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文檔簡介
1、D-蘋果酸(D-Malate)是一種重要的手性化工材料,主要應用于手性藥物合成、手性添加劑、手性助劑等領域,具有廣闊的開發(fā)前景.國內D-蘋果酸的研究起步較晚,主要研究微生物拆分法,尚無工業(yè)化的報道,因此對生物轉化法制備D-蘋果酸的研究具有重要的理論價值和經濟價值.本文主要創(chuàng)新點:本文在國內首次研究酶轉化法生產D-蘋果酸,利用He B.-F.篩選的Pimelobacter simplex DM18,對菌株的發(fā)酵培養(yǎng)基和發(fā)酵條件進行優(yōu)化,得
2、到了高活力培養(yǎng)基和發(fā)酵條件,發(fā)酵液的最高生物量OD<,660>達4.5,遠大于Mariet J.van der Werf等報道的Pseudomonas pseudoalcaligenes NCIMB9867的水平,同時菌體酶活也較高,酶活高于Asano Y.等報道的Arthrobacter sp.MCI2612,接近于He B.-F.的Arthrobacter pascens DMDC12水平.以休止細胞為對象對轉化反應的條件進行了研究
3、,主要考慮破壁劑、反應溫度、反應液pH值、菌濃度、底物濃度等因素對酶促反應的影響,獲得最佳的酶促反應條件.采用間歇添加馬來酸鈉的方式制備D-蘋果酸反應32小時,D-蘋果酸濃度達到153.92g/L,光學純度達到93.85﹪ee,底物馬來酸轉化率達到96.67﹪,接續(xù)近于國際上報道的最高水平.本文研究還采用反應分離耦合技術制備D-蘋果酸,每升反應液中可轉化300g的D-蘋果酸,光學純度達到94.06﹪ee,其轉化率接近于99﹪,該采用反應
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