性能與放大前比較。將其用于實(shí)際生物樣品的分離純化，取得較好的效果。論文主

2、要分以下幾部分：
　　 1.以PGMA/EDMA樹(shù)脂為基質(zhì)，采用化學(xué)鍵合法，制備了兩種新型弱酸型陽(yáng)離子色譜填料，用于七種無(wú)機(jī)陽(yáng)離子以及NH4+和四種有機(jī)胺混合樣的分離，比較了兩種填料的分離性能。選用填料
　　 (Ⅰ)作研究對(duì)象，詳細(xì)考察了淋洗液種類、濃度和流速對(duì)六種陽(yáng)離子分離的影響，并將其用于決明茶和普洱茶中四種無(wú)機(jī)陽(yáng)離子的分析。與Dionex IonPac(R)CS12A商品柱比較，分離效果幾乎一樣，但分析時(shí)間縮短44

3、min，各離子加標(biāo)回收率在92％～107％之間。
　　 2.以PGMA/EDMA樹(shù)脂為基質(zhì)，制備了季銨型強(qiáng)陰離子色譜填料。分別對(duì)常見(jiàn)六種無(wú)機(jī)陰離子、四種低碳鏈酸以及無(wú)機(jī)陰離子和有機(jī)酸混合樣進(jìn)行分離，考察了填料的色譜性能。詳細(xì)考察了淋洗液種類、pH值、有機(jī)溶劑、柱長(zhǎng)等色譜條件對(duì)陰離子保留行為的影響。應(yīng)用此固定相對(duì)雨水和雪冰融水中陰離子進(jìn)行分析，與Dionex IonPac(R)AS12A商品柱比較，分離效果幾乎一樣，測(cè)得值基本一致

4、，各離子加標(biāo)回收率在93％～104％，結(jié)果滿意。
　　 3.以PGMA/EDMA樹(shù)脂為基質(zhì)，采用簡(jiǎn)單的化學(xué)改性方法制備了性能優(yōu)異的弱陽(yáng)離子交換色譜填料。詳細(xì)考察了填料的離子交換特征、標(biāo)準(zhǔn)蛋白的分離性能、表面親水性能、酸堿穩(wěn)定性和重現(xiàn)性以及流速對(duì)蛋白保留的影響。將填料放大50倍，考察對(duì)標(biāo)準(zhǔn)蛋白的分離性能。并用于鯉魚(yú)精巢中魚(yú)精蛋白的分離純化，經(jīng)反相高效液相色譜測(cè)定純化后魚(yú)精蛋白的純度為99.2％，與Shodex IEC SP-825

5、商品強(qiáng)陽(yáng)離子交換色譜柱比較，純化結(jié)果幾乎一樣。
　　 4.放大兩性離子交換色譜填料，考察放大50倍后該填料對(duì)標(biāo)準(zhǔn)蛋白的分離性能，與實(shí)驗(yàn)室2年前制各的兩性離子交換柱比較。結(jié)果表明，放大后的填料同樣具有良好的離子交換性能。用該固定相對(duì)胰蛋白酶粗樣進(jìn)行分離純化，通過(guò)反相高效液相色譜法和聚丙烯酰胺凝膠(SDS-PAGE)電泳技術(shù)測(cè)定，純化后胰蛋白酶純度達(dá)到93％。
　　 5.以PGMA/EDMA樹(shù)脂為基質(zhì)，合成了四種強(qiáng)陰離子交換