簡介：1,第三篇微生物學各論,三性兩法生物學性狀微生物學檢查法致病性免疫性防治法,,,2,第十四章化膿性細菌,,3,化膿性細菌一類能夠感染人體并引起化膿性炎癥的細菌。常引起創(chuàng)傷感染和醫(yī)院內(nèi)感染。根據(jù)革蘭染色性的不同可分成G菌葡萄球菌、鏈球菌、肺炎鏈球菌等G菌腦膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、銅綠假單胞菌等。,,4,第一節(jié)葡萄球菌屬STAPHYLOCOCCUS,對人類致病的主要是金黃色葡萄球菌（SAUREUS）。,5,分布廣泛，是最常見的化膿性球菌醫(yī)院內(nèi)交叉感染的重要傳染源所致疾病化膿性炎癥食物中毒燙傷樣皮膚綜合征毒性休克綜合征耐藥率高,6,1、形態(tài)與染色球形或橢圓形，平均直徑1ΜM，典型排列呈葡萄串狀；無鞭毛，無芽胞，體外培養(yǎng)時一般不形成莢膜；革蘭染色陽性。衰老、死亡或被中性粒細胞吞噬后易G－。,一、生物學性狀,7,膿標本革蘭染色鏡檢,8,2、培養(yǎng)特性,營養(yǎng)要求不高，耐鹽，最適生長溫度為37℃，最適PH為74。在普通瓊脂平板上孵育2448H后，形成S型（光滑）菌落?？僧a(chǎn)生脂溶性色素，菌落呈現(xiàn)金黃色、白色、檸檬色不同的顏色。血瓊脂平板上，致病性葡萄球菌形成明顯的全透明溶血環(huán)（?溶血）。,9,三種葡萄球菌培養(yǎng),瓊脂培養(yǎng)基,金黃色葡萄球菌,表皮葡萄球菌,腐生葡萄球菌,金黃色色素,白色色素,檸檬或白色色素,致病力強,條件致病菌,一般不致病,,10,金黃色葡萄球菌金黃色菌落,11,金黃色葡萄球菌血平板,,12,3、生化反應,觸酶陽性；可與鏈球菌區(qū)別多數(shù)菌株能分解葡萄糖、麥芽糖和蔗糖；致病株能分解甘露醇。,13,4、抗原結構,14,葡萄球菌A蛋白STAPHYLOCOCCUSAPROTEIN，SPA是葡萄球菌細胞壁的一種表面蛋白，可與人類免疫球蛋白IGG的FC段非特異性結合，而IGG分子的FAB段仍能同相應抗原分子特異性結合，介導完成協(xié)同凝集試驗。,15,意義,I含SPA的葡萄球菌可作為載體，結合特異性抗體后，開展簡易、快速的協(xié)同凝集試驗，檢測多種微生物抗原。,16,,IISPA與IGG結合后的復合物具有抗吞噬、促細胞分裂、引起超敏反應、損傷血小板等多種生物學活性。,17,莢膜體內(nèi)的大多數(shù)金黃色葡萄球菌有莢膜，有粘附作用，與細菌侵襲力有關。多糖抗原具有群特異性，存在于細胞壁。,18,5、抵抗力,葡萄球菌在無芽胞菌中抵抗力最強。60℃1H或80℃30分鐘才被殺死。對堿性染料敏感，龍膽紫可抑制其生長。對許多抗生素敏感，但易產(chǎn)生耐藥性。近年來出現(xiàn)的耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）已成為醫(yī)院感染最常見的致病菌。,19,根據(jù)色素與生化反應根據(jù)噬菌體分為5個噬菌體群和26個噬菌體型。,,金黃色葡萄球菌,表皮葡萄球菌,腐生葡萄球菌,6、分類,20,二、致病性與免疫性,,致病物質(zhì)所致疾病,21,（一）致病物質(zhì),毒素細胞毒素（?、?、?、?、殺白細胞素）、表皮剝脫毒素、毒性休克綜合征毒素1、腸毒素等。酶凝固酶、纖維蛋白溶酶、耐熱核酸酶、透明質(zhì)酸酶、脂酶等。其他粘附素、莢膜、胞壁肽聚糖等。,22,凝固酶（COAGULASE）,能使含有枸櫞酸鈉或肝素抗凝劑的人或兔血漿發(fā)生凝固的酶類物質(zhì)。作用抗吞噬作用（纖維蛋白沉積細菌表面）保護病菌不受血清中殺菌物質(zhì)的破壞使感染易于局限化和形成血栓意義鑒別葡萄球菌有無致病性的重要指標。,23,葡萄球菌溶素（膜損傷毒素）損傷細胞膜的毒素，主要是?溶素。?溶素對多種哺乳動物RBC有溶血作用。對白細胞、血小板、肝細胞、成纖維細胞、血管平滑肌細胞等均有損傷作用。?溶素是一種外毒素，可制成類毒素。殺白細胞素攻擊中性粒細胞和巨噬細胞，能抗吞噬和增強病菌的侵襲力。,24,腸毒素（ENTEROTOXIN）,約1/3臨床分離的金黃色葡萄球菌可產(chǎn)生腸毒素。耐熱的外毒素引起急性胃腸炎即食物中毒。作用機制到達中樞神經(jīng)系統(tǒng)后刺激嘔吐中樞而導致以嘔吐為主要癥狀的食物中毒。,25,表皮剝脫毒素（EXFOLIATIN）,蛋白質(zhì)外毒素，使表皮和真皮脫離?？梢馉C傷樣皮膚綜合征（STAPHYLOCOCCALSCALDEDSKINSYNDROME,SSSS），又稱剝脫性皮炎，多見于新生兒、幼兒和免疫功能低下的成人。,26,毒性休克綜合征毒素1（TSST1）,TSST1可引起機體發(fā)熱，增加對毒素的敏感性；可引起機體多個器官系統(tǒng)的功能紊亂或毒性休克綜合征（TSS）。,27,其他,耐熱核酸酶（HEATSTABLENUCLEASE）致病性葡萄球菌能產(chǎn)生該酶。耐熱，經(jīng)100℃15MIN或60℃2H不被破壞；能較強的降解DNA和RNA。耐熱核酸酶可作為測定葡萄球菌有無致病性的重要指標之一。,28,（二）所致疾病,1、化膿性感染化膿性炎癥大多由致病性較強的金葡菌引起。（1）局部感染癤、癰、毛囊炎、甲溝炎、蜂窩組織炎、膿胸、傷口化膿（2）全身感染敗血癥、膿毒血癥特點膿液稠厚，不易擴散,29,化膿性感染,癤,癰,,30,化膿性感染,31,2、毒素性疾病食物中毒由葡萄球菌腸毒素引起。為毒素性食物中毒，1～6H出現(xiàn)癥狀，以嘔吐為主要癥狀，大多于1～2D內(nèi)恢復。,32,,假膜性腸炎是一種菌群失調(diào)性腸炎。主要表現(xiàn)為腹瀉。病理特點是腸粘膜被一層炎性假膜覆蓋。現(xiàn)認為主要由艱難梭菌所致，金黃色葡萄球菌僅為伴隨菌。,33,,燙傷樣皮膚綜合征由表皮剝脫毒素引起，導致表皮上層脫落。,34,,,,毒性休克綜合征由毒性休克綜合征毒素1引起，主要表現(xiàn)為急性高熱、低血壓、腥紅熱樣皮疹伴脫屑。嚴重時出現(xiàn)休克。,35,（三）免疫性,人類對葡萄球菌有一定的天然免疫力?；疾『螅塬@得一定的免疫力，但不強。,36,幼貓試驗,三、微生物學檢查法,標本,膿汁、血液、腦脊液、剩余食物、嘔吐物等,分離培養(yǎng)與鑒定,觸酶血漿凝固酶發(fā)酵甘露醇耐熱核酸酶,直接涂片鏡檢,,革蘭陽性葡萄球菌,,,生長現(xiàn)象,,色素、溶血等,,生化反應,,毒素檢查,,,,37,致病性葡萄球菌的主要鑒別依據(jù),金黃色色素?溶血凝固酶陽性耐熱核酸酶陽性分解甘露醇,38,,四、防治原則,,,防,,,注意消毒隔離,注意個人衛(wèi)生,,,防止醫(yī)源性感染,防止耐藥性產(chǎn)生,,,治,,,抗菌素藥敏試驗,自身菌苗療法,39,第二節(jié)鏈球菌屬（STREPTOCOCCUS）,對人類致病的主要是A群鏈球菌和肺炎鏈球菌。,40,1、形態(tài)與染色球形或橢圓形，呈鏈狀排列。無芽胞，無鞭毛。培養(yǎng)早期（24H）形成透明質(zhì)酸的莢膜。細胞壁外有菌毛樣結構，含有型特異性M蛋白。革蘭染色陽性。,一、生物學性狀,41,42,2、培養(yǎng)特性,營養(yǎng)要求較高，需補充血液、血清、葡萄糖等。在血清肉湯中易形成長鏈，管底呈絮狀沉淀。在血瓊脂平板上形成灰白色半透明、表面光滑、邊緣整齊的菌落，不同菌株溶血不一。,43,3、生化反應,分解葡萄糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。觸酶陰性。鏈球菌一般不分解菊糖，不被膽汁溶解，這兩特性可用來鑒別甲型溶血性鏈球菌和肺炎鏈球菌。,44,4、抗原結構,蛋白質(zhì)抗原或稱表面抗原。具有型特異性。A群鏈球菌有M、T、R和S不同性質(zhì)的蛋白質(zhì)抗原，與致病性有關的是M抗原。多糖抗原或稱C抗原。是群特異性抗原，是細胞壁的多糖組分。核蛋白抗原或稱P抗原。無特異性。,45,5、分類,根據(jù)溶血現(xiàn)象分類根據(jù)抗原結構的分類,46,根據(jù)溶血現(xiàn)象分類,甲型溶血性鏈球菌草綠色溶血環(huán)，稱甲型溶血或?溶血，?溶血環(huán)中的紅細胞并未完全溶解。多為條件致病菌。乙型溶血性鏈球菌完全透明溶血環(huán)，稱乙型溶血或?溶血，?溶血環(huán)中的紅細胞完全溶解，致病力強。丙型鏈球菌無溶血環(huán)，又稱不溶血性鏈球菌。一般不致病。,47,,48,根據(jù)抗原結構的分類,按多糖抗原，可分成20群。對人致病的鏈球菌菌株，90左右屬A群。A群根據(jù)其M抗原不同，可分為100個型。,49,6、抵抗力,抵抗力比較弱。對常用消毒劑敏感。對青霉素、紅霉素，四環(huán)素和磺胺藥都很敏感。青霉素是治療首選藥物，極少發(fā)現(xiàn)有耐藥菌株。,50,二、致病性與免疫性,51,（一）致病物質(zhì),鏈球菌溶素（STREPTOLYSIN）致熱外毒素（PYROGENICEXOTOXIN）透明質(zhì)酸酶,脂磷壁酸M蛋白鏈激酶（STREPTOKINASESK）鏈道酶（STREPTODORNASESD）,52,1、毒素,致熱外毒素（紅疹毒素／猩紅熱毒素）是人類猩紅熱的主要毒性物質(zhì)。由A群鏈球菌溶原菌菌株產(chǎn)生。,53,根據(jù)對氧的穩(wěn)定性可分為SLO鏈球菌溶素O對O2敏感，氧化后即失去溶血活性?？乖詮?，可刺激機體產(chǎn)生SLO抗體（即抗“O”），常用于風濕熱活動性及腎小球腎炎的輔助診斷。（1400）SLS鏈球菌溶素S對O2穩(wěn)定破壞紅細胞無免疫原性，不產(chǎn)生抗體。,鏈球菌溶素,54,2、侵襲性酶,透明質(zhì)酸酶又名擴散因子能分解細胞間質(zhì)的透明質(zhì)酸，使病菌易在組織中擴散。,55,鏈激酶（STREPTOKINASESK）,能使血液中纖維蛋白酶原變成纖維蛋白酶，可溶解血塊或阻止血漿凝固，有利于病菌在組織中擴散。,鏈道酶（STREPTODORNASESD）,亦稱鏈球菌DNA酶。能降解膿液中具有高度粘稠性的DNA，使膿液稀薄，促進病菌擴散。,56,3、細胞壁成分,脂磷壁酸（LTA）圍繞在M蛋白外層，與M蛋白共同組成鏈球菌的菌毛樣結構。與人類多種細胞膜上的受體結合，使細菌能定植在皮膚和粘膜表面。M蛋白,有抗吞噬和抵抗吞噬細胞內(nèi)的殺菌作用與某些超敏反應疾病有關,57,58,（二）所致疾病,A群鏈球菌為主，占90化膿性（淋巴管炎、淋巴結炎、扁桃體炎、咽炎、中耳炎等）中毒性猩紅熱超敏反應性風濕熱急性腎小球腎炎,59,猩紅熱皮疹,小兒猩紅熱,60,61,（三）免疫性,可獲得對同型鏈球菌的特異性免疫力。但因其型別多，各型間無交叉免疫力，故常可反復感染?；夹杉t熱后能建立牢固的同型抗毒素免疫。,62,三、微生物學檢查法,標本膿液、咽拭子直接涂片鏡檢分離培養(yǎng)與鑒定接種在血瓊脂平板如有?溶血菌落，應與葡萄球菌區(qū)別?溶血菌落，要和肺炎鏈球菌鑒別,63,血清學診斷,抗鏈球菌溶血素O試驗（ANTISTREPTOLYSINOTEST,ASOTEST）SLORBC溶血SLO患者血清RBC不溶血,,,結果效價大于400單位意義風濕熱及其活動性的輔助診斷,64,四、防治原則,減少傳染源注意消毒治療患者以青霉素G為首選藥物，須治療徹底，防止超敏反應性疾病的發(fā)生。,65,第三節(jié)肺炎鏈球菌（SPNEUMONIAE）,,66,G雙球菌，呈矛尖狀培養(yǎng)營養(yǎng)要求高。在血平板上的菌落細小、圓形略扁、灰白色半透明，菌落周圍出現(xiàn)草綠色溶血環(huán)，培養(yǎng)時間48小時，菌落呈臍狀生化反應與甲型鏈球菌的鑒別－－菊糖發(fā)酵試驗、膽汁溶菌試驗,一、生物學性狀,67,肺炎球菌,68,肺炎鏈球菌菌落扁平狀,69,肺炎鏈球菌落臍狀,70,二、致病性,致病物質(zhì)莢膜肺炎鏈球菌溶素O脂磷壁酸神經(jīng)氨酸酶所致疾病大葉性肺炎化膿性中耳炎、胸膜炎、膿胸、腦膜炎或敗血癥,71,三、微生物學檢查法,標本取痰液、膿汁、血液或腦脊液等直接涂片鏡檢分離培養(yǎng)與鑒定（與甲型溶血性鏈球菌鑒別）膽汁溶菌試驗OPTOCHIN試驗莢膜腫脹試驗動物試驗少量具有毒力的肺炎鏈球菌注入小鼠腹腔內(nèi)，一般24H內(nèi)死亡。,72,右側肺炎鏈球菌（澄清、透明）左側甲型溶血性鏈球菌（渾濁）,膽汁溶菌試驗,73,四、防治原則,莢膜多糖多價疫苗治療前作常規(guī)藥物敏感試驗,74,第四節(jié)奈瑟菌屬（NEISSERIA）,,75,概述,革蘭陰性雙球菌。無鞭毛。無芽胞。有莢膜和菌毛。種類腦膜炎奈瑟菌（NMENINGITIDIS）淋病奈瑟菌（NGONORRHOEAE）干燥奈瑟菌（NSICCA）、淺黃奈瑟菌（NSUBFLAVA）、金黃奈瑟菌（NFLAVESCENS）、粘膜奈瑟菌（NMUCOSA）等,76,一、腦膜炎奈瑟菌（MENINGOCOCCUS）,,77,（一）生物學性狀,形態(tài)與染色腎形或豆形革蘭陰性雙球菌，新分離菌株大多有莢膜和菌毛。培養(yǎng)特性營養(yǎng)要求較高，常用巧克力（色）培養(yǎng)基。專性需氧，5CO2條件下生長更佳。菌落為圓形光滑似露滴狀。血平板上不溶血。抵抗力很弱。對干燥、熱力、消毒劑等均敏感。,78,腦膜炎雙球菌,79,AB,A腦膜炎奈瑟菌在血瓊脂平板上的菌落特征1824HB腦膜炎奈瑟菌在巧克力瓊脂平板上的菌落特征1824H,80,（二）致病性,致病物質(zhì)侵襲力莢膜和菌毛毒素內(nèi)毒素，是腦膜炎奈瑟菌的主要致病物質(zhì)。所致疾病流行性腦脊髓膜炎（簡稱流腦）主要經(jīng)飛沫傳播鼻咽部炎癥敗血癥腦膜炎,81,標本,分離培養(yǎng)與鑒定,腦脊液、血液、出血點滲出液、鼻咽拭子保暖、保濕、立即送檢，培養(yǎng)基預溫。最好床邊接種。,直接涂片鏡檢,中性粒細胞內(nèi)、外有革蘭陰性雙球菌，可作出初步診斷。,巧克力（色）培養(yǎng)基，5CO2氣體。生化反應和玻片凝集試驗鑒定。,快速診斷,對流免疫電泳，SPA協(xié)同凝集試驗,（三）微生物學檢查法,82,（四）防治原則,流腦莢膜多糖疫苗（AC）進行特異性預防。注意隔離治療流腦患者，控制傳染源。流行期間兒童可口服磺胺藥物等預防。,83,二、淋病奈瑟菌（GONOCOCCUS）,,84,（一）生物學性狀,形態(tài)與染色革蘭陰性雙球菌，似一對咖啡豆。無芽胞。無鞭毛。有莢膜和菌毛。培養(yǎng)特性專性需氧，初次分離培養(yǎng)時需供給5CO2。營養(yǎng)要求高，巧克力（色）血瓊脂平板是適宜培養(yǎng)基。抵抗力熱、冷、干燥和消毒劑極敏感，1石炭酸3MIN或14000硝酸銀2MIN即死亡。,85,NEISSERIAGONORRHOEAEGRAMSTAINOFPURECULTURE,NEISSERIAGONORRHOEAEGRAMSTAINOFAPUSTULAREXUDATE,NEISSERIAGONORRHOEAE,淋病奈瑟菌,86,致病物質(zhì)菌毛粘附作用；抵抗吞噬。外膜蛋白Ⅱ有助于粘附。IGA蛋白酶能破壞黏膜表面SIGA。內(nèi)毒素損害人體黏膜的重要因素。,87,人類是淋病奈瑟菌的唯一宿主。主要通過性接觸引起泌尿道和生殖系統(tǒng)炎癥。,,,淋病,新生兒淋菌性結膜炎,新生兒由產(chǎn)道感染,,所致疾病,,88,,（三）微生物學檢查法,標本,用無菌棉拭沾取,直接涂片鏡檢,在中性粒細胞內(nèi)發(fā)現(xiàn)有革蘭陰性雙球菌時，有診斷價值,分離培養(yǎng)與鑒定,標本采集后應注意保暖保濕，立即送檢接種,泌尿生殖道膿性分泌物子宮頸口表面分泌物,巧克力色平板，510CO2氣體,89,（四）防治原則,,防,開展防治性病的知識教育,防止不正當?shù)膬尚躁P系,,治,新生兒1硝酸銀滴眼。,,,,抗生素。參考體外藥敏試驗。對青霉素、頭孢胺噻肟鈉、環(huán)丙沙星、壯觀霉素等多種抗生素敏感，近年報告耐藥菌株增多。,,90,PURULENTCONJUNCTIVITISOPHTHALMIANEONATORUMINFECTIONINNEWBORNSDURINGVAGINALDELIVERY,91,第五節(jié)假單胞菌屬PSEUDOMONAS,,92,,一類G桿菌，種類繁多，其中銅綠假單胞菌是一種常見的條件致病菌，也是院內(nèi)感染常見菌。因在生長過程中產(chǎn)生綠色水溶性色素，感染后的膿汁或敷料上出現(xiàn)綠色，故俗稱綠膿桿菌。,93,直或微彎G－桿菌，有莢膜，單端有1～3根鞭毛，運動活潑。,革蘭染色,熒光染色,電鏡圖,形態(tài)特征,94,需氧，4℃不生長，42℃生長?？僧a(chǎn)生帶熒光的綠色水溶性色素，有溶血環(huán)。,血平板上細菌生長,普通培養(yǎng)基上細菌生長,培養(yǎng)特性,95,臨床表現(xiàn),多見于皮膚粘膜受損部位（燒傷和創(chuàng)傷等）與機體免疫力下降病人，表現(xiàn)為局部化膿性炎癥和全身感染。引起中耳炎、角膜炎、尿道炎、胃腸炎、心內(nèi)膜炎、膿胸，也可引起菌血癥、敗血癥及引起嬰兒嚴重的流行性腹瀉。醫(yī)源性感染。,96,本章主要內(nèi)容小結,葡萄球菌和鏈球菌的生物學性狀、致病性、微生物學檢查方法。致病性葡萄球菌的鑒別要點、抗O試驗。其它球菌主要的生物學特點、致病性。,

簡介：,第三章病毒和亞病毒,第三章病毒與亞病毒,第一節(jié)病毒第二節(jié)亞病毒第三節(jié)病毒與實踐,第一節(jié)病毒,概述病毒的形態(tài)和結構病毒的復制病毒的溶原性病毒對理化因素抵抗力,一、病毒的特點和定義,第一節(jié)概述,1、特點,1）不具有細胞結構，具有一般化學大分子的特征。,2）一種病毒的毒粒內(nèi)只含有一種核酸，DNA或者RNA。,3）大部分病毒沒有酶或酶系極不完全，不含催化能量代謝的酶，不能進行獨立的代謝作用。,4）嚴格的活細胞內(nèi)寄生，沒有自身的核糖體，沒有個體生長，也不進行二均分裂，必須依賴宿主細胞進行自身的核酸復制，形成子代。,5）個體微小，在電子顯微鏡下才能看見。,6）對大多數(shù)抗生素不敏感，對干擾素敏感。,例如一些簡單的病毒僅由核酸和蛋白質(zhì)外殼（COAT）構成，故可把它們視為核蛋白分子。,朊病毒甚至僅由蛋白質(zhì)構成,病毒感染敏感宿主細胞后，病毒核酸進入細胞，通過其復制與表達產(chǎn)生子代病毒基因組和新的蛋白質(zhì)，然后由這些新合成的病毒組分裝配（ASSEMBLY）成子代毒粒，并以一定方式釋放到細胞外。病毒的這種特殊繁殖方式稱做復制（REPLICATION）。,第一節(jié)概述,1、特點,一、病毒的特點和定義,病毒是一類既具有化學大分子屬性，又具有生物體基本特征；既具有細胞外的感染性顆粒形式，又具有細胞內(nèi)的繁殖性基因形式的獨特生物類群。,,超顯微的、沒有細胞結構的、專性活細胞內(nèi)寄生的實體,第一節(jié)概述,1、特點,一、病毒的特點和定義,單細胞微生物與病毒性質(zhì)的比較,ADNA病毒和RNA病毒中的一部分B利福平可抑制痘病毒復制,第一節(jié)概述,2、定義,一、病毒的特點和定義,迄今仍無一個科學而嚴謹?shù)亩x,病毒為具有獨立于其宿主的進化史的絕對細胞內(nèi)寄生物，它的DNA或RNA基因組被其所編碼的蛋白質(zhì)殼體化（ENCAPSIDATION）。（FIELDS等，1990年）,非細胞生物,,（真）病毒至少含核酸和蛋白質(zhì)二種組分,亞病毒SUBVIRUS,,類病毒（VIROID只含具侵染性的RNA組分擬病毒（VIRUSOID只含有不具侵染性的RNA組分朊病毒（PRION只含蛋白質(zhì),,二病毒的宿主范圍,第一節(jié)概述,病毒幾乎可以感染所有的細胞生物，并具有宿主特異性,,,噬菌體（PHAGE）、植物病毒（PLANTVIRUSES）動物病毒（ANIMALVIRUSES）,三、病毒的培養(yǎng)和純化,第一節(jié)概述,同微生物學其他學科分支一樣，病毒學的進步完全得益于研究方法和技術手段的發(fā)展。,通過病毒的分離與純化獲得純化的、有感染性的病毒制備物是病毒學研究和實踐的基本技術。,1、病毒的培養(yǎng),病毒的培養(yǎng)二元培養(yǎng)物法,四、病毒的培養(yǎng)和純化,1、病毒的培養(yǎng),噬菌體,,細菌培養(yǎng)物,,培養(yǎng)液,營養(yǎng)瓊脂平板,,細菌培養(yǎng)液變清亮,細菌平板成為殘跡平板,,若是噬菌體標本經(jīng)過適當稀釋再接種細菌平板，經(jīng)過一定時間培養(yǎng)，在細菌菌苔上可形成圓形局部透明區(qū)域，即噬斑（PLAGUE）。,MICROBIOLOGY,雙層平板法,優(yōu)點①彌補玻璃皿底面不平的缺陷②所形成全部噬菌體斑都接近處于同一平面上③形成的噬菌斑較大，更有利于計數(shù),MICROBIOLOGY,噬菌斑,四、病毒的培養(yǎng)和純化,1、病毒的培養(yǎng),動物病毒,,,實驗動物,雞胚,多種細胞培養(yǎng),四、病毒的培養(yǎng)和純化,1、病毒的培養(yǎng),植物病毒,,敏感植物葉片,,產(chǎn)生壞死斑，或稱枯斑,蛋白質(zhì)提純方法（鹽析、等電點沉淀、有機溶劑沉淀、凝膠層析、離子交換等）,四、病毒的培養(yǎng)和純化,2、病毒純化,標準,,純化的病毒制備物應保持其感染性,病毒是有感染性的生物體,,病毒具有化學大分子的屬性,,純化的病毒制備物的理化性質(zhì)應具有均一性,方法,,主要化學組成為蛋白質(zhì),,具有一定的大小、形狀和密度,,,差速離心,梯度離心（超速離心）,第二節(jié)毒粒的性質(zhì),病毒是一類既具有化學大分子屬性，又具有生物體基本特征；既具有細胞外的感染性顆粒形式，又具有細胞內(nèi)的繁殖性基因形式的獨特生物類群。,毒粒（病毒顆粒）病毒的細胞外顆粒形式，也是病毒的感染性形式。,一團能夠自主復制的遺傳物質(zhì),保護遺傳物質(zhì)免遭環(huán)境破壞，并作為將遺傳物質(zhì)從一個宿主細胞傳遞給另一個宿主細胞的載體。,蛋白質(zhì)外殼,包膜,,,,第二節(jié)毒粒的性質(zhì),一、毒粒的形態(tài)結構,1、病毒的大小和形狀,個體小，必需在電鏡下觀察；,不同病毒的毒粒大小差別很大；,毒粒的形狀動物病毒有球狀、卵圓狀、磚形植物病毒有桿狀、絲狀、球狀噬菌體有蝌蚪狀和絲狀,,,,采用各種電鏡技術觀察毒粒的形態(tài)結構,ORFVIRUS口瘡病毒接觸性膿皰皮炎病毒（負染技術）,EBOLAVIRUS埃博拉病毒（正染技術）,VACCINIAVIRUS痘苗病毒（投影技術）,甲型H1N1型流感病毒,SARS病毒,第二節(jié)毒粒的性質(zhì),毒粒的化學組成,毒粒（化學組成）,,核酸；蛋白質(zhì)；脂類；碳水化合物；,,基本化學組成,,病毒顆粒在化學上表現(xiàn)為核蛋白,二、毒粒的化學組成,1、病毒的核酸,核酸是病毒的遺傳物質(zhì)；一種病毒的毒粒只含有一種核酸DNA或是RNA；,病毒核酸,,單鏈DNA（SSDNA，SINGLESTRANDEDDNA）；雙鏈DNA（DSDNA）；單鏈RNA（SSRNA）；雙鏈RNA（DSRNA）；,二、毒粒的化學組成,2、病毒的蛋白質(zhì),病毒蛋白質(zhì),,結構蛋白,非結構蛋白,病毒基因組編碼的，在病毒復制過程中產(chǎn)生并具有一定功能，但并不結合于毒粒中的蛋白質(zhì)。,構成一個形態(tài)成熟的有感染性的病毒顆粒所必需的蛋白質(zhì),,,殼體蛋白；包膜蛋白；存在于毒粒中的酶；,二、毒粒的化學組成,2、病毒的蛋白質(zhì),病毒結構蛋白的主要生理功能,1）構成蛋白質(zhì)外殼，保護病毒核酸免受核酸酶及其它理化因子的破壞；,2）決定病毒感染的特異性，與易感細胞表面存在的受體具特異性親和力，促使病毒粒子的吸附和入侵；,3）決定病毒的抗原性，能刺激機體產(chǎn)生相應的抗體；,4）構成毒粒酶，或參與病毒對宿主細胞的入侵（如T4噬菌體的溶菌酶等），或參與病毒復制過程中所需要病毒大分子的合成（如逆轉錄酶等）；,一般來說，病毒是不具酶或酶系極不完全的，所以一旦離開宿主就不能獨立進行代謝和繁殖。,第二節(jié)病毒的性質(zhì),2、病毒的殼體結構,殼體或衣殼（CAPSID）,包圍著病毒核酸的蛋白質(zhì)外殼，由蛋白質(zhì)亞基按對稱的形式、有規(guī)律地排列而成，是病毒毒粒的基本結構。,殼體結構類型,,螺旋對稱殼體二十面體對稱殼體復合對稱結構,螺旋對稱殼體亞基有規(guī)律地沿著中心軸（核酸）呈螺旋排列，進而形成高度有序、對稱的穩(wěn)定結構。,二十面體對稱殼體構成對稱結構殼體的第二種方式是蛋白質(zhì)亞基圍繞具立方對稱的正多面體的角或邊排列，進而形成一個封閉的蛋白質(zhì)的鞘。,具有復合對稱結構的典型例子是有尾噬菌體（TAILEDPHAGE）,其殼體由頭部和尾部組成。包裝有病毒核酸的頭部通常呈二十面體對稱，尾部呈螺旋對稱。,一、病毒的形態(tài)結構,3、病毒的包膜結構,病毒包膜的基本結構與生物膜相似，是脂雙層膜。在包膜形成時，細胞膜蛋白被病毒的包糖蛋白取代。刺突（SPIKE）包膜或核衣殼上的突起。,第二節(jié)病毒的性質(zhì),一、病毒的形態(tài)結構,3、病毒的包膜結構,病毒的蛋白質(zhì)殼體和病毒核酸（核心）構成的復合物，又稱核衣殼。,核殼（NUCLEOCAPSID）,僅由核衣殼構成的病毒顆粒,裸露毒粒（NAKEDVIRION）,如煙草花葉病毒、脊髓灰質(zhì)炎病毒（POLIOVIRUS）等一些簡單的病毒的毒粒。,包膜（ENVELOPE）,有些病毒核衣殼包裹著的一層脂蛋白膜，它是病毒以出芽（BUDDING）方式成熟時，由細胞膜衍生而來的。有維系毒粒結構，保護病毒核殼的作用。特別是病毒的包膜糖蛋白，具有多種生物學活性，是啟動病毒感染所必需的。,有包膜的病毒,,第二節(jié)病毒的性質(zhì),一、病毒的形態(tài)結構,4、病毒的結構類型,四種主要結構類型,,裸露的二十面體；裸露的螺旋；有包膜的二十面體；有包膜的螺旋；,有些病毒，如有尾噬菌體、痘病毒等結構更為復雜，不能包括在這些結構類型之內(nèi)。,不同病毒的毒粒結構復雜程度有很大的區(qū)別,3、三類典型形態(tài)的病毒及其代表,二十面體對稱的代表腺病毒,復合對稱的代表T偶數(shù)噬菌體,螺旋對稱的代表煙草花葉病毒TMV,（1）螺旋對稱的代表煙草花葉病毒TOBACOMOSAICVIRUS,TMV,,,有三種類型纖維狀、直桿狀和彎曲桿狀。衣殼形似一中空柱，內(nèi)包核酸，衣殼粒和核酸呈螺旋對稱形排列。由95％衣殼PR和5％SSRNA組成。蛋白質(zhì)衣殼由衣殼粒（2130個）一個緊挨一個地呈螺旋排列而成，SSRNA位于衣殼內(nèi)側螺旋狀溝中。,（2）二十面體對稱的代表－腺病毒ADENOVIRUS,具有20個面，30條邊和12個頂角。核衣殼由不同數(shù)量的衣殼粒按一定方式排列成對稱體。腺病毒粒子共由252個球形的衣殼粒排列成一個具有廿面的對稱體，線狀DSDNA。噬菌體X174只有12個衣殼粒，最大的廿面體是由1，472個衣殼粒組成的昆蟲病毒粒子。,絕大多數(shù)噬菌體為蝌蚪形，現(xiàn)以ECOLIT4為例，介紹蝌蚪形噬菌體的結構,大腸桿菌T4噬菌體構造,（3）復合對稱的代表－T偶數(shù)噬菌體,,,95NM,95NM,,65NM,,24環(huán),頸環(huán),,3、病毒的群體形態(tài),包涵體INCLUSIONBODY,噬菌斑PLAQUE,空斑PLAQUE,枯斑LESION,,,病毒的群體形態(tài)有,（1）包涵體（INCLUSIONBODY）,概念感染病毒的宿主細胞內(nèi)，出現(xiàn)在光學顯微鏡下可見的大小、形態(tài)、數(shù)量不等的小體，稱為包涵體。在宿主細胞內(nèi)形成包涵體是病毒的特征，不同的病毒其形成的包涵體具有不同的形態(tài)、結構、和特性。,包涵體在細胞中的形成部位位于細胞核內(nèi)如包疹病毒位于細胞質(zhì)內(nèi)如狂犬病毒等胞核內(nèi)胞質(zhì)都有麻疹病毒,包涵體（INCLUSIONBODY）,是病毒的聚集體,是病毒的合成部位,是病毒蛋白和與病毒感染有關的蛋白質(zhì),非病毒性包涵體,由化學因子或細菌感染形成,包涵體的實踐意義病毒鑒定、臨床診斷依據(jù)。,2噬菌斑PLAQUE,,噬菌斑是指在宿主細菌的菌苔上，噬菌體使菌體裂解而形成的空斑。,應用1、噬菌體定量計數(shù)2、噬菌體的鑒定,空斑和病斑,在動物細胞培養(yǎng)物上的與噬菌斑類似的空斑,稱為病斑因為受腫瘤病毒感染?？瞻吆筒“哂糜趧游锊《玖Ｗ拥挠嫈?shù)也可以采用噬菌斑法類似的技術。,枯斑植物病毒在植物葉片上形成的群體稱為枯斑。,第三節(jié)病毒的復制,病毒的特點,嚴格細胞內(nèi)寄生物，只能在活細胞內(nèi)繁殖。,毒粒,,宿主細胞,,有繁殖性的病毒基因組,,具有感染性的毒粒消失,病毒基因組復制、表達,,病毒核酸和蛋白質(zhì),裝配形成具有感染性的毒粒,,釋放至細胞外,,,,,原料；能量；生物合成場所；,,第三節(jié)病毒的復制,病毒的復制,病毒感染敏感宿主細胞后，病毒核酸進入細胞，通過其復制與表達產(chǎn)生子代病毒基因組和新的蛋白質(zhì)，然后由這些新合成的病毒組分裝配（ASSEMBLY）成子代毒粒，并以一定方式釋放到細胞外。病毒的這種特殊繁殖方式稱做復制（REPLICATION）。,第三節(jié)病毒的復制,一、病毒的復制周期,1、一步生長曲線（ONESTEPGROWTHCURVE）,1939年，MAXDELBRUCKEMORYELLIS,ECOLI/BACTERIOPAGE,1、用噬菌體的稀釋液感染高濃度的宿主細胞；2、數(shù)分鐘后，加入抗噬菌體的抗血清（中和未吸附的噬菌體）；3、將上述混合物大量稀釋，終止抗血清的作用和防止新釋放的噬菌體感染其它細胞；4、保溫培養(yǎng)并定期檢測培養(yǎng)物中的噬菌體效價（對噬菌體含量進行計數(shù)）；5、以感染時間為橫坐標，病毒的感染效價為縱坐標，繪制出病毒特征性的繁殖曲線；,該實驗標志著分子病毒學、分子生物學和分子遺傳學的建立MAXDELBRUCK因此榮獲1969年NOBELPRIZE,一、病毒的復制周期,1、一步生長曲線（ONESTEPGROWTHCURVE）,噬菌體復制（繁殖）的三個階段（吸附期）；游離的噬菌體吸附到宿主細胞1、潛伏期；從噬菌體吸附到細胞到釋放出新噬菌體的最短時期2、裂解期；隨著菌體不斷破裂，新噬菌體數(shù)目增加，直到最高值3、平穩(wěn)期；,一、病毒的復制周期,1、一步生長曲線（ONESTEPGROWTHCURVE）,,,取培養(yǎng)物直接測定病毒數(shù)量,將培養(yǎng)物過濾去細胞后測定病毒數(shù)量,將細胞裂解后測定病毒的數(shù)量。前期可將培養(yǎng)物先離心去上清以消除未吸附病毒的影響,,裂解量每個受染細胞所產(chǎn)生的子代病毒顆粒的平均數(shù)目。其值等于潛伏期受染細胞的數(shù)目除以穩(wěn)定期受染細胞所釋放的全部子代病毒數(shù)目，即等于穩(wěn)定期病毒效價與潛伏期病毒效價之比。,一、病毒的復制周期,2、隱蔽期（ECLIPSEPERIOD）,,在潛伏期的前一段，受染細胞內(nèi)檢測不到感染性病毒，后一階段，感染性病毒在受染細胞內(nèi)的數(shù)量急劇增加。自病毒在受染細胞內(nèi)消失到細胞內(nèi)出現(xiàn)新的感染性病毒的時間為為隱蔽期。,隱蔽期病毒在細胞內(nèi)存在的動力學曲線呈線性函數(shù)，而非指數(shù)關系，從而證明子代病毒顆粒是由新合成的病毒基因組與蛋白質(zhì)經(jīng)裝配成熟，而不是通過雙分裂方式產(chǎn)生的。,不同病毒的隱蔽期長短不同，例如，DNA動物病毒的隱蔽期為5～20小時，RNA動物病毒為2～10小時。,,一、病毒的復制周期,1、一步生長曲線（ONESTEPGROWTHCURVE）,一步生長曲線是研究病毒復制的一個經(jīng)典試驗，最初是為研究噬菌體的復制而建立，以后推廣到動物病毒和植物病毒的復制研究中。,以適量的病毒接種于標準培養(yǎng)的高濃度的敏感細胞，待病毒吸附后，離心除去未吸附的病毒，或以抗病毒抗血清處理病毒細胞培養(yǎng)物以建立同步感染，然后繼續(xù)培養(yǎng)并定時取樣測定培養(yǎng)物中的病毒效價，并以感染時間為橫坐標，病毒的感染效價為縱坐標，繪制出病毒特征性的繁殖曲線，即一步生長曲線。,不同病毒的潛伏期長短不同，噬菌體以分鐘計，動物病毒和植物病毒以小時或天計。,潛伏期,噬菌體的裂解量一般為幾十到上百個，植物病毒和動物病毒可達數(shù)百乃至上萬個。,裂解量,一、病毒的復制周期,3、病毒的復制周期,復制周期（REPLICATIVECIRCLE）或稱復制循環(huán),自病毒吸附于細胞開始，到子代病毒從感染細胞釋放到細胞外的病毒復制過程。,①吸附；②侵入；③增殖；（包括病毒基因組的表達與復制）④裝配（成熟）⑤釋放（裂解）；,第三節(jié)病毒的復制,二、病毒感染的起始,1、吸附,毒粒,敏感細胞,隨機碰撞而接觸（靜電引力或氫鍵）,可逆吸附，無特異性（非細胞顆粒也可吸附）,,,病毒表面蛋白與細胞受體的結合,特異性，不可逆吸附，啟動病毒感染的第一階段,二、病毒感染的起始,1、吸附,病毒吸附蛋白與細胞受體間的結合力來源于空間結構的互補性，相互間的電荷、氫鍵、疏水性相互作用及范得華力。,不同種系的細胞具有不同病毒的細胞受體，病毒受體的細胞種系特異性決定了病毒的宿主范圍。,二、病毒感染的起始,2、侵入,侵入又稱病毒內(nèi)化，它是一個病毒吸附后幾乎立即發(fā)生，依賴于能量的感染步驟。不同的病毒宿主系統(tǒng)的病毒侵入機制不同,二、病毒感染的起始,2、侵入,有尾噬菌體,注射方式將噬菌體核酸注入細胞,通過尾部刺突固著于細胞；尾部的酶水解細胞壁的肽聚糖，是細胞壁產(chǎn)生小孔；尾鞘收縮，核酸通過中空的尾管壓入胞內(nèi)，蛋白質(zhì)外殼留在胞外；,吸附,尾釘固著,尾鞘收縮,尾管穿入,DNA注入,如果大量噬菌體在短時間內(nèi)吸附于同一細胞上，使細胞壁產(chǎn)生許多小孔，也可引起細胞立即裂解，但并未進行噬菌體的增殖，這種現(xiàn)象稱為自外裂解（LYSISFROMWITHOUT）。,二、病毒感染的起始,2、侵入,植物病毒,通過因人為地或自然的機械損傷所形成的微傷口進入細胞；或者靠攜帶有病毒的媒介，主要靠是有吮吸式口器的昆蟲取食將病毒帶入細胞。,植物病毒一旦進入細胞后，增殖產(chǎn)生的子代病毒或病毒核酸可通過病毒編碼的運動蛋白（MOVEMENTPROTEIN）與胞間連絲的相互作用從受染細胞進入鄰近細胞。,二、病毒感染的起始,脫殼,脫殼是病毒侵入后，病毒的包膜和/或殼體除去而釋放出病毒核酸的過程。脫殼是病毒基因組進行功能表達所必需的感染事件。,T偶數(shù)噬菌體脫殼與侵入是一起發(fā)生的,動物病毒存在不同的結構類型和不同的侵入方式，其脫殼過程也較復雜。,第三節(jié)病毒的復制,三、增殖,病毒基因組進入胞內(nèi),,宿主細胞的代謝發(fā)生改變,,病毒利用宿主的生物合成機構和場所，使病毒核酸表達和復制，產(chǎn)生大量的病毒蛋白質(zhì)和核酸。,④成熟（裝配）,已合成的各部件進行自行裝配成新的噬菌體的過程。,T偶數(shù)噬菌體裝配過程模式圖,被感染細胞裂解，成熟的子代噬菌體轉移到外界。開始新的生活史。,,,⑤裂解（釋放）,,裂解量平均每一宿主細胞裂解后所產(chǎn)生的子代噬菌體數(shù)。,,有囊膜病毒以“出芽”方式釋放,吸附,侵入,早期病毒特異性酶的合成,病毒核酸復制,病毒結構蛋白質(zhì)合成,裝配,釋放,,病毒大分子合成,2、噬菌體效價的測定,效價（噬菌斑形成單位數(shù)、感染中心數(shù)）每ML樣品中所含有的具侵染性的噬菌體粒子數(shù)。,測定方法斑點試驗法、液體稀釋管法、單層平板法、雙層平板法、快速玻片法,,,,,,噬菌斑數(shù)試樣中噬菌體數(shù),雙層平板法,噬菌體與宿主關系,1、烈性噬菌體凡能引起宿主細胞迅速裂解的噬菌體。2、溫和性噬菌體噬菌體侵染宿主后，并不增殖，裂解，而與宿主DNA結合，隨宿主DNA復制而復制，此時細胞中找不到形態(tài)上可見的噬菌體，這種噬菌體稱為溫和性噬菌體。含有溫和性噬菌體的細菌稱為溶源性細菌LYSOGENICBACTERIA,第四節(jié)病毒的非增殖性感染,溫和噬菌體的溶源性反應,烈性噬菌體（VIRULENTPHAGE）,感染宿主細胞后能在細胞內(nèi)正常復制并最終殺死細胞，形成裂解循環(huán)（LYTICCYCLE）。,溫和噬菌體或稱溶源性噬菌體（LYSOGENICPHAGE）,感染宿主細胞后不能完成復制循環(huán)，噬菌體基因組長期存在于宿主細胞內(nèi)，沒有成熟噬菌體產(chǎn)生。,這一現(xiàn)象稱做溶源性（LYSOGENY）現(xiàn)象,在大多數(shù)情況下，溫和噬菌體的基因組都整合于宿主染色體中（如Λ噬菌體），亦有少數(shù)是以質(zhì)粒形成存在（如P1噬菌體）。,溫和性噬菌體存在狀態(tài),1）游離具感染性的VIRION；2）前噬菌體（PROPHAGE）附著或整合在宿主染色體上，一道復制；3）營養(yǎng)期噬菌體指導合成。,溫和噬菌體的溶源性反應,整合于細菌染色體或以質(zhì)粒形成存在的溫和噬菌體基因組稱做原噬菌體（PROPHAGE）,在原噬菌體階段，噬菌體的復制被抑制，宿主細胞正常地生長繁殖，而噬菌體基因組與宿主細菌染色體同步復制，并隨細胞分裂而傳遞給子代細胞。,細胞中含有以原噬菌體狀態(tài)存在的溫和噬菌體基因組的細菌稱做溶源性細菌（LYSOGENICBACTERIA）,溶源性細菌經(jīng)自發(fā)裂解或誘發(fā)裂解，進入裂解循環(huán),噬菌體的應用,噬菌體會給人類造成損失，利用微生物進行發(fā)酵的工業(yè)常深受其害。但是，由于噬菌體的某些生物學特性，使其在人類的生產(chǎn)實踐和生物學基礎理論研究中都有一定價值?？筛爬橐韵聨追矫?。,1用于鑒定未知細菌在醫(yī)學上，有些難鑒別的病原菌，利用噬菌體對宿主細胞的高度專化性的敏感性，不僅可鑒定到菌種，而且可鑒定到菌型。2用于臨床治療某些傳染性疾病。如果將噬菌體制劑與抗生素或者磺胺藥物配合應用，則效果更好。3檢驗植物病原菌利用噬菌體可以檢驗由種子攜帶的植物病原菌。4測定輻射劑量某些噬菌體如T2對輻射劑量的反應敏感而精確。5噬菌體在分子生物學研究中的作用噬菌體現(xiàn)已成為進行分子生物學研究的較為理想的重要材料。,,,（二）植物病毒,,已知的植物病毒多達700種（1989年），多數(shù)是SSRNA病毒。形態(tài)桿、絲、球狀，一般無包膜。,1619年荷蘭畫師描畫的有病郁金香的畫像。,花葉、黃化或紅化等癥狀,植株發(fā)生矮化，叢枝或畸形等,形成枯斑或壞死等癥狀,植物感染病毒后的主要癥狀,植物黃萎病,,借昆蟲刺吸式口器進入、通過傷口或嫁接進入，再通過胞間連絲或輸導組織迅速向其它部位擴散引起普遍感染。,1、“侵入”方式,,3、核酸的復制和蛋白質(zhì)的合成,2、脫殼植物病毒侵入宿主細胞后才能發(fā)生脫殼。,,增殖過程,4、裝配（成熟）,（三）人類和脊椎動物病毒,在人類與脊椎動物中廣泛寄生著相應的病毒。人類傳染病80％由病毒引起（＞300種），脊椎動物病毒＞900種，許多病毒引起人畜共患病。另一些病毒感染動物后，并不致死宿主細胞，而是引起腫瘤。,種類,DSDNA、SSDNA、DSRNA、SSRNA。衣殼外有的有包膜，有的無包膜，有的包膜上有刺突。,增殖過程,與噬菌體的增殖大致相同，可分為五個連續(xù)步驟1）吸附具高度專一性地吸附于敏感細胞表面的受體。2）侵入以胞飲、包膜溶入細胞膜、特異受體轉移等方式侵入敏感細胞內(nèi)。3）脫殼脫去衣殼和包膜。4）生物合成核酸的復制和蛋白質(zhì)的合成。5）裝配和成熟分別合成的核酸和蛋白質(zhì)組合成完整的、新的病毒粒子。6）釋放大量有侵染性的子代病毒。,多角體多數(shù)昆蟲病毒可在宿主細胞內(nèi)形成光鏡下呈多角形的包涵體。直徑一般3ΜM（05～10ΜM），堿溶性蛋白，內(nèi)包裹數(shù)目不等的病毒粒，可在細胞核或細胞質(zhì)內(nèi)形成。功能保護病毒粒免受外界不良環(huán)境的破壞。,（四）昆蟲病毒（無脊椎動物病毒）,已知昆蟲病毒1671種（1990），其中80％以上鱗翅目昆蟲的病原體。,昆蟲病毒的種類,除非包涵體病毒病毒外，可分為,核型多角體病毒NUCLEARPOLYHEDROSISVIRUS,NPV,質(zhì)型多角體病毒CYTOPLASMICPOLYHEDROSISVIRUS,CPY,顆粒體病毒GRANULOSISVIRUS,GV,,昆蟲病毒做為生物農(nóng)藥優(yōu)點,專一性高,毒力大,后效長,使用方便,對人畜安全,無公害,缺點危害經(jīng)濟動物,,,,類病毒VIROID,擬病毒VIRUSOID,朊病毒PRION,第二節(jié)亞病毒,只含核酸或蛋白質(zhì)一種成分的分子病原體。,包括,一、類病毒,只含RNA一種成分，專性活細胞內(nèi)寄生的分子病原體。是寄生于高等生物細胞中一類最小的新的病原體。SSRNA，分子量約5104DA～12104DA，為已知最小病毒分子量的十分之一左右。到目前為止，類病毒只在植物中被發(fā)現(xiàn)。類病毒對各種化學和物理因子的作用都不敏感，對熱以及紫外光和離子輻射有高度抗性。,類病毒VIROID,馬鈴薯紡錘塊莖病的病原體,長50NM棒狀RNA分子,179核苷酸180核苷酸,RNA由,組成,兩半體間有70％堿基以氫鍵方式結合共形成122個堿基對，27個內(nèi)環(huán)。,VIROIDDISEASESOFPOTATO,二、擬病毒VIRUSOIDS，類類病毒,是包裹在動植物病毒粒子中的類病毒極其微小，僅由裸露的RNA（300～400個核苷酸）或DNA組成。,輔助病毒類病毒“寄生”的真病毒。擬病毒為輔助病毒的“衛(wèi)星”，其復制必須依賴輔助病毒的協(xié)助。擬病毒也可干擾輔助病毒的復制、減輕其對宿主的病害、用于生物防治中。,,,是一類不含核酸的侵染性蛋白質(zhì)分子。小型蛋白質(zhì)顆粒，分子量33104～35104DA,約由250個氨基酸組成。能引起宿主體內(nèi)現(xiàn)成的同類蛋白質(zhì)分子發(fā)生與其相似的構象變化而使宿主致病。毒性很強，1G含朊病毒的鼠腦可感染1億只小鼠。,三、朊病毒,引起的疾病羊搔癢病、瘋牛病、瘋羊病、克雅氏病。,朊病毒侵入人體大腦的過程借食物進入消化道，再經(jīng)淋巴系統(tǒng)侵入大腦。,MICROBIOLOGY,朊病毒（PRION，VIRINO）,朊病毒有哪些特點首先，它沒有核酸，能使正常的蛋白質(zhì)由良性轉為惡性，由沒有感染性轉化為感染性；其次，它沒有病毒的形態(tài)，是纖維狀的東西；第三，它對所有殺滅病毒的物理化學因素均有抵抗力，現(xiàn)在的消毒方法都無用，只有在136℃高溫和兩個小時的高壓下才能滅活；第四，病毒潛伏期長，從感染到發(fā)病平均28年，一旦出現(xiàn)癥狀半年到一年100％死亡；第五，診斷困難，正常的人與動物細胞內(nèi)都有朊蛋白存在，不明原因作用下它的立體結構發(fā)生變化，變成有傳染性的蛋白，患者體內(nèi)不產(chǎn)生免疫反應和抗體，因此無法監(jiān)測。,與真病毒的主要區(qū)別,（1）在電鏡下，朊病毒呈淀粉樣顆粒狀，成叢排列，每叢大小和形狀不一；（2）無核酸成分；（3）無免疫原性；（4）由宿主細胞內(nèi)的基因編碼；（5）抗逆性強，能耐殺菌劑（甲醛）和高溫（120～130℃處理4H后仍具感染性）。,人的庫魯病KURU、克雅氏病CREUTZFELDTJAKOBDISEASE,CJD等,羊搔癢癥SCRAPIE,牛海綿狀腦病SPONGIFORMENCEPHALOPATHY,第三節(jié)病毒與實踐,病毒與實踐的關系極密切，由病毒引起

簡介：第七章口腔生物學實驗教程,提要口腔生物學實驗教程是針對口腔生物學理論課設計的實驗指導內(nèi)容。其教學目的是讓學生通過實驗，掌握基本的口腔生物學研究技術和方法，加深對理論課所學知識的理解，培養(yǎng)學生對口腔醫(yī)學基礎研究的興趣，了解基本的科研設計思路，啟發(fā)學生的科研思維。,內(nèi)容目錄,第一節(jié)口腔微生物學實驗實驗一菌斑的采集、染色和觀察、分類實驗二變異鏈球菌的分離和鑒定實驗三細菌代謝酸的測定實驗四細菌細胞外葡聚糖的測定實驗五菌斑中PH值的測定第二節(jié)口腔生物化學實驗實驗六齦溝液中堿性磷酸酶活性的測定實驗七唾液鈣和磷含量的測定實驗八唾液分泌情況的測定,第三節(jié)口腔疾病分子生物學實驗九以釉原蛋白基因進行性別鑒定第四節(jié)骨組織生物學和口腔細胞培養(yǎng)實驗十成骨細胞的分離培養(yǎng)實驗十一成骨細胞的分離培養(yǎng)實驗十二MTT法檢測細胞活性實驗十三腫瘤細胞遷移實驗（細胞劃痕法）,內(nèi)容目錄,第一節(jié)口腔微生物學實驗,實驗一菌斑的采集、染色和觀察、分類,實驗目的與要求掌握牙菌斑標本的采集、處理和常用染色剛果紅（CONGORED）負性染色的主要程序和方法，熟悉齦上或齦下菌斑中常見細菌的形態(tài)及分類方法。實驗內(nèi)容菌斑標本的采集；細菌涂片的制備、染色；染色細菌的觀察及LISTGARTEN分類。實驗設備和器材等用品香柏油，二甲苯，菌斑染色劑，酒精，濃鹽酸和滅菌的液狀石蠟等。無菌牙科鑷子、挖匙或探針（齦上菌斑檢查用），載玻片，滅菌取菌環(huán)可卸式取菌器或消毒濾紙（齦下菌斑采集用），含預還原轉送培養(yǎng)基的帶蓋小瓶，普通光學顯微鏡，試鏡紙，細菌接種環(huán)及裝有固體培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿等。,第一節(jié)口腔微生物學實驗,實驗方法,菌斑采集和處理,染色,觀察,分類,第一節(jié)口腔微生物學實驗,①齦溝內(nèi)采集法②牙周袋內(nèi)采集法,齦溝或牙周袋的齦下菌斑采集法,第一節(jié)口腔微生物學實驗,剛果紅負性染色方法,LISTGARTEN的分類標準,球菌菌細胞直徑05ΜM～10ΜM，包括少量球桿菌；直桿菌菌細胞寬05ΜM～15ΜM，長10ΜM～19ΜM，包括部分分支桿菌；絲狀菌菌細胞寬05ΜM～15ΜM，長與寬之比大于6∶1，菌細胞多為不規(guī)則的長絲狀桿菌；梭狀菌菌細胞直徑03ΜM～10ΜM，長約10ΜM，其末端呈梭狀；彎曲桿菌菌細胞呈新月形或彎曲狀；螺旋體菌細胞寬02ΜM～05ΜM，長約10ΜM～20ΜM，螺旋形，包括大、中、小三種螺旋體。,第一節(jié)口腔微生物學實驗,實驗結果與分析,注意事項1染色操作中，用濃鹽酸熏蒸涂片時要小心。2該法不能檢測細菌的活動性，但染色涂片可長期保存。思考題剛果紅負性染色有何優(yōu)點菌斑采集時應該注意什么,齦上菌斑涂片剛果紅負性染色結果,第一節(jié)口腔微生物學實驗,實驗二變異鏈球菌的分離和鑒定,實驗目的和要求通過對菌落特點和菌細胞形態(tài)及革蘭染色特征的觀察，初步掌握菌斑標本中變異鏈球菌的分離、培養(yǎng)和表型鑒定的主要程序和方法，熟悉牙菌斑中常見細菌的菌落特點、菌細胞形態(tài)及革蘭染色特點。實驗原理變異鏈球菌能發(fā)酵蔗糖等多種碳水化合物，而其他口腔鏈球菌不發(fā)酵山梨醇和甘露醇；根據(jù)其菌落形態(tài)、染色特點及耐氧情況，以其特殊的生化反應可以分離和鑒定變異鏈球菌。實驗內(nèi)容,第二節(jié)口腔生物化學實驗,主要實驗設備和器材、試劑等厭氧培養(yǎng)裝置如簡易厭氧袋、厭氧罐、厭氧培養(yǎng)箱或厭氧手套箱均可；普通孵箱，旋渦混合器，微量振蕩器，和普通光學顯微鏡?？烧{(diào)式移液器、加樣頭，小試管，三角形推棒，接種環(huán)、酒精燈，載玻片，無菌棉簽，96孔反應板，EP管；口腔檢查用口鏡，鑷子，檢查盤，無菌紗球，無菌探針和齦上鋤形潔治器。革蘭染色試劑，系列生化基質(zhì)和指示劑（包括甘露醇、山梨醇、菊糖、精氨酸試劑、七葉苷水解試劑）。變異鏈球菌ATCC25175懸液。MS瓊脂、BHI瓊脂培養(yǎng)基、巰基乙醇酸鹽轉送液，02MOL/L、PH70～的無菌磷酸鹽緩沖液PBS等。,第一節(jié)口腔微生物學實驗,實驗方法變異鏈球菌群細菌的分離和表型鑒定,菌斑標本,接種到MS或TS瓊脂上,微氧孵育（37℃、5～10CO248小時）或厭氧孵育（37℃48小時、90N210CO2或80N210CO210H2）,菌落、菌細胞形態(tài)檢查,生化鑒定,確定菌種,,,,,,,次代培養(yǎng)純化、富集,分散、稀釋,置轉送液中運送,第一節(jié)口腔微生物學實驗,革蘭染色步驟,細菌涂片加熱固定,加革蘭（堿性結晶紫）甲液、乙液各一滴，混勻后初染30秒,革蘭碘液媒染30秒,丙酮乙醇混合脫色劑脫色5～10秒,石炭酸復紅復染5秒,干燥后1000倍顯微鏡油鏡下觀察,水洗,,,,,,水洗,水洗,水洗,第一節(jié)口腔微生物學實驗,表型鑒定（1）菌落特征觀察,初代培養(yǎng)的菌落觀察要點形態(tài)如水滴狀、圓形、絲狀、不規(guī)則狀、根狀、梭形等。大小菌落直徑一般以MM計，注意大小的一致性。厚薄扁平、丘狀、凸、半球狀、瘤狀中央凸。顏色無色、白、黃、紅、綠、黑或棕色。邊緣如整齊、鋸齒狀、波狀等。透明度透明、半透明、不透明。菌落型光滑、粗糙、黏液樣。溶血型Α、Β、Γ（限血平板）。,實驗結果及結果評價,在5～10CO2、90～95的N2，或80N2、10CO2和10H2的大氣環(huán)境下37℃孵育48小時,第一節(jié)口腔微生物學實驗,表型鑒定（2）菌細胞形態(tài)和染色特征觀察,菌細胞形態(tài)球形、桿形、球桿形、彎曲狀、梭狀、菌細胞末端形狀、細胞內(nèi)有無顆粒、腫脹等。革蘭染色特征陽性、陰性染色,染色均勻性。,實驗結果及結果評價,第一節(jié)口腔微生物學實驗,生化鑒定,革蘭染色鑒定次代培養(yǎng)為純培養(yǎng)后，收集瓊脂表面的菌苔，用PBS稀釋成2109/ML菌量,取待測的細菌懸液100ΜL，加入10個反應板微孔中,分別加入100ΜL不同的生化基質(zhì)，各加2孔,同時加PBS為陰性對照，加變異鏈球菌ATCC25175為陽性對照,振搖混合30秒后，37℃孵育4小時24小時,取出反應板，加入指示劑，觀察記錄結果,,,,,,實驗結果及結果評價,第一節(jié)口腔微生物學實驗,生化鑒定反應板微量快速生化實驗名稱、試劑及結果,第一節(jié)口腔微生物學實驗,反應板微量快速生化實驗利用細菌產(chǎn)生的預成酶（胞外酶），在37℃普通孵箱中與生化試劑基質(zhì)產(chǎn)生特異的酶反應，通過各種指示劑或特殊的顯色產(chǎn)物即可在4小時～24小時觀察到結果。反應板微量快速生化實驗的生化鑒定系統(tǒng)包括30個生化實驗基質(zhì)與相關指示劑、磷酸鹽緩沖液（PBS）、細菌標準濁度管以及8個鑒定系列,可根據(jù)細菌的形態(tài)、染色性及耐氧實驗結果選擇不同的系列生化基質(zhì)進行鑒定。這8個鑒定系列是①革蘭陽性厭氧球菌②革蘭陰性厭氧球菌③革蘭陽性無芽胞厭氧桿菌④革蘭陰性無芽胞厭氧桿菌A不產(chǎn)黑色素的革蘭陰性厭氧短桿菌；B產(chǎn)黑色素的革蘭陰性厭氧短桿菌；C革蘭陰性厭氧梭狀或長桿菌⑤革蘭陰性彎曲菌⑥梭菌屬⑦變異鏈球菌和其他口腔鏈球菌⑧微需氧的革蘭陰性厭氧桿菌,第一節(jié)口腔微生物學實驗,菌種鑒定變異鏈球菌群細菌的鑒別,第一節(jié)口腔微生物學實驗,實驗注意事項,要設陽性和陰性對照。細菌濃度對實驗結果的影響濃度低可導致假陰性結果，最佳的細菌濃度為211010/ML～241010/ML,如菌濃度略低可適當延長酶反應時間。酶反應時間與菌種的關系酶反應時間因不同菌種有所差異，以4小時～24小時為宜。待測標本放置時間以新鮮的放置24小時～48小時培養(yǎng)物為宜。如標本不能立即做生化實驗，可將其放置在4℃冰箱內(nèi)，時間最好不超過96小時。預成酶微量生化實驗所用細菌應來自不加血的非選擇培養(yǎng)基，以避免產(chǎn)生假陽性結果。,實驗報告變異鏈球菌的分離與鑒定。思考題變異鏈球菌的菌細胞形態(tài)特征、菌落特征、耐氧特征和生化反應特征主要有哪些,第一節(jié)口腔微生物學實驗,實驗三細菌代謝酸的測定,實驗目的與要求學習用色譜技術定性和定量檢測分析細菌代謝脂肪酸的基本方法。實驗原理各種脂肪酸在色譜柱（固定相）及流動相中的分配系數(shù)、吸附能力不同，導致它們在柱中的保留時間有所差異。同種酸停留時間相同；峰面積與含量正相關。實驗內(nèi)容1液體純培養(yǎng)增菌。2色譜層析技術測定細菌培養(yǎng)液中短鏈脂肪酸的種類及相對含量。實驗主要設備、器材等色譜儀，細菌培養(yǎng)箱，離心機，PH計，三角燒瓶，接種環(huán)，移液器，微量注射器和EP管等。,第一節(jié)口腔微生物學實驗,實驗方法,樣品制備,色譜層析,第一節(jié)口腔微生物學實驗,實驗結果分析結果計算培養(yǎng)液中各組分保留時間與標準酸圖譜比較定性，按下式計算C有機酸,注意事項實驗前要用流動相平衡分析柱；注意溫度對分析結果有影響。,實驗報告與評定細菌代謝酸測定。思考題色譜層析實驗中哪些方面非常重要細菌代謝酸的測定除了采用色譜層析技術以外，還可以用哪些方法測定,AREA有機酸,AREA標準C標準,第一節(jié)口腔微生物學實驗,實驗四細菌細胞外葡聚糖的測定,實驗目的與要求變異鏈球菌可以產(chǎn)生葡糖基轉移酶，綜合蔗糖產(chǎn)生細胞外多糖即水溶性或不溶水葡聚糖。通過實驗要掌握用比色法測定葡聚糖含量的方法和原理。實驗原理糖在強酸溶液中加熱，脫水生成羥醛，再變成呋喃衍生物。此衍生物可以與各種試劑反應生成有色物質(zhì)，然后用分光光度計測得密度值，進而計算出糖的含量。以蒽酮法為例,其可與單糖、雙糖、糊精和淀粉反應生成有色化合物，在一定的濃度范圍內(nèi)，測得的葡聚糖含量與光密度值成正比。實驗內(nèi)容蒽酮法測定變異鏈球菌培養(yǎng)液中細胞外葡聚糖的含量。,第一節(jié)口腔微生物學實驗,實驗主要設備和器材蒽酮試劑稱取200MG蒽酮溶解于100ML濃硫酸中攪拌溶解。4℃冰箱可保存2～3周。葡聚糖標準儲存液稱取10G葡聚糖，溶于100ML水中制成儲存液。使用時吸取10ML稀釋至100ML，儲存于4℃冰箱中。分光光度計，離心機，10ML試管，恒溫水浴箱，水浴鍋及吸管，移液器，氫氧化鈉等。,第一節(jié)口腔微生物學實驗,實驗方法,樣品處理將水溶性和非水溶性多糖分開測定，即,測定將水溶性和非水溶性多糖分開測定，即,1標準曲線按下表配制標準液。攪拌3分鐘后放入95℃水浴中加熱6分鐘，冷卻，用分光光度計測量波長625NM的光密度值，繪制標準曲線。,2樣品測定取樣品10ML質(zhì)量濃度在20ΜG/L～40ΜG/L為宜，加蒽酮試劑3ML，95℃水浴煮沸6分鐘，冷卻后測其625NM處的OD值，根據(jù)標準曲線及稀釋倍數(shù)計算樣品中葡聚糖的含量。,注意事項配置標準液時應在15℃水浴中加入蒽酮。實驗報告評定細菌細胞外葡聚糖的測定。思考題細菌細胞外多糖有幾種如何分別檢測這些細菌細胞外多糖,第一節(jié)口腔微生物學實驗,實驗五菌斑中PH值的測定,實驗目的與要求菌斑PH的測定可分為兩大類，即活體測定與離體測定。電極接觸法TOUCHPHELECTRODEMETHOD活體測定埋藏電極遙測法INTRAORALORINDWELLINGPHELECTRODESYSTEMS離體測定如人工菌斑法,實驗內(nèi)容1電極接觸法是活體菌斑PH檢測法，即將手持的微電極置于原位的菌斑表面來測定菌斑的PH。2埋藏電極遙測法是體內(nèi)檢測方法。3人工菌斑法人工菌斑法是先建立人工菌斑模型，然后用未刺激和刺激的唾液同菌斑作用，同時電極測定PH變化。實驗主要設備和器材微電極，吸液用注射器，PH計，隔濕用消毒棉球等。,,,第一節(jié)口腔微生物學實驗,1電極接觸法是活體菌斑PH檢測法，即手持微電極測定菌斑PH的方法。（1）用注射器吸取1ML標準PH溶液，滴入電極敏感端部位，校正PH計。（2）受試者2天不漱口刷牙，測試前2小時不進食。（3）用棉卷隔濕并用氣槍吹干測試部位。（4）測定“靜態(tài)”PH手持微電極置于原位的菌斑表面，待離子計數(shù)穩(wěn)定時記錄PH值。每一時間點測試受試者同一顆牙的上下左右4個位點，取其平均值即為菌斑原位PH值，且4個位點在1分鐘內(nèi)完成測試。（5）測定動態(tài)PH受試者可先測定靜態(tài)PH值；再讓受試者進食不同的食物，在一定的時間間隔中測定動態(tài)PH；也可分別測定齲齒敏感部及鄰牙界面的PH。（6）測試操作①測定時，將微型玻璃電極或銻電極直接插入要測的牙菌斑中；②參比電極通過飽和氯化鉀鹽橋與受檢者身體相連，多放在前臂或口底；③PH計也可連接自動描繪裝置，將測到的PH直接繪制成圖。,第一節(jié)口腔微生物學實驗,2埋藏電極遙測法是菌斑PH的體內(nèi)檢測方法。（1）用注射器吸取1ML標準PH溶液滴入電極敏感端部，校正PH計。（2）將一個微型玻璃電極埋入離體的釉質(zhì)小塊中。（3）用棉卷隔濕并用氣槍吹干測試區(qū)域。（4）將埋入釉質(zhì)小塊中的微型玻璃電極放入局部義齒中，戴入受檢者口腔內(nèi)缺牙的部位，讓電極的敏感面向著基牙的鄰面和咬合面。也可在電極的后方接一個微型的場效應晶體管，以增加傳導速度，提高敏感性，減少干擾。（5）參比電極的接法一般與接觸法相同，或者也埋入義齒中，以細導線與口外連接。（6）根據(jù)實驗要求觀察菌斑在電極頭的聚集和PH變化情況。（7）電極敏感端的菌斑可以確定為類似于鄰面或窩溝部位的牙菌斑。,第一節(jié)口腔微生物學實驗,3人工菌斑法是先建立人工菌斑模型，然后用未刺激和刺激的唾液同菌斑作用，同時用電極測定PH變化。在整個測試過程中，人工唾液均處于流動狀態(tài)，且流速可變。,實驗報告評定菌斑中PH值的測定。思考題三種測試PH的方法各有何優(yōu)缺點,注意事項菌斑中PH值受多方面因素的影響，如口腔環(huán)境、唾液、飲食的酸堿度以及口腔清潔情況等，因此測定時要做好隔濕防護。,第一節(jié)口腔微生物學實驗,第二節(jié)口腔生物化學實驗,實驗目的與要求牙周炎處齦溝液中該酶的活性變化與牙周袋探診深度和炎癥程度明顯正相關，與牙周炎破壞和牙周組織狀況相關。通過實習要求掌握齦溝液中ALP的基本檢測方法。實驗原理ELISA法定量測定ALP,實驗內(nèi)容1齦溝液樣品采集與制備；2ELISA法測定ALP的染色操作；3酶標儀測定吸光度值，確定ALP的相對含量。,實驗六齦溝液中堿性磷酸酶活性的測定,第二節(jié)口腔生物化學實驗,齦溝液采集,洗提,ELISA法檢測ALP,酶標儀測定OD450NM值,,,,實驗方法,主要實驗設備和器材,第二節(jié)口腔生物化學實驗,注意事項齦溝液的量少，易受多種因素影響，采集時動作要輕柔，排除全身影響因素（如生理周期、性激素等）和局部刺激因素，并注意防止污染。每次實驗留一孔作為空白調(diào)零孔不同于空白孔，測量時先用此孔調(diào)OD值至零。嚴格按規(guī)定的時間和溫度進行孵育。所有試劑必須在用前恢復至室溫；用后應立即冷藏。洗板很重要，在加入檢測溶液B或底物前要盡量吸干孔內(nèi)液體，勿將濾紙直接放入反應孔中吸水。實驗時酶標板加蓋或覆膜，以避免液體蒸發(fā)；洗板后應盡快進行下步操作，避免酶標板長時間處于干燥狀態(tài)。,第二節(jié)口腔生物化學實驗,注意事項操作時要帶手套，板底勿殘留的液體和手指印，否則影響OD值的準確性。在儲存和孵育時要避免強光直接照射，底物避光保存，在儲存和溫育時避免強光直接照射。未用完的酶標板或試劑務必于2℃～8℃保存，避免不準確稀釋而造成的濃度誤差；檢測液及底物溶液要在用前配制，且應37℃溫育30分鐘。加樣或加試劑時，應注意減少時間間隔，以保證準確性及重復性。一次加樣時間包括標準品及所有樣品最好控制在10分鐘以內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用多道移液器加樣。建議檢測樣品時均設雙孔測定，以保證檢測結果的準確性。,第二節(jié)口腔生物化學實驗,實驗結果及分析根據(jù)齦溝液中ALP含量檢測的OD值結果、空白對照等，分析實驗結果。思考題哪些因素能影響齦溝液中堿性磷酸酶的含量測定,第二節(jié)口腔生物化學實驗,實驗七（1）唾液鈣含量的測定,目的和要求了解分光光度法的定量原理，熟悉減少實驗誤差、提高準確度的方法和操作技術，掌握利用市售試劑盒測定唾液中鈣濃度的原理和方法。,實驗原理,實驗主要用品和設備,第二節(jié)口腔生物化學實驗,實驗方法1唾液收集及處理收集非刺激性唾液約05ML，3000R/MIN離心10MIN，取上清液備測。2分光光度計測定準備三組EP管，按下表順序分別加入試劑3各管在振蕩器上混勻，以空白管校正零點，在分光光度計上測定612NM波長下的OD值，按下式計算含量樣品中鈣的濃度（MMOL/L樣品管光密度/標準管光密度25,第二節(jié)口腔生物化學實驗,思考題試分析誤差產(chǎn)生的原因含量計算的方法有哪些,注意事項為保證測試結果的可靠性，所有實驗器皿一定要清洗干凈且用三蒸水多次沖洗、烤干后待用。也可在試劑中加入少量的EDTA作掩蔽劑，消除實驗器皿和試劑中的鈣污染，在試劑中加入8羥基喹嚀以去除鎂的干擾。為避免玻璃中的鈣離子溶出，鈣標準貯存液用塑料瓶保存。為提高分析結果的準確度，減少偶然誤差，應增加平行測定次數(shù)。本實驗所測結果為唾液中總鈣濃度。,第二節(jié)口腔生物化學實驗,實驗七（2）唾液中磷含量測定,目的和要求了解分光光度法的定量原理，熟悉減少實驗誤差、提高準確度的方法和操作技術，掌握比色法測定唾液中磷含量的原理和方法。,實驗原理,實驗內(nèi)容1收集口腔唾液；2測定唾液中總鈣含量。實驗設備和用品,硫酸,還原,第二節(jié)口腔生物化學實驗,實驗方法和步驟,1標本收集及處理收集非刺激性唾液05ML，取02ML，加10三氯醋酸38ML，充分混勻，放置10MIN，3000R/MIN離心10MIN，取上清液備測。2測定準備三組EP管，按表74順序分別加入試劑,3結果計算C唾液（MG/ML）A樣品/A標準C標準A樣品/A標準0005MG/ML,第二節(jié)口腔生物化學實驗,注意事項為了保證測試結果的可靠性，所有實驗器皿一定要清洗干凈且用三蒸水多次沖洗，烤干后待用。為了避免玻璃中的磷離子溶出，磷標準貯存液用塑料瓶保存。為了提高分析結果的準確度，減少偶然誤差，應增加平行測定次數(shù)。本實驗所測結果為唾液中總磷濃度。,思考題1唾液中磷含量測定誤差的種類有哪些2含量計算的方法有哪些,第二節(jié)口腔生物化學實驗,實驗八唾液分泌情況的測定,實驗目的與要求唾液分泌量及成分的測定對一些疾病診治效果的評估有重要意義。通過實習要求掌握靜態(tài)流率和靜態(tài)流率的測量意義和方法，掌握單個腺體分泌測定的方法，為將來臨床研究奠定基礎。實驗內(nèi)容1靜態(tài)唾液總流率的測定；2動態(tài)唾液總流率的測定；3單個腺體唾液分泌的測定。材料、用品及設備消毒的帶漏斗試管和普通試管，無菌棉球或棉墊，天平，色層分析紙，LASHLEY杯，01MOL/L枸櫞酸或1G膠姆，或方糖等。,第二節(jié)口腔生物化學實驗,實驗方法1靜態(tài)唾液總流率測定常用測定方法包括吸取法DRAINING手持帶漏斗的試管，使唾液沿下唇逐漸流入試管，至結束時，受試者將口內(nèi)剩余唾液全部吐入試管。通常收取15分鐘，計算單位時間的唾液量。吐取法SPITTING使唾液在口底聚集，受試者每隔60秒將其吐入試管，一般收集10分鐘，低于1ML/10MIN為異常減低。吸引法SUCTION用負壓吸引器將唾液自口底持續(xù)吸入試管，吸引頭置于舌下。棉墊法SWAB將每個約024CM06CM的棉墊預先稱重，置于口內(nèi)各唾液腺導管開口處，收集后稱重。吐取法及吸取法相對常用，操作簡便，還可用于動態(tài)唾液總流率的測定。而吸引法和棉墊法會產(chǎn)生一定刺激，操作相對復雜，目前多不使用。,第二節(jié)口腔生物化學實驗,實驗方法2動態(tài)唾液總流率測定常用測定方法包括酸刺激法將01MOL/L枸櫞酸滴于舌背前部，每次4滴，受試者將舌尖后卷，分泌唾液用吐取法收集一般測5分鐘～10分鐘。咀嚼刺激法將1G膠姆以每分鐘20次的頻率咀嚼10分鐘,低于10ML/10MIN為異常低下；或用5G醫(yī)用白蠟，溫水泡軟后咀嚼6分鐘，低于6ML/6MIN為異常低下。方糖法取方糖15CM15CM置于舌背上，勿動，正常情況下15分鐘～30分鐘方糖全部溶化，否則認為分泌功能低下。酸刺激法可能影響唾液的緩沖容量和PH等。,第二節(jié)口腔生物化學實驗,實驗方法3動態(tài)唾液總流率測定包括腮腺、下頜下腺與舌下腺的測定。常用測定方法包括腮腺唾液分泌測定用LASHLEY杯吸附于頰黏膜的導管開口處，靜止腮腺流率變異較大，而酸刺激流率低于1ML/5MIN為異常低下。下頜下腺與舌下腺唾液分泌測定因兩腺體常共同開口于口腔，所以測定分泌時常收集在一起，常用插管法和隔離法。小唾液腺唾液分泌測定通常用色層分析紙收集，擦干局部黏膜后貼于黏膜2分鐘后，用濕度儀測其含水率。,第二節(jié)口腔生物化學實驗,實驗報告與評定靜態(tài)唾液總流率或動態(tài)唾液總流率，或單個腺體分泌情況分析。思考題靜態(tài)唾液流率測定和動態(tài)唾液流率測定應該注意些什么各應用于何種情況下,注意事項使用咀嚼法測定唾液腺分泌時不影響唾液成分，相對比較常用，但要注意保持恒定的咀嚼頻率。單個腺體唾液收集方法較復雜，且不能反映所有唾液腺總的分泌狀況，在評價整個唾液腺功能時有局限性，不過在測定唾液成分時因污染少而多采用此方法。,第二節(jié)口腔生物化學實驗,第三節(jié)口腔疾病分子生物學,實驗九以釉原蛋白基因進行性別鑒定,實驗目的與要求通過此實驗學會PCR檢測技術，包括DNA提取、分光光度計的使用、引物設計的原則、PCR擴增的條件設定，以及電泳和測序結果分析等。實驗原理針對AMELOGENIN基因內(nèi)含子1區(qū)X染色體上6BP缺失的特性，采用一對X、Y同源引物擴增，男性個體同時得到X染色體AMELOGENIN等位基因特異性段簡稱AMX，106BP或212BP和Y染色體AMELOGENIN等位基因特異性片段簡稱AMY，112BP或218BP，分型結果表現(xiàn)出兩條譜帶；而女性僅有AMX106BP或212BP，分型表現(xiàn)為一條譜帶，因此鑒定性別。實驗內(nèi)容,第三節(jié)口腔疾病分子生物學,實驗設備及器材,5ML無菌試管（含肝素抗凝劑）；POWERPLEXM16SYSTEMDNA提取試劑盒，AM基因上游引物和下游引物，2TAQPCRMASTERMIX；20BPDNALADDERMARKER；DNA片段快速純化試劑盒。,實驗方法,樣品采集,采集靜脈血5ML于無菌抗凝管中,DNA提取和含量檢測,,,性別鑒定,PCR擴增、凝膠電泳、純化測序,第三節(jié)口腔疾病分子生物學,實驗方法,DNA提取和含量檢測,第三節(jié)口腔疾病分子生物學,實驗方法,性別鑒定PCR擴增、凝膠電泳、純化測序PCR擴增PCR反應引物序列如下上游引物5‘CCCTGGGCTCTGTAAAGAATAGTG3’，下游引物5‘ATCAGAGCTTAAACTGGGAAGCTG－3’；模板DNA為上述血液所獲樣品的DNA提取液。PCR反應體系為25ΜL，其中2TAQPCRMASTERMIX125ΜL，上下游引物1ΜMOL/L各1ΜL，無菌雙蒸水95ΜL，模板DNA1ΜL。PCR反應參數(shù)95℃預變性5分鐘；95℃變性30秒，60℃退火30秒，72℃延伸30秒，35個循環(huán)；72℃延伸7分鐘。凝膠電泳制備濃度為3G/L的瓊脂糖凝膠，置1TAE電泳緩沖液中，電泳條件為電壓100V，電泳時間120分鐘。電泳結果放入凝膠成像儀中進行觀察。純化測序?qū)傊悄z上的特異性條帶切下純化、回收、測序。,第三節(jié)口腔疾病分子生物學,結果分析,MMARKER；1、2陰性對照；3、5女性；4男性,實驗報告評定PCR擴增后凝膠電泳和測序結果分析評定。思考題1PCR檢測分析技術中最重要的關鍵環(huán)節(jié)有哪些2PCR實驗中容易出問題的操作有哪些應該如何避免,第三節(jié)口腔疾病分子生物學,注意事項引物引物是PCR反應的關鍵，其特異性取決于引物與模板DNA的互補程度。引物的長度最好為15BP～30BP；引物擴增跨度以200BP～500BP為宜，特定條件下可擴增長度至10KB的片段；其中GC含量以40～60為宜，ATGC最好隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列；避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結構或兩條引物間互補，特別是3’端的互補；3’端的堿基，尤其最末及倒數(shù)第二個堿基應嚴格要求配對；引物中有或最好加上合適的酶切位點，被擴增的靶序列最好有適宜的酶切位點；引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性；每條引物的濃度01ΜMOL～1ΜMOL或10PMOL～100PMOL，以最低引物量產(chǎn)生所需要的結果為好。PCR循環(huán)次數(shù)循環(huán)次數(shù)決定PCR擴增的程度。PCR循環(huán)次數(shù)主要取決于模板DNA的濃度。一般的循環(huán)次數(shù)選在30次～40次之間，循環(huán)次數(shù)越多，但非特異性產(chǎn)物的量亦隨之增多。設立對照PCR反應應設立陽性對照和陰性對照，它是PCR反應是否成功、產(chǎn)物條帶位置及大小是否合乎理論要求的一個重要參考指標。,第三節(jié)口腔疾病分子生物學,第四節(jié)骨組織生物學和口腔細胞培養(yǎng),實驗十成骨細胞的分離培養(yǎng),實驗目的與要求掌握分離、培養(yǎng)和鑒定成骨細胞方法，了解成骨細胞的功能與特性。實驗原理成骨細胞一個明顯特征是可形成礦化結節(jié)，故采用VONKOSSA染色法對成骨細胞形成的礦化結節(jié)進行鑒

簡介：動物界的主要類群,,中生動物側生動物,四、最低等的后生動物,1、具有比原生動物群體高等的形態(tài)和生理一體化水平2、具有初步的細胞分化3、具有屬于細胞水平的類組織化結構,（一）在動物演化上的意義,1、身體由2040個細胞組成，排為二層，不同于二胚層2、體長057MM，兩側對稱3、無體腔、消化腔及任何器官4、全部寄生生活，寄生于海洋無脊椎動物體內(nèi)5、50余種，分屬二個綱,（二）中生動物中生動物門,（三）側生動物海綿動物門（SPONGIA）,1、進化地位,多細胞動物進化中的一個側支,2、主要特征,水生固著生活，體形不對稱或輻射對稱身體由皮層和胃層兩層細胞構成無真正的組織及器官，無神經(jīng)系統(tǒng)細胞內(nèi)消化有特殊的水溝系有骨針或有機纖維組成的內(nèi)骨骼有性生殖或無性生殖，胚胎發(fā)育中有逆轉現(xiàn)象,3、結構和功能,1體壁結構皮層（DERMALEPITHELIUM）內(nèi)層稱為胃層又稱領細胞層（CHOANOCYTELAYAR）中膠層（MESOGLEA）2骨骼形態(tài)骨骼的形成骨骼的質(zhì)地,3水溝系統(tǒng)單溝型（ASCONTYPE）雙溝型（SYCONTYPE）復溝型（1EUCONTYPE）4生殖與胚胎發(fā)育無性生殖出芽生殖芽球（GEMMULE）有性生殖逆轉現(xiàn)象,4、海綿動物的分類鈣質(zhì)海綿綱（CALCAREA）六放海綿綱（HALICHONDRIA）尋常海綿綱（DEMOSPONGIAE）,5、經(jīng)濟意義,6、小節(jié),體制不對稱或輻射對稱，在水中營固著生活；身體由2層細胞及其之間的中膠層構成；胚胎發(fā)育中有逆轉的現(xiàn)象；具特殊的水溝系統(tǒng)；細胞沒有組織分化；通常具有鈣質(zhì)、硅質(zhì)或角質(zhì)的骨骼；沒有消化腔，只行細胞內(nèi)消化；沒有神經(jīng)系統(tǒng)；海綿動物仍然有保存了領鞭毛細胞；綜上所述海綿動物是一類極為原始的多細胞動物，是多細胞動物進化中的一個側枝。,思考題,為什么說海綿動物是最原始、最低等的多細胞動物有沒有陸生海綿動物為什么描述海綿動物的體壁結構與機能。以鈣質(zhì)海綿綱為例說明海綿動物早期胚胎發(fā)育的過程。為什么說海綿動物是多細胞動物進化中的一個側枝,五、輻射對稱的動物腔腸動物門（COELENTERATA）,１進化地位,后生動物的開始，進化的主干。多細胞動物進化主干中最為原始的類群。,２主要特征,水生，固著或飄浮生活輻射對稱笫一次出現(xiàn)胚層分化，二胚層有一個消化循環(huán)腔，有口，無肛門網(wǎng)狀神經(jīng)系統(tǒng)有刺細胞多雌雄異體,３結構和功能,⑴基本體制為輻射對稱，是腔腸動物對水中固著或漂浮生活的一種適應。某些珊瑚及櫛水母為兩輻射對稱（BIRADIALSYMMETRY），是介于輻射對稱和兩側對稱之間的一種形式。,兩種基本形態(tài),水螅型中膠層較薄，適應固著生活；水母型中膠層較厚，適應漂浮生活。,⑵身體結構體壁構成外胚層（EPIDERMIS）中膠層（MESOGLEA）內(nèi)胚層（GASTRODERMIS）,A外胚層外皮肌細胞腺細胞間細胞刺細胞神經(jīng)細胞感覺細胞B內(nèi)胚層內(nèi)皮肌細胞腺細胞感覺細胞C中膠層由以上2層共同分泌的物質(zhì)組成，主要為膠原蛋白,身體結構的特點細胞分化更為多樣六種細胞皮肌細胞、腺細胞、感覺細胞、神經(jīng)細胞、間細胞、刺細胞。有了初步的組織分化皮膚肌肉組織，神經(jīng)組織,⑶消化循環(huán)腔不完全的消化系統(tǒng)具有細胞內(nèi)消化出現(xiàn)細胞外消化,消化循環(huán)腔又稱腸腔，為胚胎發(fā)育中的原腸，具有消化和循環(huán)的雙重功能。消化循環(huán)腔內(nèi)腺細胞分泌的主要是蛋白酶，不能消化淀粉。未消化的食物殘渣由口吐出。,具有最原始的神經(jīng)系統(tǒng)網(wǎng)狀神經(jīng)系統(tǒng),神經(jīng)細胞通過神經(jīng)突起相聯(lián)絡,構成神經(jīng)網(wǎng)水螅型體沒有明顯的感官，其感覺細胞可分布全身，但觸手、口區(qū)較為豐富。水母型個體，在傘緣具有豐富的感覺細胞或感覺器官。感覺器官包括眼點及平衡囊。,⑸呼吸與排泄無專門的呼吸、排泄器官,⑹繁殖和生活史,無性生殖出芽生殖有性生殖浮浪幼蟲世代交替、多態(tài)現(xiàn)象,4主要類群腔腸動物除極少數(shù)種類為淡水生活外，絕大多數(shù)種均為海洋生活，多數(shù)在淺海，少數(shù)為深海種，現(xiàn)存種類約有11000種，分為3個綱水螅綱，缽水母綱，珊瑚綱,幾種代表動物,水螅,與人的關系經(jīng)濟價值海蜇仿生學上的意義珊瑚的骨骼,6、小節(jié),體制不對稱或輻射對稱，在水中營固著生活；身體由2層細胞及其之間的中膠層構成；胚胎發(fā)育中有逆轉的現(xiàn)象；具特殊的水溝系統(tǒng)；細胞沒有組織分化；通常具有鈣質(zhì)、硅質(zhì)或角質(zhì)的骨骼；沒有消化腔，只行細胞內(nèi)消化；沒有神經(jīng)系統(tǒng)；海綿動物仍然有保存了領鞭毛細胞；綜上所述海綿動物是一類極為原始的多細胞動物，是多細胞動物進化中的一個側枝。,7思考題,1比較腔腸動物與海綿動物異同。2如何理解腔腸動物在動物進化上占有重要的地位3本門三個綱如何鑒別依據(jù)哪些特征4何為水螅型、水母型如何區(qū)分水螅綱水母和缽水母綱水母5舉例解釋世代交替、多態(tài)。6為什么說腔腸動物出現(xiàn)了組織分化,六、三胚層無體腔動物扁形動物門（PLATYHELMINTHES）,1、進化地位,出現(xiàn)中胚層及兩側對稱的體制，是動物進化的主干和新階段,2、主要特征,身體扁平，左右兩側對稱出現(xiàn)了中胚層，具有較為完善的器官系統(tǒng)無體腔，器官之間的空隙充滿實質(zhì)組織神經(jīng)系統(tǒng)趨于集中，前端形成了腦原腎管型排泄系統(tǒng)雌雄同體，自由或寄生生活,兩側對稱的體制有何生物學意義,兩側對稱的進化意義身體分化出前后端、左右側和背腹面身體各部分功能出現(xiàn)分化運動由不定向變?yōu)槎ㄏ?，感應更準確、迅速、有效適應性更廣是水生發(fā)展到陸生的重要條件。,出現(xiàn)中胚層的生物學意義中胚層形成的實質(zhì)可儲藏水分和營養(yǎng)為器官系統(tǒng)的分化提供了必要的基礎促進了動物整體機能的進化是動物由水生到陸生的重要條件之一,（1）體壁及中胚層皮肌囊結構扁形動物的表皮層和肌肉緊貼在一起，構成囊狀體壁，稱之為皮肌囊。,3、結構和機能,（2）消化系統(tǒng)不完全的消化道口、咽、腸，無肛門。,（3）排泄系統(tǒng)原腎管型排泄系統(tǒng)原始的排泄管，一端為盲管，另一端開口（排泄孔）的排泄管。,4）神經(jīng)系統(tǒng)梯狀神經(jīng)系統(tǒng)由一對腦神經(jīng)節(jié)，若干縱神經(jīng)及橫神經(jīng)構成，比腔腸動物更趨集中。感覺器官眼點、耳突、平衡囊。,5）生殖系統(tǒng)大多雌雄同體，生殖器官復雜，具有固定的生殖腺和生殖導管及附屬腺，具有交配行為，體內(nèi)受精。,海產(chǎn)種類個體發(fā)育經(jīng)牟勒氏幼體MULLERRSLARVA階段。,直接發(fā)育動物幼體從卵孵出或母體產(chǎn)出后，不經(jīng)過變態(tài)，而直接長成成體的發(fā)育方式。幼體與成體的形態(tài)和生活方式大致相同。間接發(fā)育動物幼體從卵孵出或母體產(chǎn)出后，須經(jīng)過變態(tài)，方能長成為成體的發(fā)育方式。幼體與成體的形態(tài)及生活習性顯然不同。,4、分類概述,渦蟲綱自由生活，體表腹面有纖毛，腸道發(fā)達，肌肉發(fā)達，神經(jīng)感官發(fā)達。吸蟲綱體表無纖毛，消化道簡單，具口吸盤、腹吸盤等吸附器官，多數(shù)為體內(nèi)寄生蟲，少數(shù)為體外寄生絳蟲綱體表無纖毛，無消化道，頭節(jié)有吸盤和幾丁質(zhì)的鉤，大多具節(jié)片。全部營體內(nèi)寄生。從,5、小節(jié)背腹扁平、三胚層、無體腔、兩側對稱；體壁和消化道之間為實質(zhì)所充填；具器官系統(tǒng)；具皮肌囊結構；有口無肛門；梯狀神經(jīng)系統(tǒng)，多種感覺器官；排泄系統(tǒng)為原腎型；無呼吸和循環(huán)系統(tǒng)。渦蟲綱為自由生活的種類；吸蟲綱成蟲體表不具纖毛和腺細胞，有12個吸盤，原始種類營體外寄生，高等種類營內(nèi)寄生。絳蟲綱全部營體內(nèi)寄生生活，成蟲體表不具纖毛，幼蟲頭節(jié)具鉤，多數(shù)有節(jié)片，消化系統(tǒng)完全退化。吸蟲綱和絳蟲綱中有很多是人類和家畜的寄生蟲。,,6、思考題,1中胚層及兩則對稱的進化意義是什么2中胚層分化成為那些組織、器官3何為皮肌囊結構怎樣4比較扁形動物與腔腸動物的神經(jīng)系統(tǒng)5何為原腎管型排泄系統(tǒng)結構怎樣6如何區(qū)別扁形動物的各綱7扁形動物中的寄生種類有哪些特征是對寄生生活的高度適應8從生活方式的不同來解釋扁形動物3個綱在形態(tài)結構上的差異。,七、具有假體腔的動物,線蟲動物門（NEMATODA）輪蟲動物門（ROTIFERO）線形蟲動物門（NEMATOMORPHA）腹毛動物門（GASTROTRICHA）動吻動物門（KINORHYNCHA）棘頭動物門（ACANTHOCEPHALA）內(nèi)肛動物門（ENTOPROCTA）,1、進化地位,最早形成體腔假體腔，為多種器官系統(tǒng)的發(fā)育、分化提供了空間假體腔的液壓骨骼及循環(huán)作用完全的消化道,2、主要特征,兩側對稱三胚層、假體腔有口有肛門的完全消化道由原腎管演化為管型或腺型的排泄系統(tǒng)自由生活或寄生生活雌雄異體,3、結構與機能,1外部形態(tài)體壁角質(zhì)層、表皮層（上皮細胞）和肌肉上皮細胞是一層合胞體,2、體形圓柱形，體不分節(jié)，無明顯頭部，外覆角質(zhì)膜。,3、具完全消化系統(tǒng)口→食道→中腸→直腸→肛門,4、還未有專門的循環(huán)系統(tǒng)和呼吸系統(tǒng)體腔液的流動起循環(huán)作用；體表呼吸，寄生種類厭氧呼吸。,5、原腎管型的排泄系統(tǒng)管型或腺型線蟲的排泄器官屬于原腎管型，結構不典型，是由腺型細胞或由細胞形成的管完成排泄功能。原始的種類只有12個大型的腺細胞進行排泄及水分調(diào)節(jié)，也稱腎細胞（RENETTECELL）。另一些種，腺型腎細胞延伸成管型排泄器，多呈H型管。,6、筒狀神經(jīng)系統(tǒng)神經(jīng)系統(tǒng)簡單，由神經(jīng)環(huán)、縱神經(jīng)干、神經(jīng)節(jié)構成，呈筒狀。線蟲咽的周圍有一環(huán)狀的腦，環(huán)的兩側膨大成神經(jīng)節(jié)，由腦環(huán)向前后各分出六條神經(jīng)，前端的神經(jīng)分布到唇、乳突及化感器等。向后的六條神經(jīng)中，一條為背神經(jīng)，一條為腹神經(jīng)，二對側神經(jīng)，兩對側神經(jīng)離開腦環(huán)后很快合并成一對，最后的這四條神經(jīng)分別位于相應的縱行上皮索內(nèi)，其中腹神經(jīng)最發(fā)達，由腹神經(jīng)發(fā)出分支到腸及肛門。另外在腦環(huán)周圍，神經(jīng)細胞集中，形成神經(jīng)節(jié)狀。,7、大多數(shù)雌雄異形異體，生殖器官呈管狀。,4、主要類群5、經(jīng)濟意義,具三個胚層，體壁與消化道之間有假體腔；動物間親緣關系不明確；螺旋卵裂；端細胞法形成中胚層；假體腔內(nèi)充滿體腔液；具完整的消化道；排泄系統(tǒng)為原腎型；無循環(huán)系統(tǒng)和呼吸器官；很多為寄生的種類，廣泛寄生在動物和植物等體內(nèi)，給人體健康和農(nóng)、牧、魚業(yè)的生產(chǎn)帶來危害。,6、小結,1何為假體腔，是如何形成的2假體腔動物的共同點有哪些3假體腔的出現(xiàn)在進化上有什么意義4簡述線蟲動物的基本結構和生物學特點5哪些門的假體腔動物有寄生的種類哪些動物門全部是寄生的。,,7、思考題,

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簡介：1,題目人教版高中生物學教材中欄目的研究,答辯人XXX指導老師XXX,2,論文提綱,文獻綜述,研究設計,具體內(nèi)容,文獻及致謝,,,,,3,一、文獻綜述,4,二、研究設計,,,,,5,研究意義,1系統(tǒng)的整理、分析了人教版教材的欄目設置2使讀者更加精確把握教材的編寫意圖3提出了對教材欄目的使用建議，提高教學有效性,6,三、具體內(nèi)容及結論,7,,1總體看來，欄目是教材正文內(nèi)容的補充與延伸2欄目與教材正文部分緊密結合，相輔相成，形成一個有機的整體3欄目與教材正文的側重點不同,8,,,目標型信息型結構型技能型展望型評價型必修一17401012417必修二254549225必修三244449221,目標型、信息型、結構型、技能型、展望型、評價型,9,,1增強教材的趣味性2拓寬學生的知識面3提高學生的學習效率4促進學生的全面發(fā)展5幫助學生養(yǎng)成良好的學習習慣6為教師提供更加優(yōu)秀的備課資源7督促教師完成三維教學目標,10,,1欄目類型豐富多樣2欄目內(nèi)容新穎、有趣3欄目內(nèi)容體現(xiàn)現(xiàn)代生物科學技術的發(fā)展4欄目之間聯(lián)系緊密，結構嚴謹,具有網(wǎng)絡性和系統(tǒng)性等,11,,●教材中的個別欄目內(nèi)容比較陳舊，學習效果不好●個別欄目內(nèi)容難度太大或脫離實際，很難完成或應用,12,1精確把握教材欄目的設置意圖，提高教學有效性2在深刻理解新課標和教材中各欄目的功能的基礎上，合理取舍欄目3如果有合適的內(nèi)容，可以代替某些內(nèi)容相對陳舊的欄目4在實踐中摸索，實現(xiàn)對欄目的再構建，創(chuàng)新應用欄目,,13,謝謝,

簡介：注意注意每人答案務必不能完全一樣每人答案務必不能完全一樣4試述酵母雙雜交系統(tǒng)的原理、構建及基本用途。試述酵母雙雜交系統(tǒng)的原理、構建及基本用途。1212分第一種答酵母雙雜交系統(tǒng)酵母雙雜交系統(tǒng)是一項專門用來研究蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)相互作用的技術，它首先由FIELDSS和SONGOK于1989年提出。這項新技術在驗證已知蛋白質(zhì)之間的相互作用或篩選與特定靶蛋白呈特異性作用的候選蛋白的研究中已經(jīng)得到了廣泛的應用。其可行性和有效性已被證實，并被推廣到了諸如信號傳導、細胞周期調(diào)控、腫瘤基因表達等多個研究領域，受到越來越多的重視。酵母雙雜交系統(tǒng)的原理酵母雙雜交系統(tǒng)的原理酵母雙雜交系統(tǒng)技術使用蛋白質(zhì)的兩種具有特別功能的結構域一種是與DNA結合的結合結構域（簡稱BD），另一種是激活DNA轉錄的激活結構域（簡稱AD）。研究表明，這兩種結構域并不需要一定在同一個蛋白質(zhì)上才起作用。事實上，一個含有BD的蛋白質(zhì)在與另一個含有AD的蛋白質(zhì)結合以后就可以激活轉錄，該原理構成了酵母雙雜交技術的基礎。在雙雜交系統(tǒng)中，兩種融合蛋白被表達一種是目標蛋白X，它有時被形象地稱為誘餌蛋白。X在它的N端與BD融合在一起；另一種是潛在的能夠與X結合的目標蛋白Y。Y與AD融合在一起。如果X與Y相互作用，那么XY的結合就形成一種完整的活性轉錄激活物。如此形成的轉錄激活物能夠驅(qū)動一個容易檢測的報告基因的表達。于是，報告基因的表達量可以用來作為測定X與Y相互作用的尺度。酵母雙雜交系統(tǒng)的建立酵母雙雜交系統(tǒng)的建立1選擇載體2將“誘餌”蛋白X的基因和目標蛋白Y的基因分別插入到BD載體和AD載體之中，以形成BDX和ADY融合蛋白3轉染使用特定的手段將重組后的BDX載體和ADY載體轉染到特定的營養(yǎng)缺陷型酵母宿主細胞；4篩選利用雙營養(yǎng)缺陷型的恢復篩選出同時含有BD載體和AD載體的細胞；5活性檢測。應用1發(fā)現(xiàn)新的蛋白質(zhì)和蛋白質(zhì)的新功能發(fā)現(xiàn)新的蛋白質(zhì)和蛋白質(zhì)的新功能2在細胞體內(nèi)研究抗原和抗體的相互作用在細胞體內(nèi)研究抗原和抗體的相互作用3篩選藥物作用位點及藥物對蛋白相互作用影響篩選藥物作用位點及藥物對蛋白相互作用影響4建立基因組蛋白建立基因組蛋白連鎖圖鎖圖特點與意義（1）表達具有組織特異性和階段特異性。即在不同組織中表達有不同類型的MIRNA在生物發(fā)育的不同階段里有不同的MIRNA表達。（2）（2）MIRNA具有高度保守性，即各種MIRNA都能在其他種系中找到同源體。（2）（3）與靶MRNA3’UTR結合，序列特異性的在轉錄后水平調(diào)控基因的翻譯表達。一些偏大的MIRNA27NT可能參與了基因組的重組裝。（2）（4）MIRNA獨有的特征其5’端第一個堿基對U有強烈的傾向性，而對G卻有抗性，但第二到第四個堿基缺乏U，一般來講，除第四個堿基外，其他位置堿基通常都缺乏C。（2）（5）MIRNA執(zhí)行一定的生物學功能在生長發(fā)育、信號轉導、免疫調(diào)節(jié)、細胞周期、細胞的分化、增殖和凋亡以及腫瘤發(fā)生等方面發(fā)揮著重要作用。（2）1、RNARNA干擾的發(fā)現(xiàn)和原理干擾的發(fā)現(xiàn)和原理RNA干擾是指通過雙鏈RNA使目的MRNA降解，從而特異性地抑制目的蛋白表達的現(xiàn)象。RNA干擾是普遍存在于真菌、植物、果蠅等各類真核生物之中的現(xiàn)象，類似于一種古老的免疫機制。1990年，NAPOLI教授在研究矮牽?；ú闋柾驎r發(fā)現(xiàn)了基因共抑制現(xiàn)象（COSUPPRESSION）1。她在體外構建了控制矮牽?；ɑㄉ幕虿闋柾蚱?，連上花椰菜花葉病毒的35S啟動子，連入農(nóng)桿菌的TDNA質(zhì)粒，在矮牽牛花中過度表達。她原先預期，查爾酮的過度表達能加深牽?；ɑㄉ淖仙?，但是結果卻導致了矮牽?；ㄗ哟ㄉ耐噬瑑?nèi)源性的查爾酮遭到沉默。NAPOLI教授把這一現(xiàn)象稱之為內(nèi)源性基因共抑制現(xiàn)象。1998年，REWJHAMILTON教授研究了番茄ACC氧化酶基因的基因共抑制現(xiàn)象。他利用放射性標記法和放線菌酮處理法分析轉錄后ACC氧化酶基因的MRNA和成熟MRNA。實驗結果表明，外源重組基因片段能成功轉錄，但是MRNA成功轉錄出后，因為某種原因發(fā)生了轉錄后基因沉默（POSTTRANIONALGENESILENCINGPTGS）2。因此，REWJHAMILTON認為內(nèi)源性基因共抑制現(xiàn)象屬于轉錄后的基因沉默現(xiàn)象。1998年，F(xiàn)IRE和MELLO課題組接手了GUO教授研究的秀麗新小桿線蟲發(fā)育過程中的一個關鍵基因PAR13的課題。他們以秀麗新小桿線蟲為模型，發(fā)現(xiàn)在GUO的課題中，引發(fā)線蟲PAR1基因沉默的是小片段的雙鏈RNA4，而不是正義單鏈RNA或負義單鏈RNA。他們之后又研究了秀麗新小桿線蟲的UNC22基因，進一步闡述了雙鏈RNA在基因沉默中的作用，并創(chuàng)造性地使用了“RNA干擾”這個名詞。他們的研究成果激起了其他科學家研究RNA干擾現(xiàn)象的濃厚興趣，由于他們的發(fā)現(xiàn)揭示了分子生物學中一個全新的，具有普遍性的機制，REWFIRECRAIGCMELLO兩位科學家因此在2006年獲得諾貝爾獎

簡介：高中學業(yè)水平考試生物第1頁共14頁高中學業(yè)水平考試生物精要知識點高中學業(yè)水平考試生物精要知識點1、生命系統(tǒng)的結構層次細胞組織器官系統(tǒng)（植物沒有）個體種群群落生態(tài)系統(tǒng)（生物圈是最大的生態(tài)系統(tǒng)）2、蛋白質(zhì)的基本單位_氨基酸_其基本組成元素是_C、H、O、N_，氨基酸的結構通式（自己填上）肽鍵__NHCO_3、肽鍵數(shù)＝脫去的水分子數(shù)＝__氨基酸數(shù)_－_肽鏈數(shù)_4、多肽分子量＝氨基酸分子量_氨基酸數(shù)_－__水分子數(shù)__185、核酸種類__DNA__和__RNA__；基本組成元素_C、H、O、N、P_。6、DNA的基本組成單位_脫氧核苷酸_；RNA的基本組成單位_核糖核苷酸_。7、核苷酸的組成包括1分子__磷酸、1分子__五碳糖_、1分子__含氮堿基_。8、DNA主要存在于_細胞核_中，含有的堿基為_A、G、C、T_；RNA主要存在于_細胞質(zhì)中，含有的堿基為_A、G、C、U_；9、細胞的主要能源物質(zhì)是_糖類_，直接能源物質(zhì)是_ATP_。10、葡萄糖、果糖、核糖屬于__單__糖；蔗糖、麥芽糖、乳糖屬于__二___糖；淀粉、纖維素、糖原屬于__多__糖。11、脂質(zhì)包括__脂肪__、__磷脂_和_固醇_。12、大量元素__C、H、O、N、P、S、K、CA、MG_（9種）微量元素__FE、MN、B、ZN、CU、MO__（6種）基本元素__C、H、O、N__（4種）最基本元素__C__（1種）主要元素___C、H、O、N、P、S__（6種）13、水在細胞中存在形式_自由水_、__結合水__。14、細胞中含有最多的化合物鮮重水_，干重蛋白質(zhì)。15、血紅蛋白中的無機鹽是__FE2_，葉綠素中的無機鹽是__MG2_。16、被多數(shù)學者接受的細胞膜模型叫___流動鑲嵌__模型。17、細胞膜的成分__脂質(zhì)（磷脂雙分子層）_、__蛋白質(zhì)__和少量__糖類__。細胞膜的基本骨架是__磷脂雙分子層__。18、細胞膜的結構特點是_具有流動性；功能特點是具有選擇透過性__。19、具有雙層膜的細胞器___線粒體__、___葉綠體__不具膜結構的細胞器__核糖體_、___中心體__；有“動力車間”之稱的細胞器是__線粒體__；有“養(yǎng)料制造車間”和“能量轉換站”之稱的是__葉綠體_；有“生產(chǎn)蛋高中學業(yè)水平考試生物第3頁共14頁37、有氧呼吸反應式____________________________________________38、無氧呼吸的兩個反應式___________________________________________________（見①P95）____________________________________________________（見①P95）39、呼吸作用的意義為生命活動提供能量；為合成其他化合物提供原料。40、細胞分化的原因基因的___選擇性表達__。41、檢測還原糖用_斐林_試劑，其由01GML的NAOH溶液和_005GML的CUSO4溶液組成，與還原糖發(fā)生反應生成_磚紅色沉淀。使用時注意__現(xiàn)配現(xiàn)用_。42、鑒定生物組織中的脂肪可用_蘇丹Ⅲ_染液和__蘇丹Ⅳ__染液。前者將脂肪染成__橘黃_色，后者染成__紅__色。43、鑒定生物組織中的蛋白質(zhì)可用__雙縮脲_試劑。使用時先加__NAOH溶液_，后加23滴__CUSO4溶液__。反應生成_紫_色絡合物。44、給染色體染色常用的染色劑是__龍膽紫__或___醋酸洋紅溶液__。45、“觀察DNA和RNA在細胞中的分布”中，用__甲基綠_和__吡羅紅_兩種染色劑染色，DNA被染成__綠_色，RNA被染成__紅_色。46、原生質(zhì)層包括__細胞_膜、__液泡_膜以及這兩層膜之間的__細胞質(zhì)__。47、__健那綠_染液是專一性染線粒體的活細胞染料，可以使活細胞中線粒體呈現(xiàn)_藍綠_色。48、在分泌蛋白的合成、加工、運輸和分泌過程中，有關的細胞器包括__核糖體_、__內(nèi)質(zhì)網(wǎng)_、__高爾基體_、__線粒體_。49、氨基酸形成肽鏈，要通過__脫水縮合_的方式。50、當外界溶液濃度大于細胞液濃度時，植物細胞發(fā)生__質(zhì)壁分離_現(xiàn)象；當外界溶液濃度小于細胞液濃度時，植物細胞發(fā)生質(zhì)壁分離后的復原__現(xiàn)象。51、細胞膜和其他生物膜都是__選擇透過性__（功能特點）膜。52、細胞有氧呼吸的場所包括__細胞質(zhì)基質(zhì)__和__線粒體__。53、有氧呼吸中，葡萄糖是第_一__階段參與反應的，水是第_二_階段參與反應的，氧氣是第__三__階段參與反應的。第__三__階段釋放的能量最多。54、細胞體積越大，其相對表面積越__小__，細胞的物質(zhì)運輸效率就越__低__。細胞的__表面積__與__體積___的關系限制了細胞的長大。55、連續(xù)分裂的細胞，從___一次分裂完成___時開始，到___下一次分裂完成__時為止，稱為一個細胞周期。56、有絲分裂間期主要變化是完成_DNA分子_的復制和有關_蛋白質(zhì)_的合成。有絲分裂分裂期各階段特點如下前期的主要特點是__染色體、紡錘體出現(xiàn)，核膜、核仁消失__；

簡介：1生物競賽動物學測試題一、單選（每題1分）1除鴨嘴獸外，能產(chǎn)卵的哺乳動物還有（）A負鼠B袋鼠（有袋類）C針鼴D齒鼩（食蟲類）2爬行類能成為真正的陸生脊椎動物是因為（）A有了頸部B體表有了角質(zhì)鱗片C心室中出現(xiàn)了隔膜D出現(xiàn)了羊膜卵3動物排泄的含氮廢物常因種類而異，下列動物中以排泄尿酸為主的一組是（）A兩棲類和魚類B爬行類和哺乳類C鳥類和爬行類D哺乳類和鳥類4、下列寄生性原蟲的哪一個階段寄生與人體（或狗），另一階段寄生在百蛉子體內(nèi)，并能引起人的黑熱病的發(fā)生A、瘧原蟲B、利什曼原蟲C、痢疾內(nèi)變形蟲D、艾美球蟲5、在較為低等的無脊椎動物中，排泄系統(tǒng)首先出現(xiàn)于哪個群體（）A、多孔動物B、腔腸動物C、扁形動物D、原腔動物6、餐桌上所食海蜇頭是哪一部分A、口腕B、外傘部C、體前端D、胃絲7、下列哪項不是脊椎動物亞門的主要特征（）A、出現(xiàn)明顯的頭部，故又有“有頭類”之稱B、次生的水生種類及陸生的種類，只有在胚胎其間出現(xiàn)鰓裂、成體用肺呼吸C、都有上、下頜D、構造復雜的腎臟代替了簡單的腎管8、原生物部都是單細胞動物、個體較小，但是為一完整的有機體，它們可以依靠各種細胞完成各種生活機能。下列描述錯誤的是A、以鞭毛、纖毛或偽足完成運動B、伸縮泡的主要功能是進行排泄C、環(huán)境不良的條件下，大多數(shù)可形成包囊度過不良環(huán)境D、部分種類具有有性生殖方式9、節(jié)肢動物門中種類最多的綱為（）A、腹足綱B、昆蟲綱C、多足綱D、頭足綱E、瓣鰓綱10、有許多昆蟲可以通過某些器官或部位發(fā)聲，下列昆蟲（Ⅰ蟋蟀、Ⅱ鳴蝗、Ⅲ蟬、Ⅳ天牛）怎樣發(fā)生請選擇正確組合A、頭胸部之間的磨擦B、腹部的發(fā)音器C、前翅磨擦D、后足摩擦前翅A、ⅠCⅡBⅢAⅣDBⅠCⅡDⅢBⅣAC、ⅠBⅡAⅢCⅣDDⅠBⅡDⅢDⅣA11、將4只雄蠶峨分別作如下處理觀察其對雌蠶娥的反應最遲鈍的應是A封閉口器者B剪去觸角者C遮蓋單眼者D遮蓋復眼者12、鳥類呼吸時氣體交換的真正部位是A背支氣管B腹支氣管C微氣管D平行支氣管三級支氣管13、烏賊眼睛的構造相似于3C有蛹期，生活習性與成蟲不一樣D無蛹期，生活習性與成蟲一樣27哺乳類動物中唯一能飛行的類群是A鼯鼠B飛狐猴C蝙蝠D有袋類28以下哪些特征是哺乳動物所共有的A具毛B具胎盤C腦為大型腦D直接產(chǎn)出幼體E具有以上四種29對于哺乳動物細胞來說，分化最明顯最集中的時期是A受精卵最初的幾次分裂B胚胎發(fā)育形成C從胚胎形成到胎兒出生D出生后的生長發(fā)育30關于“蜻蜒點水”現(xiàn)象的正確解釋為A蜻蜒在飛翔中飲水的行為B蜻蜒通過身體觸及水作標記C雌性蜻蜒的產(chǎn)卵行為D雄性蜻蜒的求偶行為31昆蟲的口器類型多樣，請選出下列組合哪些組正確A蟬（刺吸式）、蝶（舐吸式）、蜜蜂（嚼吸式）、天牛（咀嚼式）B蚊（刺吸式）、蝽（虹吸式）、蠅（舐吸式）、蟻（咀嚼式）C胡蜂（刺吸式）、金色甲（咀嚼式）、蝗（嚼吸式）、錯蜒（虹吸式）D蝽（刺吸式）、蛾（虹吸式）、蟑螂（咀嚼式）、蜜蜂（嚼吸式）32哺乳動物的胎盤是A母體子宮壁內(nèi)膜的一部分B胎兒在子宮內(nèi)的絨毛膜C胎兒的絨毛膜和尿囊與母體子宮壁的內(nèi)膜的結合部分D類似于鳥卵中殼膜的結構33人感染血吸蟲的主要途徑是A飲用了含血吸蟲卵的水B誤食釘螺C接觸疫水，感染尾蚴D接觸了糞水中的毛蚴34食蟲目屬真獸亞綱中較原始的類群，其原始特征是A鼻間隔寬闊，手掌裸露，聽覺發(fā)達B存留有門齒、犬齒、臼齒多種齒型，吻長適于食蟲C趾行式，嗅覺不發(fā)達，懷孕期長D牙齒結構分化較少，個體一般較小，吻部細長，指端具爪35（）下列哪一組器官均為內(nèi)胚層衍生物A腦下垂體，脊髓，肺；B脊索，頭部真皮，肝臟；C耳咽管，甲狀腺，胰臟D膽囊，腦下垂體，尿囊。36（）下列哪一組動物的腦顱與頜弓相接類型全為顱接型A狗，犰狳，蝙蝠，豪豬；B人，鱷，鳥，龜；C鳥，龜，蛙，馬；D硬骨魚，蟾蜍，鳥，兔。37（）脊椎動物的血流方向是A背面從前向后，腹面從后向前B背面從前向后，腹面從前向后C背面從后向前，腹面從前向后D背面從后向前，腹面從后向前38（）鳥類的雙重呼吸是指A鼻子和嘴一呼一吸；

簡介：高中生物學奧賽小組選拔測試題高中生物學奧賽小組選拔測試題2004821本卷分值為100100分，考試時間6060分鐘。一、選擇題（本題有60小題，每題1分。每小題只有一個選項符合題意。）1生物與非生物最根本的區(qū)別在于生物體A有嚴整的結構B通過一定的調(diào)節(jié)機制對刺激發(fā)生反應C通過新陳代謝進行自我更新和通過生殖產(chǎn)生后代D具有生長發(fā)育和產(chǎn)生后代的特性2蟬一般在24℃以下時不鳴叫，而在24℃以上，光照強度在06米燭光以上時才鳴叫，這種現(xiàn)象說明生物體具有A遺傳性B向光性C適應性D應激性3研究表明SARS病毒由蛋白質(zhì)和RNA組成（如圖所示），它只所以是生物判斷的根據(jù)是A它由有機物組成B它能使其它動物患病C它能侵入寄主表現(xiàn)出生命活動D它能獨立生活，表現(xiàn)出生命活動4下列不屬于應激性的是A根的向地性B莖的背地性C避役的體色與變化的環(huán)境保持一致D鯨的前肢變?yōu)轹?在生物學的研究過程中，一般經(jīng)歷下列過程A提出問題、進行實驗、發(fā)現(xiàn)問題、解決問題、作出假使、驗證假設、得出結論B進行實驗、發(fā)現(xiàn)問題、提出問題、作出假使、驗證假設、得出結論C發(fā)現(xiàn)問題、進行實驗、提出問題、作出假使、驗證假設、得出結論D發(fā)現(xiàn)問題、作出假使、進行實驗、驗證假設、得出結論6下列現(xiàn)象，同時屬于應激性、反射性和適應性的是A含羞草的葉子受到振動后馬上下垂B下風口的雄蛾飛向上風口與雌蛾交尾C生活在青草叢中的蝗蟲身體呈綠色，生活在枯草叢中的蝗蟲身體呈褐色D草履蟲從濃食鹽水游向清水中7氮是植物體內(nèi)的重要元素之一，下列物質(zhì)不含氮元素的是A酶B纖維素CRNADATP8生物體進行生命活動的物質(zhì)基礎是指A各種化學元素B大量元素和微量元素C各種化合物D組成生物體的各種元素和化合物9幾十年前，新西蘭有一個牧場的大片牧草長勢很弱，有的甚至發(fā)黃枯萎，即使施用了大量氮、磷、鉀肥也無濟于事。后來人們偶然發(fā)現(xiàn)牧場內(nèi)的一小片牧草長得十分茂盛。原來，這一小片“綠洲”的附近有一座鉬礦，礦工上下班總是抄近路走，他們的鞋子上粘有鉬礦粉，正是礦工鞋子踩過的地方，牧草長得綠油油的。經(jīng)過科學家的化驗和分析，一公頃牧草只需1的克鉬就足夠了。下列關于這一現(xiàn)象的解釋，不正確的是A鉬是植物生長發(fā)育所必需的一種化學元素B鉬是植物生長發(fā)育所必需的一種微量元素C鉬是一種高效肥料，只要有了鉬，植物就能正常生長發(fā)育D植物雖然對鉬的需要量很少，但鉬的作用不可用其他化學元素代替10夏季，人在高溫作業(yè)或劇烈活動后，要喝淡鹽水；在患急性腸胃炎時，要及時注射生理鹽水；不慎受外傷后，用09的鹽水清洗傷口。這樣做的主要目的依為①降溫②維持水代謝的平衡③維持無機鹽代謝的平衡④消毒⑤是細胞的等滲溶液并有清潔作用A①②④B③②⑤C②③⑤D②③④11紅細胞內(nèi)鐵含量降低時，其血紅蛋白減少，紅細胞的輸氧功能相應減弱。這個事實說明鐵的作用是A以化合物形式存在B細胞的結構物質(zhì)C調(diào)節(jié)離子平衡D調(diào)節(jié)滲透壓平衡和PH值12一個足球運動員在足球場上劇烈運動時，突然發(fā)生抽搐現(xiàn)象，這是因為它的血液中可能是下列哪項含量太低引起的24線粒體和葉綠體是生物細胞內(nèi)重要的細胞器，下列關于線粒體和葉綠體結構與功能相聯(lián)系的敘述，不正確的有A從結構上看，二者都有雙層膜，基粒和基質(zhì)B從功能上看，二者都與細胞的能量代謝有關C從所含物質(zhì)上看，二者都含有少量DNAD從功能上看，二者具有相同的功能25下列物質(zhì)中，不能橫穿細胞膜進出細胞的是A維生素D和性激素B水和尿素C氨基酸和葡萄糖D酶和胰島素26實驗室里三種植物細胞，分別取自植物的三種營養(yǎng)器官。在適宜的光照、溫度等條件下，測得甲細胞只釋放C02而不釋放02，乙細胞只釋放02不釋放C02，丙細胞既不釋放02，也不釋放C02，以下敘述中不正確的是A甲不可能取自于葉B乙不可能取自于根C丙可能是死細胞D甲可能取自于莖27在下列結構中，其成分不含磷脂分子的一組細胞器是①線粒體②核糖體③葉綠體④細胞核⑤內(nèi)質(zhì)網(wǎng)⑥中心體⑦高爾基體A①③B④⑤C⑤⑦D②⑥28當種子由休眠狀態(tài)轉化為萌發(fā)狀態(tài)時，其體內(nèi)的自由水與結合水的比值將A升高B降低C無變化D先升后降29人的成熟紅細胞沒有細胞核，在溶血后，只剩下一層細胞膜外殼，稱血影。如果將血影中的脂類抽提出來，在水面上鋪展開。并用板條將其推擠到一塊，則測得的脂類面積約是紅細胞表面積的A12倍B1倍C2倍D4倍30下面是光合作用和呼吸作用過程中產(chǎn)生氫的細胞器及氫的來源和用途比較，正確的是A①②B③④C②③D②④31在某腺體的細胞中，提取出附著有核糖體的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體放人含有放射性標記的氨基酸的培養(yǎng)液中。培養(yǎng)液中含有各細胞器完成其功能所需的物質(zhì)和條件。很快連續(xù)取樣，測定標記的氨基酸出現(xiàn)在各細胞器中的情況，結果如圖所示。則曲線A、B、C依次代表（）A內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、核糖體、高爾基體B內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、核糖體C核糖體、高爾基體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)D核糖體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體32右圖是某細胞在進行某生命活動前后幾種生物膜面積的變化圖，在此變化過程中最可能合成A抗體B雄性激素C呼吸酶DDNA合成酶33人工腎能部分替代真正的腎臟起作用?；颊叩难涸谥锌绽w維中向一側流動，一種稱為透析液的水溶液在中空纖維外向相反方向流動見下圖。血液中的小分子廢物通過血液透析膜中空纖維壁進人到透析液中。血液從患者臂部或腿部的血管通路流入人工腎，經(jīng)過人工腎得到凈化后，又流回靜脈是A為了防止蛋白質(zhì)類等有用的物質(zhì)隨著廢物離開血液，透析液中的蛋白質(zhì)類等有用的物質(zhì)應與血液中的基本相同B為了防止某些鹽類等有用的物質(zhì)隨著廢物離開血液，透析液中的酸堿度和滲透壓應與血液中的基本相同C患者的血液要流經(jīng)人工腎許多次之后，才能除去大部分的小分子廢物D由于血液與透析液中的物質(zhì)存在濃度差，患者的血液流經(jīng)人工腎之后，大部分的小分子廢物被除去34酵母菌與大腸桿菌都具有的膜結構是A膜B內(nèi)質(zhì)網(wǎng)C糖體D細胞膜35科學家在制備較純凈的細胞膜時，一般不選用植物細胞，其原因是細胞器來源用途①葉綠體水的分解還原二氧化碳②葉綠體水的分解還原三碳化合物③線粒體丙酮酸的分解與氧結合生成水④線粒體葡萄糖和丙酮酸的分解與氧結合生成水

簡介：食品微生物學食品微生物學試卷一、試卷一、一填空題填空題1細菌一般進行細菌一般進行___無性無性__繁殖，即繁殖，即__裂殖裂殖_。酵母的繁殖方式分為有性和無性。酵母的繁殖方式分為有性和無性兩類，無性繁殖又可分為兩類，無性繁殖又可分為__芽殖芽殖__，__裂殖裂殖__兩種形式，有性繁殖時形成兩種形式，有性繁殖時形成__子囊子囊_；霉菌在有性繁殖中產(chǎn)生的有性孢子種類主要有；霉菌在有性繁殖中產(chǎn)生的有性孢子種類主要有__子囊孢子子囊孢子__，_接合接合孢子孢子__；在無性繁殖中產(chǎn)生的無性孢子種類有；在無性繁殖中產(chǎn)生的無性孢子種類有_孢囊孢子孢囊孢子_，__分生孢子分生孢子__，__厚垣孢子（節(jié)孢子）厚垣孢子（節(jié)孢子）__；放線菌以；放線菌以__無性無性__方式繁殖，主要形成方式繁殖，主要形成__分生孢分生孢子__，也可以通過，也可以通過___菌絲片斷菌絲片斷_繁殖。繁殖。2微生物污染食品后，對人體造成的危害主要是引起微生物污染食品后，對人體造成的危害主要是引起___食物中毒食物中毒_______和____消化道傳染病消化道傳染病_____。3在酵母菌細胞結構中，在酵母菌細胞結構中，____⒃_____具有保護細胞及維持細胞外形的功能；具有保護細胞及維持細胞外形的功能；____⒄____具有控制細胞對營養(yǎng)物及代謝產(chǎn)物的吸收和交換作用；具有控制細胞對營養(yǎng)物及代謝產(chǎn)物的吸收和交換作用；____⒅_____是細胞進行生命活動，新陳代謝的場所；細胞進行生命活動，新陳代謝的場所；___⒆______是呼吸酶類的載體，細胞的能是呼吸酶類的載體，細胞的能量供應站；量供應站；_____⒇____具有傳遞細胞遺傳性狀的作用。具有傳遞細胞遺傳性狀的作用。⑴無性無性⑾無性無性⑵裂殖裂殖⑿分生孢子分生孢子⑶芽殖芽殖⒀菌絲片斷菌絲片斷⑷裂殖裂殖⒁食物中毒食物中毒⑸子囊子囊⒂消化道傳染病消化道傳染病⑹子囊孢子子囊孢子⒃細胞壁細胞壁⑺接合孢子接合孢子⒄細胞膜細胞膜⑻孢囊孢子孢囊孢子⒅細胞質(zhì)細胞質(zhì)⑼分生孢子分生孢子⒆線粒體線粒體⑽厚垣孢子（節(jié)孢子）厚垣孢子（節(jié)孢子）⒇細胞核細胞核二選擇題（選擇題（1分小題小題20）1革蘭氏染色的關鍵步驟是革蘭氏染色的關鍵步驟是__C_A結晶紫（初染）結晶紫（初染）B碘液（媒染）碘液（媒染）C酒精（脫色酒精（脫色）D蕃紅（復染）蕃紅（復染）2屬于細菌細胞基本結構的為屬于細菌細胞基本結構的為__B_A莢膜莢膜B細胞壁細胞壁C芽孢芽孢D鞭毛鞭毛3測定食品中的細菌總數(shù)常采用測定食品中的細菌總數(shù)常采用__A___A稀釋混勻平板法稀釋混勻平板法B稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法C顯微鏡直接鏡檢計數(shù)法顯微鏡直接鏡檢計數(shù)法4干熱滅菌法要求的溫度和時間為干熱滅菌法要求的溫度和時間為_C__A105℃，2小時小時B121℃，30分鐘分鐘C160℃，2小時小時D160℃，4小時小時5微生物運輸營養(yǎng)物質(zhì)的主要方式微生物運輸營養(yǎng)物質(zhì)的主要方式_C__A單純擴散單純擴散B促進擴散促進擴散C主動運輸主動運輸D基團轉位基團轉位6SACOMYCESCEREVISIAE有性繁殖產(chǎn)生有性繁殖產(chǎn)生__D__A接合孢子接合孢子B擔孢子擔孢子C孢囊孢子孢囊孢子D子囊孢子子囊孢子7以高糖培養(yǎng)酵母菌以高糖培養(yǎng)酵母菌其培養(yǎng)基類型為其培養(yǎng)基類型為__B__A加富培養(yǎng)基加富培養(yǎng)基B選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基C鑒別培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基D普通培養(yǎng)基普通培養(yǎng)基8抗干燥能力較強的微生物是抗干燥能力較強的微生物是__A_______。A酵母菌酵母菌B霉菌菌絲霉菌菌絲C乳酸菌乳酸菌9產(chǎn)生假根是產(chǎn)生假根是__A__的形態(tài)特征。的形態(tài)特征。8放線菌和霉菌都具有營養(yǎng)菌絲和氣生菌絲。放線菌和霉菌都具有營養(yǎng)菌絲和氣生菌絲。9腸球菌對冷凍的抵抗力比大腸菌群細菌大。腸球菌對冷凍的抵抗力比大腸菌群細菌大。10自養(yǎng)菌可引起食品腐敗。自養(yǎng)菌可引起食品腐敗。四分析問答題分析問答題41從變質(zhì)罐頭中檢出酵母菌和霉菌時，試分析引起罐藏食品變質(zhì)的原因。從變質(zhì)罐頭中檢出酵母菌和霉菌時，試分析引起罐藏食品變質(zhì)的原因。（10分）分）42在微生物培養(yǎng)過程中引起在微生物培養(yǎng)過程中引起PH值改變的原因有哪些在實踐中如何保證微生物值改變的原因有哪些在實踐中如何保證微生物能處于較穩(wěn)定和合適的能處于較穩(wěn)定和合適的PH環(huán)境中（環(huán)境中（10分）分）43根據(jù)你掌握的實驗方法，在由枯草芽孢桿菌、大腸桿菌、產(chǎn)氣腸桿菌根據(jù)你掌握的實驗方法，在由枯草芽孢桿菌、大腸桿菌、產(chǎn)氣腸桿菌組成的混合菌懸浮液中，將上述菌進行分離、鑒別。組成的混合菌懸浮液中，將上述菌進行分離、鑒別。（20分）分）44氣調(diào)保藏食品的原理氣調(diào)保藏食品的原理（10分）分）試卷二、試卷二、一填空題（填空題（1分空20））1一般來說，氧化還原電位一般來說，氧化還原電位EH值在值在01V以上，適宜以上，適宜___⑴____性微生物的性微生物的生長，生長，01V以下，適合以下，適合___⑵___性微生物的生長。性微生物的生長。2侵染寄主細胞后暫不引起細胞裂解的噬菌體稱侵染寄主細胞后暫不引起細胞裂解的噬菌體稱____⑶___。3微生物細胞的主要組成元素是微生物細胞的主要組成元素是____⑷_____。4在營養(yǎng)物質(zhì)的四種運輸方式中，只有在營養(yǎng)物質(zhì)的四種運輸方式中，只有__⑸___運輸方式改變了被運輸物質(zhì)的化學運輸方式改變了被運輸物質(zhì)的化學組成。組成。5干燥對微生物的作用，主要是干燥對微生物的作用，主要是____⑹____。6嗜冷、嗜溫、嗜熱這三類微生物都有可能生長的溫度范圍是嗜冷、嗜溫、嗜熱這三類微生物都有可能生長的溫度范圍是_⑺__。7以有機物作為碳源和能源的微生物營養(yǎng)類型是以有機物作為碳源和能源的微生物營養(yǎng)類型是____⑻___。8根據(jù)細菌性食物中毒的病理機制，可將細菌性食物中毒分為根據(jù)細菌性食物中毒的病理機制，可將細菌性食物中毒分為___⑼__和____⑽_______。⑴好氣好氣⑾濃度濃度⑵厭氣厭氣⑿作用溫度作用溫度⑶溫和噬菌體溫和噬菌體⒀作用時間作用時間⑷碳素碳素⒁單⑸基團轉位基團轉位⒂多⑹抑制微生物生長抑制微生物生長⒃UM⑺25℃30℃⒄NM⑻化能異養(yǎng)型化能異養(yǎng)型⒅芽孢桿菌芽孢桿菌⑼感染型食物中毒感染型食物中毒⒆梭狀芽孢桿菌梭狀芽孢桿菌⑽毒素型食物中毒毒素型食物中毒⒇中和微生物代謝產(chǎn)生的酸中和微生物代謝產(chǎn)生的酸9化學物質(zhì)對微生物的作用主要取決于化學物質(zhì)對微生物的作用主要取決于__⑾____；也與；也與_____⑿____和___⒀___等作用條件有關。作用條件有關。10絲狀真菌的無隔菌絲是由絲狀真菌的無隔菌絲是由__⒁__細胞組成，有隔菌絲是由細胞組成，有隔菌絲是由__⒂__細胞組細胞組成。成。11測定細菌、菌、放線菌的大小，大小，一般以___⒃__為單位，位，而測定病毒的大的大小則以__⒄__為單位。位。12產(chǎn)生產(chǎn)生芽孢的桿菌主要有___⒅__屬和屬和____⒆__屬。屬。

簡介：1食品微生物學經(jīng)典試題及答案單項選擇題1、下列是原核微生物的是（細菌）。2、第一個發(fā)現(xiàn)微生物的是（列文虎克）3、微生物學發(fā)展的第二時期，是（巴斯德、科赫）奠定了基礎。4、莢膜的主要成分是（糖類）。５、測量細菌的大小用（微米）。6、細胞壁的主要成分是（肽聚糖）。7、培養(yǎng)酵母用（麥芽糖瓊脂）。8、一般培養(yǎng)基滅菌的條件是（121C15分）。9、放線菌的菌落特征是（干燥、多皺）。10、酵母的無性繁殖主要是（芽殖）。11、霉菌的主要繁殖方式是（孢子生殖）。12、曲霉孢子是（外生孢子）。13、霉菌菌落比酵母的要（大）。14、哪些對病毒的描述是錯的（對抗生素敏感）。15、病毒具有（一種核酸）。16、噬菌體可用于（診斷和治療）。17、能夠使細菌和放線菌裂解的是（裂性噬菌體）。18、可用于細菌鑒定和分型的是（噬菌體）。19、細菌總數(shù)測定的是（全部活細菌數(shù)）。20、大腸菌群數(shù)量測定的（100）毫升或克食品檢樣的大腸菌群最近似的值。21、測定大腸菌群數(shù)量的方法，選用的是（37）C22、培養(yǎng)酵母菌的溫度常選（28）C23、配制固體培養(yǎng)基加瓊脂量是（2）。24、完整測定大腸菌群時間是（72）小時。25、肉毒桿菌釋放的是（外毒素）。26、對面包黏絲病有抑制作用的是（丙酸鈣）27、果汁，果酒一般可用（亞硫酸鈉）防腐。28、飲料常用防腐劑是（苯甲酸鈉）。29、最常用的食品殺菌方法是（巴氏殺菌）。30、同樣百分濃度蔗糖的滲透性比食鹽（差10）。31、GMP是（良好生產(chǎn)規(guī)范）。32、屬于厭氧微生物的是（肉毒桿菌）。33、酒精消毒的最佳濃度是（75）％。34、下列是非細胞結構微生物的是（病毒）。35、第一個用固體培養(yǎng)基的是（科赫）。36、芽孢抗熱的主要成分是（DPA）。379、飲料常用防腐劑是（苯甲酸鈉）。80、長效牛奶采用殺菌方法是（超高溫瞬時殺菌）。81、同樣濃度的葡萄糖的滲透性比食鹽（?。?2、一般情況下微生物種類數(shù)量最多的地方是（土壤）。83、直接計數(shù)法計數(shù)比客觀實際的數(shù)值要（大）。84、下列是原核微生物的是（放線菌）。85、第一個發(fā)現(xiàn)微生物的是（列文虎克）。86、病原微生物學，是由（科赫）奠定了基礎。87、細胞壁的主要成分是（肽聚糖）。88、放線菌的菌落特征是（干燥、多皺）。89、病毒的主要繁殖方式是（復制）。90、曲霉孢子是（外生孢子）。91、哪些對病毒的描述是對的（非細胞結構）。92、病毒具有（一種核酸）。93、可以證明噬菌體存在的是（噬菌斑）94、能夠使細菌和放線菌裂解的是（裂性噬菌體）。95、可用于細菌鑒定和分型的是（噬菌體）。96、抵抗不良環(huán)境最強的微生物是（芽孢菌）。97、細菌總數(shù)測定的是每（100）毫升或克食品檢樣的大腸菌群最近似的值。98、測定大腸菌群數(shù)量的方法，選用的是（乳糖膽鹽）培養(yǎng)基。99、金黃色葡萄球菌產(chǎn)生的是（外毒素）毒素。100、對面包黏絲病有抑制作用的是（丙酸鈣）101、飲料常用防腐劑是（苯甲酸鈉）。102、酸性食品殺菌方法是（巴氏殺菌）。103、同樣濃度食鹽的滲透性比麥芽糖（大）。104、空氣中微生物種類數(shù)量最多的（革蘭氏陽性菌）。105、酸奶發(fā)酵常用的是（乳酸菌）。106、細菌缺乏哪一種結構仍可以存活（細胞壁）。107、自然界中微生物的類群和數(shù)量最多的是（化能異養(yǎng)微生物）。108、酒精消毒的最佳濃度是（75）％109、哪些對病毒的描述是對的（專性寄生）。110、病毒具有（酶系缺乏）。111、放線菌可用于（制抗生素）。112、可用于霉菌鑒定和分型的是（假根）。113、直接計數(shù)法測定的是（全部活細菌數(shù)）。114、第一個用瓊脂培養(yǎng)微生物的是（）115、發(fā)現(xiàn)核酸結構的是（沃森、克里克）奠定了基礎。116、莢膜的主要成分是（糖類）。117、測量酵母菌的大小用（微米）118、酵母的無性繁殖主要是（芽殖）。110、霉菌的主要繁殖方式是

簡介：食品微生物學經(jīng)典試題及答案單項選擇題1、下列是原核微生物的是細菌。2、第一個發(fā)現(xiàn)微生物的是列文虎克3、微生物學發(fā)展的第二時期是巴斯德、科赫奠定了基礎。4、莢膜的主要成分是糖類。5、測量細菌的大小用微米。6、細胞壁的主要成分是肽聚糖。7、培養(yǎng)酵母用麥芽糖瓊脂。8、一般培養(yǎng)基滅菌的條件是121C15分。9、放線菌的菌落特征是干燥、多皺。10、酵母的無性繁殖主要是芽殖。11、霉菌的主要繁殖方式是孢子生殖。12、曲霉孢子是外生孢子。13、霉菌菌落比酵母的要大。14、哪些對病毒的描述是錯的對抗生素敏感。15、病毒具有一種核酸。16、噬菌體可用于診斷和治療。17、能夠使細菌和放線菌裂解的是裂性噬菌體。18、可用于細菌鑒定和分型的是噬菌體。19、細菌總數(shù)測定的是全部活細菌數(shù)。20、大腸菌群數(shù)量測定的100毫升或克食品檢樣的大腸菌群最近似的值。21、測定大腸菌群數(shù)量的方法選用的是37C22、培養(yǎng)酵母菌的溫度常選28C23、配制固體培養(yǎng)基加瓊脂量是2。24、完整測定大腸菌群時間是72小時。25、肉毒桿菌釋放的是外毒素。26、對面包黏絲病有抑制作用的是丙酸鈣27、果汁果酒一般可用亞硫酸鈉防腐。28、飲料常用防腐劑是苯甲酸鈉。29、最常用的食品殺菌方法是巴氏殺菌。30、同樣百分濃度蔗糖的滲透性比食鹽差10。31、GMP是良好生產(chǎn)規(guī)范。32、屬于厭氧微生物的是肉毒桿菌。33、酒精消毒的最佳濃度是75。34、下列是非細胞結構微生物的是病毒。67、哪些對病毒的描述是錯的對抗生素敏感。68、病毒具有一種核酸。69、噬菌體可用于診斷和治療。70、能夠使細菌和放線菌裂解的是裂性噬菌體。71、可用于病毒鑒定的是包含體。72、細菌總數(shù)測定的是全部活細菌數(shù)。73、平板計數(shù)法的方法選用的是37C74、固體培養(yǎng)基加瓊脂量是2。75、完整的大腸菌群數(shù)量測定時間是72小時。76、肉毒桿菌釋放的是外毒素毒素。77、對面包黏絲病有抑制作用的是丙酸鈣78、果汁果酒一般可用亞硫酸鈉防腐。79、飲料常用防腐劑是苯甲酸鈉。80、長效牛奶采用殺菌方法是超高溫瞬時殺菌。81、同樣濃度的葡萄糖的滲透性比食鹽小。82、一般情況下微生物種類數(shù)量最多的地方是土壤。83、直接計數(shù)法計數(shù)比客觀實際的數(shù)值要大。84、下列是原核微生物的是放線菌。85、第一個發(fā)現(xiàn)微生物的是列文虎克。86、病原微生物學是由科赫奠定了基礎。87、細胞壁的主要成分是肽聚糖。88、放線菌的菌落特征是干燥、多皺。89、病毒的主要繁殖方式是復制。90、曲霉孢子是外生孢子。91、哪些對病毒的描述是對的非細胞結構。92、病毒具有一種核酸。93、可以證明噬菌體存在的是噬菌斑94、能夠使細菌和放線菌裂解的是裂性噬菌體。

簡介：選擇題選擇題1菌種的分離、培養(yǎng)、接種、染色等研究微生物的技術的發(fā)明者是A巴斯德B柯赫C呂文虎克D別依林克1通常鏈霉菌可通過以下哪種方式進行繁殖A出芽繁殖B分生孢子C孢囊孢子D芽孢子2BACILLUSSUBTILIS在生長發(fā)育的一定時期能形成A孢囊B芽胞C伴胞晶體D子實體3芽胞細菌的繁殖是依靠A芽胞B裂殖C出芽D藻殖段4細菌的繁殖首先開始于A膜的分裂B壁的分裂CDNA的復制5下列微生物屬于原核微生物的是A細菌B霉菌酵母菌D單細胞藻6自然界中分離到的細菌，形態(tài)各種各樣其中種類最多的是A球菌B螺旋菌C放線菌D桿菌7MICROCOCCUS的譯名為A鏈球菌屬B微球菌屬C小單胞菌屬D四聯(lián)球菌8放線菌的菌體呈分枝絲狀體，因此它是一種A多細胞的真核微生物B單細胞真核微生物C多核的原核微生物D無壁的原核微生物9在細菌細胞中能量代謝場所是A細胞膜B線粒體C核蛋白體D質(zhì)粒10細菌芽胞抗熱性強是因為含有A聚–羥基丁酸B26吡啶二羧酸C氨基酸D胞壁酸11BACILLUSTHURINGIENSIS在形成芽胞同時還能形成一種菱形或正方形的物質(zhì)，稱之為A孢囊B伴胞晶體C核蛋白質(zhì)D附加體12G細菌細胞壁的結構為一層，含有的特有成分是A脂多糖B脂蛋白C磷壁酸D核蛋白13細菌的鞭毛是A細菌運動的唯一器官B細菌的一種運動器官C細菌的一種交配器官D細菌的繁殖器14細菌細胞內(nèi)常見的內(nèi)含物有A線粒體B附加體C肝糖粒15ECOLI肽聚糖雙糖亞單位交聯(lián)間的肽間橋為A氫鍵B肽鍵C甘氨酸五肽16在下列原核生物分類中屬古細菌類的細菌是A大腸桿菌B枝原體C放線菌D產(chǎn)甲烷細菌17細菌的細胞核是A裸露的DNA分子BDNA與組蛋白結合的無核膜包圍的染色體CRNA與組蛋白結合的無核膜包圍的染色體A擔孢子B子囊孢子C接合孢子D卵孢子13子囊孢子總是A單倍體B二倍體14某些酵母菌上下兩細胞連接處呈細腰狀，通常稱為A有隔菌絲B無隔菌絲C假菌絲15酵母菌在分類上屬于A子囊菌亞門B擔子菌亞門C子囊菌亞門和擔子菌亞門D接合菌亞門16寄生真菌靠吸器吸收養(yǎng)料，吸器存在于A寄主體外表上B寄主細胞外表上C寄主細胞間隙中D寄主細胞里面17指出錯誤的回答，青霉菌的無性結構有A足細胞B分生孢子梗C梗基D副枝18指出錯誤的回答，曲霉菌的形態(tài)結構有A足細胞B分生孢子梗C小梗D副枝19酵母菌細胞壁中含有A甘露聚糖B葡聚糖CA和BD幾丁質(zhì)20啤酒酵母菌的生活史屬A單倍體型B雙倍體型C單雙倍體型D雙核體型21指出錯誤的回答，厚垣孢子是A有性生殖產(chǎn)生的B是由有隔菌絲的真菌形成的C不脫落D在真菌中經(jīng)常發(fā)生22指出正確的回答在擔子菌亞門的真菌中，擔孢子的形成在（）后。A體細胞配合B鎖狀聯(lián)合的形成C產(chǎn)囊絲鉤的形成D減數(shù)分裂1多數(shù)病毒粒子的大小為A10NMB100NM左右C300NMD10300NM2病毒的大小以為單位量度。AMMBNMCMM3ECOLIT4噬菌體的典型外形是A球形B蝌蚪形C桿狀D絲狀4病毒殼體的組成成份是A核酸B蛋白質(zhì)C多糖D脂類5病毒含有的核酸通常是ADNA和RNABDNA或RNACDNADRNA6最先發(fā)現(xiàn)病毒的是A巴斯德B柯赫C伊萬諾夫斯基D呂文虎克7在70℃時病毒的保存時間為A以小時計B以天計C以月計D以年計8噬菌體是專性寄生于（）的寄生物。A細菌B酵母菌C霉菌9病毒的分類目前以（）為主。A寄主B形態(tài)C核酸10最先提純的結晶病毒是A煙草花葉病毒B痘苗病毒C皰疹病毒D流感病毒11在溶源細胞中，原噬菌體以（）狀態(tài)存在于宿主細胞中。A游離于細胞質(zhì)中B缺陷噬菌體C插入寄主染色體

簡介：1123第一章緒論1生命體細胞作為基本單位的組構，有哪些重要的特點細胞是生命的基本單元。生物有機體（除病毒外）都是由細胞組成的。細胞由一層質(zhì)膜包被質(zhì)膜將細胞與環(huán)境分隔開來，并成為它與環(huán)境之間進行物質(zhì)與能量轉換的關口。在化學組成上，細胞與無生命物體的不同在于細胞中除了含有大量的水外，還含有種類繁多的有機分子，特別是起關鍵作用的生物大分子核酸、蛋白質(zhì)、多糖、脂質(zhì)。由這些分子構成的細胞是結構異常復雜且高度有序的系統(tǒng)，在一個細胞中除了可以進行生命所需要的全部基本新陳代謝活動外，還各有特定的功能。整個生物體的生命活動有賴于其組成細胞的功能的總和。2分類階元和界的劃分生物分界代表性人物如二界系統(tǒng)為瑞典林奈。界、門、綱、目、科、屬、種（遞減）林奈二界系統(tǒng)、?？藸栐锝缁萏乜宋褰缭松锝纭⒃锝?、真菌界、植物界、動物界3在五界系統(tǒng)中，為什么沒有病毒五界系統(tǒng)根據(jù)細胞結構和營養(yǎng)類型將生物分為五界，病毒不具細胞形態(tài)，由蛋白質(zhì)和核酸組成，沒有實現(xiàn)新陳代謝所必需的基本系統(tǒng)，不包含在五界系統(tǒng)中。4在二界或三界系統(tǒng)中，細菌、真菌均隸屬于植物界，在五界系統(tǒng)中，它們都從植物界中劃出來，或獨立或為原核生物界和真菌，這樣做的理由是什么二界系統(tǒng)中，細菌和藍藻屬于植物界，但是它們的細胞結構顯然處于較低水平，它們沒有完整的細胞核（染色體是一個環(huán)狀的DNA分子，沒有核膜）也沒有線粒體、高爾基體等細胞器。藍藻和某些細菌有光合作用，但不應因此就把它們放入植物界。它們有光合作用只是說明生命在進化到原核生物階段就有利用光能，進行光合作用的能力。真菌是是進化的產(chǎn)物，腐食營養(yǎng)，獨立為真菌界。6分子生物學的發(fā)展如何深化和發(fā)展了人們關于生物界統(tǒng)一性的認識分子生物學告訴我們，所有生物的細胞是由相同的組分如核酸、蛋白質(zhì)、多糖等分子所構建的。細胞內(nèi)代謝過程中每一個化學反應都是由酶所催化的，而酶是一種蛋白質(zhì)。所有的蛋白質(zhì)都由20種氨基酸以肽鍵的方式連接而成。各種不同蛋白質(zhì)的功能是由蛋白質(zhì)長鏈中氨基酸的序列決定的。所有生物的遺傳物質(zhì)都是DNA或RNA。所有DNA都是由相同的4種核苷酸以磷酸二酯鍵的方式連接而成的長鏈。2條互補的長鏈形成DNA雙螺旋分子。沿著DNA長鏈的核苷酸序列決定蛋白質(zhì)長鏈上氨基酸的序列，進而為每一個物種、每一個生物體編制藍圖。生物體的代謝、生長、發(fā)育等過程都受到來自DNA的信息的調(diào)控。在所有的生物中，遺傳信息的方向是相同的，使用的是同一種遺傳密碼。這些事實使人們進一步認識到DNA→RNA→蛋白質(zhì)的遺傳系統(tǒng)是生物界的統(tǒng)一基礎。這就令人信服地證明所有生物有一個共同的由來，各種各樣的生物彼此之間都有或近或遠的親緣關系，整個生物界是一個多分支的物種進化系譜。8為什么說地球上的生態(tài)系統(tǒng)是目前人類生存的地球表層環(huán)境得以維持的支持系統(tǒng)地球形成之初，以酸性氣體為主，經(jīng)歷37億年的生物和環(huán)境協(xié)同進化，使今日地球的表面環(huán)境作為我們的家園“恰到好處”，大氣中的C02濃度正好使地表溫度適合生物生存，并有效地防止了地表液態(tài)水的過度蒸發(fā)，保持了一個生物生存的液態(tài)水圈；大氣中含有足夠的分子態(tài)氧，保證了生物的呼吸和巖石的風化，而巖石的風化提供了生命所需的礦物質(zhì)，并且大氣中的3323丙一亮一天冬一酪一擷一亮酪一擷一亮N一甘一脯一亮天冬一酪一擷一亮N一甘一脯一亮一丙一亮試推測此多肽的一級結構。根據(jù)題意，蛋白質(zhì)的N末端氨基酸殘基是甘氨酸。3種不同的酶將此多肽消化后，多肽鏈斷裂成5肽段。用重疊法確定多肽段在多肽鏈中的次序。此多肽的一級結構為N甘一脯一亮一丙一亮一天冬一酪一擷一亮。第三章細胞結構與細胞通訊2原核細胞和真核細胞的差別關鍵何在原核細胞在地球上出現(xiàn)最早，沒有膜包被的細胞核，只有一個擬核區(qū)，染色體為環(huán)形的DNA分子。真核細胞有細胞核，核膜包被，內(nèi)有核仁。原核細胞和真核細胞的差別關鍵是無核膜、核仁等結構，沒有復雜的細胞器分化。3植物一般不能運動，其細胞的結構如何適應于這種特性植物細胞最外圍有一層一定彈性和硬度的細胞壁（CELLWALL，具有支持、防御與保護的作用。葉綠體含有葉綠素等色素，是光合作用的細胞器，為植物的生長發(fā)育提供物質(zhì)能量。4動物能夠運動，其細胞結構如何適應于這種特性動物細胞有細胞膜，細胞質(zhì)，細胞核。細胞膜由單位膜構成，便于細胞內(nèi)外物質(zhì)運輸。細胞質(zhì)包括細胞質(zhì)基質(zhì)和細胞器。動物細胞的細胞器包括內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，線粒體，高爾基體，核糖體，溶酶體，中心體。5細胞器的出現(xiàn)和分工與生物由簡單進化到復雜有什么關系單細胞生物出現(xiàn)簡單分化的細胞器，通過各組成成分的協(xié)調(diào)配合完成生命活動。生物由簡單進化到復雜，細胞器增多，分工越來越細。6動、植物細胞的質(zhì)膜在成分和功能上基本相同，其生物學意義何在質(zhì)膜是由脂類和蛋白質(zhì)分子以非共價鍵組合裝配而成。骨架是磷脂類的雙分子層，脂雙層的表面是磷脂分子的親水端，內(nèi)部是磷脂分子疏水的脂肪酸鏈。脂雙層有屏障作用，使膜兩側的水溶性物質(zhì)不能自由通過。脂雙層中還有以不同方式鑲嵌其間的蛋白質(zhì)分子，生物膜的許多重要功能都是由這些蛋白質(zhì)分子來執(zhí)行的。有的蛋白質(zhì)分子和物質(zhì)運輸有關，有的本身就是酶或重要的電子傳遞體，有的是激素或其他有生物學活性物質(zhì)的受體。動、植物細胞的質(zhì)膜在成分和功能上基本相同，例如跨膜物質(zhì)運輸、細胞信息傳遞、細胞識別、細胞免疫、細胞分化以及激素的作用等等都與膜的流動性密切相關。動、植物細胞的質(zhì)膜在成分和功能上的同一性，有益于我們認識生命現(xiàn)象的有序性和統(tǒng)一性。7最近發(fā)現(xiàn)了食欲肽（EXIN，一種似乎能調(diào)節(jié)任何動物食欲的信號分子。在饑餓的人體內(nèi)，可測出血液中食欲肽濃度較高。利用你關于膜受體和信號轉導途徑的知識，試著提出利用食欲肽治療厭食癥和肥胖癥的可能療法的建議。細胞通過胞膜或胞內(nèi)受體感受信息分子的刺激，經(jīng)細胞內(nèi)信號轉導系統(tǒng)轉換，會影響細胞生物