簡介：第一部分酒精對肝炎病毒感染率影響的調(diào)查研究1目的研究飲酒對肝炎病毒感染率影響，進一步探討飲酒量大小與肝炎病毒感染率的關系。2方法采用整群隨機抽樣方法，對山東省棗莊礦物局一部分健康查體人員進行調(diào)查。我們選取2003年8月查體男性職工作為樣本，進行抽樣研究。具體方法為采用發(fā)放問卷式，要求被調(diào)查人員嚴格地如實地填寫問卷內(nèi)容，然后回收問卷。調(diào)查同時，收集棗莊各大醫(yī)院市立醫(yī)院、市中醫(yī)院及礦物局三大醫(yī)院共五所醫(yī)院及齊魯醫(yī)院被收入院且確診為酒精性肝病ALD的患者，收集相關資料，然后進入綜合比較。3設計根據(jù)上述標準確定查體人數(shù)為1431例，將飲酒者按飲酒量的大小分成三組，即輕度飲酒組、中度飲酒及重度飲酒組。再調(diào)查三組中肝炎病毒感染人數(shù)為多少，計算其構(gòu)成比。同時將酒精性肝病中肝炎病毒感染者亦篩選出來，同樣進行構(gòu)成比比較，觀察四組有無不同。采用SPSS建立數(shù)據(jù)庫，進行數(shù)據(jù)錄入，進入卡方檢驗。4結(jié)果1431例查體人群與215例酒精性肝病患者在吸煙對肝炎病毒感染方面無明顯差異。四組中肝炎病毒感染陽性率有明顯不同，其中，輕度飲酒的第一組與中度飲酒的第二組的肝炎病毒感染陽性率比較上無明顯差異P005，但與酒精性肝病組肝炎病毒感染陽性率比較有差異P5結(jié)論飲酒可影響肝炎病毒的感染陽性率，不同飲酒量可導致不同的肝炎病毒感染陽性率；有肝臟損害的肝炎病毒感染陽性率較單純嗜酒者更高。

簡介：目的1確定2005～2006年江蘇省人群中流感病毒優(yōu)勢株，并研究從2000～2006年江蘇省分離的人流感病毒相對國內(nèi)國際流行株的變異情況；2了解當前江蘇省人群中H1N1亞型、H3N2亞型和B型流感病毒的抗體水平，描述其在人群中的分布特征，并找出影響流感病毒感染的危險因素。方法1RTPCR擴增2000～2006年江蘇省分離的部分代表毒株的HA1區(qū)基因，對擴增產(chǎn)物進行序列測定，與GENEBANK中的代表株進行序列分析及進化分析；22006年7～10月份，在江蘇省徐州、無錫兩地區(qū)分別采集自然人群血清517份、493份，通過微量半加敏血凝抑制實驗HEMAGGLUTINATIONINHIBITIONTEST，HAI檢測其體內(nèi)流感病毒抗體；3用SAS81分析軟件包STM模塊進行數(shù)據(jù)分析。對抗體陽性率的單因素分析采用X檢驗，對抗體幾何滴度GMT的檢驗采用方差分析。HA1區(qū)基因序列分析等采用DNASTAR50軟件。結(jié)果12005～2006年流感流行季節(jié)，流感樣病例數(shù)占門診總病例數(shù)的355％，流感樣病例疫情波動相對平穩(wěn)，未出現(xiàn)較為明顯的冬春峰；21458例疑似流感樣患者中共分離出288株流感病毒，其中H1N1亞型213株，H3N2亞型14株，B型19株，待鑒定42株；3HA1基因核苷酸及其推導的氨基酸序列及基因進化分析表明，2000～2006年分離的H1N1亞型流感病毒為ANEWCALEDONIA2099H1N1類似株，H3N2亞型為ACALIFNIA72004H3N2類似株，B型流行優(yōu)勢株在2005年已從YAMAGATA樣流感病毒轉(zhuǎn)為VICTIA樣毒株；4江蘇省人群血清抗體H1N1亞型抗體總陽性率為6446％，保護率為1703％，幾何平均滴度GMT為13511，H3N2亞型抗體總陽性率為3614％，保護率為816％，幾何平均滴度GMT為1797，B型抗體總陽性率為5772％，保護率為2416％，幾何平均滴度GMT為12405；5江蘇省H1N1亞型、H3N2亞型和B型抗體水平均存在地區(qū)、年齡差異，徐州地區(qū)人群H1N1亞型、H3N2亞型抗體水平高于無錫，無錫B型抗體水平高于徐州地區(qū)，25歲以下年齡組抗體水平較高。結(jié)論1江蘇省2005～2006年H1N1亞型流感病毒成為優(yōu)勢株；2江蘇省近年來H1N1亞型、B型流感病毒的流行強度大，人群對H1N1亞型、B型流感病毒抗體水平較高，如果不發(fā)生大的變異，H1N1亞型、B型流感流行的可能性不大；對H3N2亞型流感病毒的抵抗力較低，應警惕H3N2亞型流感病毒進一步發(fā)生變異以引起流行甚至爆發(fā)的可能。

簡介：目的采用對照、隨機研究，臨床觀察心肌康方案對病毒性心肌炎患者急性期心電圖、心肌損傷標記物及動態(tài)心電圖的影響，評價心肌康方案治療病毒性心肌炎急性期療效，從而為形成病毒性心肌炎急性期系統(tǒng)、規(guī)范的診療方案提供臨床依據(jù)。方法本研究收集自2009年3月至2012年3月河南中醫(yī)學院第二臨床醫(yī)學院、黑龍江省中醫(yī)研究院、上海中醫(yī)藥大學附屬龍華醫(yī)院住院及門診病人共157例，全部病例均符合1998年全國心肌病心肌炎專題小組提出的成人急性病毒性心肌炎診斷參考標準。通過多中心隨機分為對照組和試驗組。對照組76例，試驗組81例。兩組病例均有不同程度的心悸、胸悶等癥狀。對照組給予常規(guī)西藥治療，輔酶Q10片10MG、3次日口服，維生素C片02G、3次日口服，療程30天；試驗組根據(jù)中醫(yī)辨證結(jié)果給予相應的中醫(yī)心肌康方案治療，療程30天；同時給予兩組基礎治療措施包括充分休息、減少活動、易消化飲食、多進富含維生素及蛋白質(zhì)的食物，靜脈應用極化液10氯化鉀15ML及胰島素8U加入到10葡萄糖500ML、肌苷400MG，每日一次，療程14天。觀察患者心電圖包括常規(guī)及動態(tài)心電圖、心肌酶學變化。結(jié)果1兩組心電圖療效分析，治療前兩組心電圖出現(xiàn)ST段改變的患者，試驗組41例，對照組32例，治療后試驗組有效率為8250，對照組5938，兩組心電圖ST段療效比較，試驗組優(yōu)于對照組P2兩組動態(tài)心電圖療效分析，治療前動態(tài)心電圖正常率，試驗組為910，對照組為959，兩組比較無統(tǒng)計學意義P005，治療后試驗組為5972，對照組為5156，兩組比較無統(tǒng)計學意義P005，與治療前組內(nèi)比較，兩組均有統(tǒng)計學意義P3通過對早搏次數(shù)的觀察，結(jié)果治療前與治療后數(shù)值對比無統(tǒng)計學意義P005，顯示未能減少早搏次數(shù)，多數(shù)認為與樣本量少有關。4心肌損傷標記物療效分析，兩組治療前后心肌損傷標記物肌鈣蛋白I和肌酸激酶同工酶CKMB比較，均無統(tǒng)計學意義P005，在病毒性心肌炎急性期，因心肌細胞的損害，生化檢查可有心肌損傷標記物的升高，其心肌標記物的升高一般持續(xù)714天左右可自行恢復，這可能與病毒性心肌炎疾病本身特點有關，由于該研究觀察病程較短30天，多數(shù)患者心肌酶已恢復正常。5兩組綜合療效總有效率，試驗組痊愈15例，顯效30例，有效28例，無效6例，總有效率9241；對照組痊愈9例，顯效15例，有效32例，無效13例，總有效率8116，兩組綜合總有效率及等級療效比較，試驗組綜合療效優(yōu)于對照組，差異有統(tǒng)計學意義P結(jié)論1臨床研究顯示心肌康方案可明顯改善成人急性病毒性心肌炎心電圖和動態(tài)心電圖病理改變。2對過早搏動的研究，由于樣本量較小，各指標與對照組無統(tǒng)計學意義。3心肌康方案對成人急性病毒性心肌炎心肌損傷標志物的干預，由于觀察時間性及疾病本身特點，兩組分析無統(tǒng)計學意義，有待進一步研究。4心肌康方案對成人急性病毒性心肌炎試驗組綜合療效優(yōu)于對照組。

簡介：人類乙型肝炎病毒HEPATICBVIRUSHBV是一種嗜肝非細胞毒性DNA病毒。根據(jù)外膜蛋白上氨基酸序列的不同HBV至少可分為四種血清亞型AYW、ADR、AYR和ADW在我國主要以ADR亞型為主。HBV感染嚴重威脅著人類的健康目前全世界大約有35億人感染HBV尤其在亞洲和非洲其感染率很高。在我國HBV的感染率約為10％現(xiàn)有大約3000萬慢性乙型肝炎患者。由于每個人的體質(zhì)不同所以人類乙型肝炎病毒導致的肝病嚴重程度也不一樣。有些人在感染乙肝后能在沒有明顯臨床病癥的情況下從血液中清除病毒或者在感染急性肝炎的情況下痊愈而不留下長期的臨床后遺癥；而有些患者就不能清除病毒并發(fā)展為慢性感染大多數(shù)慢性感染患者處于無癥狀狀態(tài)而沒有生命危險1030％患者發(fā)展為肝硬化并可能進展為肝癌。由于缺乏比較理想的HBV感染模型嚴重制約了對HBV發(fā)病機制和抗病毒治療的深入研究。研究能夠表達HBV基因或復制整個病毒基因組的一些動物模型比如與肝DNA病毒屬感染相關的動物模型以及轉(zhuǎn)基因小鼠模型能夠使我們對HBV感染有更好的認識。此外在活體外通過對人和黑猩猩抗原特異T細胞的直接量化來分析免疫現(xiàn)象的能力也能夠增加我們對于HBV發(fā)病機理的認識。HBV轉(zhuǎn)基因小鼠對研究乙肝的發(fā)病機制起了極大的推動作用國內(nèi)外學者相繼建立了一些比較理想的乙肝轉(zhuǎn)基因動物模型。本實驗室自1992開始相繼研發(fā)了多種品系的乙肝轉(zhuǎn)基因小鼠其中整合雙拷貝的全長HBV基因組DNAADR亞型的乙肝轉(zhuǎn)基因小鼠C57TGNHBVADR20SMMU“3號”品系具有類似慢性無癥狀HBV攜帶者CHRONICASYMPTOMATICHBVCARRIER的多種生物學特性。這一品系的主要特點有HBV基因在小鼠基因組中整合并穩(wěn)定遺傳；血清HBSAG、HBEAG陽性；抗HBS和抗HBE均陰性；肝組織中有HBSAG、HBCAG、X蛋白表達；血清中存在HBVDNA肝組織中存在病毒樣顆粒。但與以往研究結(jié)果不同部分轉(zhuǎn)基因小鼠肝組織出現(xiàn)了輕重不等的病理學改變。本課題利用我們實驗室建立并優(yōu)選的乙肝全基因組轉(zhuǎn)基因小鼠C57TGNHBVDR20SMMU“3號”品系的F14F20代小鼠為實驗對象從蛋白質(zhì)、病理學和免疫學角度綜合分析該品系轉(zhuǎn)基因小鼠的免疫病理學特性使其成為可應用于乙型肝炎病毒相關研究的實驗動物模型。通過130例SPF級乙型肝炎轉(zhuǎn)基因小鼠和10只同齡正常C57BL6小鼠肝組織進行HBSAG表達、HE染色和浸銀染色分析光鏡觀察并按病理改變嚴重程度、月齡等分組分析肝臟病變、月齡、性別、HBSAG表達等因素之間的關系。結(jié)果顯示與對照小鼠相比轉(zhuǎn)基因小鼠肝組織出現(xiàn)了類似人慢性乙型肝炎攜帶者的病理改變6077％79130的乙肝小鼠出現(xiàn)比較明顯的肝細胞變性壞死、單個核細胞浸潤和纖維增生。不同月齡組的轉(zhuǎn)基因小鼠肝組織學表現(xiàn)各不相同且與月齡正相關。而肝組織的病理改變與性別、病毒蛋白的表達并無相關性。這些結(jié)果表明轉(zhuǎn)基因小鼠發(fā)生了與人類慢性HBV無癥狀攜帶者相似的肝組織病理性損傷總體為輕度慢性肝炎。選取出現(xiàn)單個核細胞浸潤的肝組織進行免疫組織化學檢測發(fā)現(xiàn)肝組織中浸潤的單個核細胞大多為CD3、CD4T細胞。通過本課題的研究提示我們我們實驗室建立的C57TGNHBVDR20SMMU“3號”品系乙肝全基因組轉(zhuǎn)基因小鼠肝臟產(chǎn)生類似慢性無癥狀HBV攜帶者的病理學變化病理改變與病毒蛋白表達無相關性與小鼠月齡呈正相關性。CD3、CD4T細胞參與了肝臟損傷的過程。本研究證實該品系轉(zhuǎn)基因小鼠可作為人類慢性無癥狀HBV攜帶者的實驗動物模型用來探討人類的發(fā)病機制及其防治研究。

簡介：腎綜合征出血熱（HFRS）是一種由漢坦病毒引起的急性傳染病，臨床上以發(fā)熱、出血和急性腎功能損害為主要特征。我國是HFRS危害最嚴重的國家，年發(fā)病人數(shù)為5～10萬人，其流行范圍廣、發(fā)病人數(shù)多、病死率較高。臨床上尚缺乏特異有效的治療方法。國內(nèi)外近年來雖已研制出HFRS的滅活疫苗，但從部分人群試用的情況來看，該類疫苗還存在明顯不足，尤其是不能有效地刺激細胞免疫應答。因此仍需針對滅活疫苗存在的不足，進一步研究更為有效的HFRS新型疫苗。漢坦病毒是一種有囊膜的單股負鏈RNA病毒，基因組分為L、M、S三個節(jié)段，分別編碼病毒的RNA依賴的RNA聚合酶、包膜糖蛋白（G1和G2）以及核衣殼蛋白（NP）。以往研究表明，漢坦病毒的M基因編碼的包膜糖蛋白（GP）可刺激機體產(chǎn)生中和抗體，而對感染動物和人體起到保護作用；但GP免疫原性較弱，刺激產(chǎn)生的抗體出現(xiàn)晚，滴度不高。NP是該病毒結(jié)構(gòu)蛋白中免疫原性最強的，其刺激機體產(chǎn)生的特異性抗體出現(xiàn)早、滴度高、維持時間長，并且還有誘導機體細胞免疫應答的作用。由于漢坦病毒中和抗原表位主要存在于病毒GP上，目前HFRS基因工程疫苗的基礎研究主要集中于GP。該方面的研究雖已取得較大進展，但由于GP相對較弱的免疫原性，故免疫效果仍不理想。國內(nèi)外研究表明，漢坦病毒GP和NP在誘導機體免疫應答中可能均起重要作用，因此，如何發(fā)揮其不同結(jié)構(gòu)蛋白在誘導機體免疫應答中的優(yōu)勢互補作用，是HFRS基因工程疫苗研究中亟待解決的問題。本室前期曾將漢灘病毒（HTNV）76118株的M基因分別與編碼NP氨基端AA1～247的S基因片段（S07，編碼NP主要抗原區(qū)段）拼接，利用桿狀病毒和腺病毒表達系統(tǒng)進行融合表達以及表達產(chǎn)物的免疫學分析。結(jié)果證實HTNV76118株G1S07和G2S07嵌合基因均能刺激機體的體液免疫和細胞免疫應答。然而在研究中我們也發(fā)現(xiàn)了一些問題，如盡管免疫小鼠后各表達系統(tǒng)均能刺激機體產(chǎn)生體液及細胞免疫應答，且腺病毒表達系統(tǒng)的效果要優(yōu)于其他系統(tǒng)，但是整體的免疫水平還不十分理想，特別是刺激機體細胞免疫應答的水平不高。國內(nèi)外已證實漢坦病毒感染后以CTL為主的T細胞應答對于機體保護有重要作用，因此利用漢坦病毒CTL表位結(jié)合結(jié)構(gòu)蛋白構(gòu)建疫苗可能是一種可行的方案。本研究在前期工作基礎上，利用基因重組技術，構(gòu)建了含有HTNVM基因（編碼糖蛋白G1、G2）和部分S基因（編碼NP主要抗原區(qū)段）以及S基因的多個CTL表位的多種重組腺病毒，在對這些重組腺病毒進行系統(tǒng)鑒定的基礎上，觀察了其刺激小鼠體液免疫和細胞免疫應答的能力。1、將HTNVG1S07和G2S07嵌合基因片段分別與合成的CTL表位串聯(lián)基因CTL1（表位間加間隔序列AAY）及CTL2（表位間不加間隔序列AAY）以不同組合方式克隆到腺病毒轉(zhuǎn)移載體PSHUTTLE中，CTL表位拼接于S073’端，通過酶切鑒定選取陽性克隆，分別命名為PG1S07CTL1、PG1S07CTL2、PG2S07CTL1、PG1S07CTL2。2、通過特異性的ICEUI和PISCEI酶切后將重組轉(zhuǎn)移載體與ADENOX載體病毒DNA相連，電轉(zhuǎn)化ECOLIJM109，并用PCR方法進行了篩選和鑒定，獲得重組腺病毒的DNA，轉(zhuǎn)染HEK293細胞得到重組腺病毒原種，分別命名為AG1S07CTL1、AG1S07CTL2、AG2S07CTL1、AG1S07CTL2。3、將各重組腺病毒經(jīng)CSCL密度梯度離心純化及測定滴度后分別感染HEK293和VEROE6細胞。IFA和ELISA檢測結(jié)果顯示，各重組腺病毒均可在細胞中表達相應HTNV抗原，表明CTL表位的插入并沒有影響相應抗原的表達及其與特異性單克隆抗體（MAB）的結(jié)合活性。WESTERNBLOT分析結(jié)果顯示，各重組腺病毒組在HEK293細胞中均可表達能與特異性MAB產(chǎn)生反應、相對分子質(zhì)量（MR）分別約為97KDA和80KDA的融合蛋白，與預期融合蛋白大小相符，表明重組腺病毒在HEK293細胞中表達的為完整的融合蛋白。4、以各重組腺病毒分別經(jīng)腹腔注射免疫BALBC小鼠，通過IFA、ELISA、微量細胞中和試驗、T淋巴細胞增殖試驗、CTL殺傷試驗、細胞因子檢測等方法觀察免疫效果。結(jié)果表明，各重組腺病毒免疫小鼠均可刺激機體產(chǎn)生低滴度的抗NP（1160∶～1320∶）和抗GP抗體（1∶20～1∶40），同時也可產(chǎn)生效價約1∶5～1∶40的低滴度中和抗體。各重組腺病毒均可誘導小鼠體內(nèi)特異的細胞免疫應答，其中AG2S07CTL1免疫組小鼠脾細胞對NP及GP的增殖指數(shù)明顯高于對照組；AG1S07CTL2、AG2S07CTL1、AG2S07CTL2組增殖指數(shù)也都略高于AG1S07和AG2S07組，表明加有CTL多表位的重組腺病毒能更有效地刺激小鼠的細胞免疫應答。CTL殺傷試驗的結(jié)果表明，各重組腺病毒免疫組在不同的效靶比條件下均可誘導針對靶細胞的特異性殺傷效應，并隨著效靶比的提高，殺傷效應也相應提高；其中含有CTL多表位的四種重組腺病毒免疫所誘導的CTL殺傷效應明顯高于不含CTL表位的兩種重組腺病毒。對在CTL多表位間加入或不加入間隔序列AAY的各重組腺病毒的比較來看，在CTL多表位間加入間隔序列AAY的重組腺病毒免疫小鼠能產(chǎn)生更高的細胞免疫應答，表明間隔序列AAY對于各CTL表位的分隔能提高重組腺病毒的免疫效果。對各重組腺病毒免疫小鼠血清中細胞因子檢測的結(jié)果顯示，各重組腺病毒均可刺激TH1類細胞因子（INFΓ、IL2、IL12）水平的提高，而TH2類細胞因子水平變化不明顯。說明重組腺病毒免疫小鼠后可以刺激機體TH1類細胞的優(yōu)勢應答，從而有助于提高小鼠的細胞免疫應答能力。

簡介：福建醫(yī)科大學博士學位論文慢病毒介導BCRABL基因長期沉默對K562細胞生物學特性與姜黃素抗腫瘤作用影響及其相關機制研究姓名吳枝娟申請學位級別博士專業(yè)藥理學（腫瘤藥理）指導教師許建華20090401、BER／ABL基因長期沉默對K562細胞生物學特性及榴關基因液達的影響B(tài)ER／ABT墓囂怒專翁爿＆發(fā)生、發(fā)震、轉(zhuǎn)髑整窩褥關煞瘓基篷。BCR／ABL基霞長囊拜缺席“，可能導致K562細胞各種生物學特讎及相關信號分子表達的變能。本部分，我們羹BCR／AB|基囂長鬻漂默辯B／AK562鬈熬勢模型，與委鬻黯照蕤K562燕魏及空冀囂對照的EGFPK562細胞進行比較，分析冀主要生物學特性及信號分予的變化。磷究方法；1≥鬟交簦染慧注襝溺熬魏壤墓篷辦變霓；2集薄綹爨法黧察ILNAI對集落形成能力的影響；3聯(lián)苯胺染色觀察細胞分化；4流式細胞儀分析細胞周麓變純；耋≥ELISA裝撿測蠹囊C酸激簿活縫；≤≤≥AOEB、HEOCHST33342染毽麓察纓胞凋亡7比悒法檢測CASPASE。3、CASPASE9活性；8WESTERNBLOTTING法觀察RNAI黠囊麓增疆灞亡檁關臻母勢子瓣影璃。絡果顯示；1BCR／ABLRNAI顯著抑制K562綱胞增殖，細胞倍增時間明恩延長；2≥BCR／ABLRNAI攆裁絮臆集薄形成，纂落澎袋簿镅拳遮籍越鞴；3BER／ABT輪漱I誘導K562細胞廊成熟紅添分化，聯(lián)苯胺染色陽性辮達2483％；4BCR／ABL烈越使纘麓藺裁避滯在S鬻，密現(xiàn)灝亡的受二贊體蜂；≤5BCR／ABL裝鬻轟I愛懿氮酸激黧活性降低約4188％；6BCR／ABLRNAI誘鐐K562細胞凋亡，自發(fā)凋亡率達忿667％；≯≥BCR／ABTRNAI簸發(fā)線粒律CYTC釋艘，CASPASE。3及CASPASE。9活襤提嵩，敝線糙體途襁誘導綱胞凋亡；8BCR／ABLRNAI下調(diào)K562細胞SRC、PSRC、RAF1、PERKU2、PSTARL、PSTAR5、P_P38、CMYC、BCL2幫HSP90含量，上調(diào)羚3、PKC及BAX禽爨，對ERKV2、PAKT、NF憋、HSP70影螭不太。墨、慢瘸棗舟導BERLABL基因長期沉默對K562纓腱裰鬣成癀的影嗡及棚關枧制研究幔瘸毒介譬戇RNA干擾，在律外能奧現(xiàn)BCR／ABL基巡熊長期沉默，抑制K562細胞增楚，誘導箕向成熟氯系緇魔分化，蓰避細脆褥亡。本幫分我們關注的是B／AK562纓照在襟鼠體內(nèi)然孬繼續(xù)保持黠BCR／ABL基因靛RNA干擾以殿成癌麓力彝捆美信號分子懿燮純。研巍方法；1皮下注射K562、EGFPK562、B／AK562纓悠，建立裸鼴凳耪移植瘸模型；2觀察戚瘤情況，比較瓣瘤體積；3稱爨離體瘩塊質(zhì)量、計算摔癀率；瓣瘸組綴冰練甥片觀察熒光；7

簡介：目的分析乙型肝炎病毒HEPATITISBVIRUS，HBV前S缺失突變在慢性乙型肝炎輕中度、慢性乙型肝炎重度和慢加急性肝衰竭患者中的檢出率分析前S1缺失突變病毒株體外復制力、HBSAG分泌、RNA水平、前S1抗原表達及其對表面抗原啟動子Ⅱ（SURFACEANTIGENPROMOTERⅡ，SPⅡ）轉(zhuǎn)錄活性的影響。方法研究對象為119例于2005年8月2008年5月在解放軍第三○二醫(yī)院診療的住院患者，包括38例慢性乙型肝炎（以下簡稱慢乙肝）輕中度、40例慢乙肝重度和41例慢加急性肝衰竭患者。從患者血清中提取HBVDNA，PCR擴增獲得HBV全長基因組序列，統(tǒng)計前S缺失突變的發(fā)生率。挑選有代表性的前S1缺失突變株及其相應對照的野生型HBV全長序列克隆至PGEMTEASY載體中。用BSPQⅠSCAⅠ雙酶切10倍HBV基因組，72小時后檢測體外病毒復制力及HBSAG表達水平，同樣的方法轉(zhuǎn)染HEPG2細胞，72小時后提取HBVRNA，用相對熒光定量法檢測RNA水平。構(gòu)建11倍PTRIEXHBVC表達載體，轉(zhuǎn)染HEPG2細胞，72小時后，酶聯(lián)免疫法測前S1抗原的表達。用PCR分別擴增含有前S1缺失突變型和野生型的HBVSPⅡ啟動子片段，構(gòu)建PGL3SPⅡ雙熒光素酶真核報告表達載體，轉(zhuǎn)染細胞48小時后檢測相對熒光素酶活性，分析前S1區(qū)缺失突變對重疊的SPⅡ啟動子區(qū)熒光素酶活性表達的影響。結(jié)果①HBV基因組前S缺失突變檢出率在慢乙肝輕中度、慢乙肝重度和慢加急性肝衰竭三組中逐漸遞增，分別為53％、125％和244％，差異有統(tǒng)計學意義P＜005。②與未缺失野生株相比，前S1缺失突變病毒株的體外復制力和分泌的HBSAG水平分別降低了69％和237％前S1缺失株的35KB前基因組RNA、24KBMRNA和21KBMRNA水平分別降低了8767％、9140％和8594％。③與未缺失野生株相比，前S1區(qū)缺失導致前S1抗原表達消失。④與未缺失野生型相比，前S1缺失突變使重疊的SPⅡ啟動子的轉(zhuǎn)錄活性降低了36％。結(jié)論HBV前S缺失突變發(fā)生率隨乙肝病程進展而逐漸升高，前S1缺失突變株病毒的體外復制力水平、HBSAG的分泌及RNA水平均不同程度降低，并導致前S1抗原表達消失同時前S1缺失突變導致重疊的SPⅡ啟動子轉(zhuǎn)錄活性降低。結(jié)果有助于闡明HBV前S1區(qū)缺失突變的臨床和病毒生物學意義。

簡介：浙江大學博士學位論文人類乳頭瘤病毒早期蛋白E5和E7病機制和免疫學特性研究姓名程浩申請學位級別博士專業(yè)腫瘤學指導教師鄭樹200061浙江大學博上學位論文解D53腫瘤抑制蛋白HPVL6的E6能激活端粒酶并因而延遲衰老細胞的死亡，且一旦細胞被轉(zhuǎn)化即能增加腫瘤形成的潛在危險性；E7蛋白可與PRB、P107和P130結(jié)合和相互作用而誘導其不穩(wěn)定性；HPVL6E7蛋白與E6協(xié)同作用使原代的人角質(zhì)形成細胞永生化等。因此認為由高危型HPV引起的角質(zhì)形成細胞永生化需要E6和E7的參與，并且E6和E7在誘導宿主細胞的惡性轉(zhuǎn)化過程中起關鍵作用。牛乳頭瘤病毒BPVI的E5蛋白是病毒主要轉(zhuǎn)化蛋白。HPVS的E5二聚體可引發(fā)感染細胞一系列細胞信號轉(zhuǎn)導的改變、轉(zhuǎn)化人纖維母細胞、增強E7介導的惡性轉(zhuǎn)化、以及影響細胞間接蛋白CONNEXINN43以參與腫瘤細胞逃避宿主的監(jiān)視和轉(zhuǎn)移等。在病毒免疫學中，以中和抗體為特征的體液免疫主要作用是預防新的HPV感染，對己存在的感染和由病毒感染誘發(fā)的腫瘤清除必須依賴以細胞毒性T淋巴細胞反應CTL為特征的細胞免疫。體液免疫和細胞免疫在體內(nèi)由不同的主要組織相容復合體MHC調(diào)控。其中體液免疫由MHCII類分子調(diào)控，細胞免疫由I類分子調(diào)控。曾經(jīng)認為外源性抗原只能通過MHCII抗原量遞通路傳遞。然而近來證實，外源性抗原在特定條件F可通過非經(jīng)典MHCI途徑被呈遞并有效激活細胞免疫如CTL反麻。HPVS作為外源性抗原能否通過某種非經(jīng)典的MHCI途徑被暈遞并有效激活細胞免疫如CTL反應的研究已成為研究熱點。研究表明，病毒早期蛋白E7可以引發(fā)CTL為特征的細胞免疫，但事實上天然感染常無病毒學癥期，且還常常導致機體的免疫耐受而使感染遷延難愈。HPVS主要殼蛋白L1能在體外真核生物表達系統(tǒng)中形成無DNA的病毒樣顆粒VLPS。L1蛋白的羧基端部分序列可以被外源性蛋白取代而不影響其在體外真核細胞中的表達和形成VLPS的能力使L1可以作為載體攜帶某些基因片斷并一起表達形成和重組或嵌合性VLPS。VLPS另～重要特性是，其結(jié)構(gòu)和抗原性與真病毒顆粒十分相似。因此相信VLPS可能是理想的候選6

簡介：腮腺炎病毒MUV同其他囊膜病毒相似在融合蛋白F中具有兩個七肽重復序列結(jié)構(gòu)域HR有關其他囊膜病毒F蛋白的研究表明HR區(qū)在F蛋白介導的病毒侵染中起著至關重要的作用在結(jié)合蛋白或結(jié)合亞基的協(xié)助作用下兩段HR結(jié)構(gòu)域的構(gòu)像發(fā)生變化形成熱穩(wěn)定的富含Α螺旋的發(fā)夾異源三聚體結(jié)構(gòu)并由此得到一個共同的融合機制但目前并不清楚MUV是否有類似于其他囊膜病毒的侵染機制該研究構(gòu)建了HR區(qū)HR1、HR2和2HELIX的重組載體并在大腸桿菌中以融合蛋白的形式表達了HR1、HR2和2HE1IXGST融合的HR1、HR2和2HELIX單體蛋白都以可溶形式表達利用親和層析及凝膠過濾層析純化獲得了高純度的目的蛋白經(jīng)PULLDOWN實驗初步證實HR1和HR2之間存在相互作用HR1和HR2的混合物在凝膠過濾層析中以聚體形式存在HR1HR2和2HELIX的化學交聯(lián)實驗表明等摩爾的HR1和HR2可形成異源三聚體其中2HELIX蛋白隨著交聯(lián)劑濃度的增加呈現(xiàn)明顯的單體和聚體的濃度梯度HR1HR2蛋白由于濃度較低雖未見清晰的單體和聚體的濃度梯度但仍可看到明顯的異源三聚體凝膠過濾層析也證實了這一結(jié)果兩者在同一位置出峰且在分子量為52KDA和144KDA的出峰位置之間顯示其以聚體形式存在質(zhì)譜分析結(jié)果顯示2HELIX蛋白分子量為117KDAHR1為71KDAHR2為47KDA2HELIX和HR1HR2三體分子量分別為351KDA和354KDA與凝膠過濾層析結(jié)果相對應圓二色譜分析結(jié)果表明單獨的HR1以Α螺旋結(jié)構(gòu)存在而HR2則以無規(guī)卷曲存在當兩者等摩爾混合后Α螺旋含量明顯增加2HELIX同樣具有典型的Α螺旋結(jié)構(gòu)2HELIX和HR1HR2三體相當穩(wěn)定TM達到76℃而且這種結(jié)合是特異的高溫變性后的蛋白經(jīng)低溫長時間放置后能夠大部分復性仍然呈現(xiàn)較高含量的Α螺旋結(jié)構(gòu)用晶體生長條件篩選試劑盒CRYSTALSCREENⅠⅡHAMPTONRESEARCHRIVERSIDECAUSA對2HELIX蛋白晶體的生長條件進行初選經(jīng)過優(yōu)化最后在15PEG8000、10MLISO緩沖液長出可以進行衍射的晶體通過應用程序AME以SV5F蛋白N1C1三聚體晶體結(jié)構(gòu)PDBCODE1SVF為模型利用分子置換的方法對2HELIX的晶體結(jié)構(gòu)進行解析得到了與SV5、RSV和NDV核心結(jié)構(gòu)相似的六螺旋束顯示MUV可能具有與上述蛋白相似的融合侵染機制

簡介：樹突狀細胞DENDRITICCELLSDCS是體內(nèi)最重要的抗原提呈細胞能夠啟動初始T細胞活化、增殖、分化并產(chǎn)生免疫效應在免疫系統(tǒng)中居于獨特的地位。成熟DCS能夠激發(fā)免疫應答而不成熟DCS則涉及免疫耐受的誘導。利用DC的免疫調(diào)節(jié)作用誘導免疫耐受是當前移植領域的研究熱點。研究表明髓系未成熟DC亞群IMMATUREDCSUBSETIMDC或靜息DCRESTINGDC由于表面黏附輔佐分子如B7、ICAM1、CD40等缺乏因此具有免疫耐受性可以誘導T細胞失能ANERGY、低反應性及向TH2細胞極化并誘導調(diào)節(jié)性T細胞REGULATYTCELLSTREG產(chǎn)生未成熟DC的這些效應對器官移植時免疫穩(wěn)定態(tài)的維持具有重要的作用。因此研究調(diào)節(jié)DCS發(fā)育成熟的因素及其機制對于闡明自身免疫病、移植排斥反應、抗腫瘤免疫等的機制和探索防治措施有著重要的意義。細胞因子信號轉(zhuǎn)導抑制分子SUPRESSSOFCYTOKINESIGNALINGSOCS是1997年STARR、ENDO和NAKA所在的三個不同的實驗小組用不同的方法相繼發(fā)現(xiàn)的一類與細胞因子JAKSTAT信號轉(zhuǎn)導途徑有關的負性調(diào)節(jié)因子。SOCS能抑制ILS、IFNΓ、GH等多種細胞因子的信號轉(zhuǎn)導途徑不僅對JAKSTAT信號途徑有負性調(diào)控作用而且還參與其它信號途徑的調(diào)節(jié)其功能涉及機體正常組織的分化和器官的發(fā)育因此為學術界廣泛關注。SOCS通過選擇性抑制IL12STAT4或IL4STAT6途徑的信號傳導實現(xiàn)對TH細胞的分化調(diào)控其平衡紊亂導致自身免疫性疾病的發(fā)生。SOCS1為該家族中含SH2結(jié)構(gòu)域的SOCS成員之一又稱JABJAKBINDINGPROTEIN或SSI1STATINDUCEDSTATINHIBIT1。正常生理條件下SOCS1蛋白分子表達量很少；在細胞受到某些細胞因子刺激時其表達量可迅速明顯地增加。研究表明當機體受到刺激以后SOCS1的MRNA在胸腺細胞內(nèi)的豐度顯著增加；在肺、脾和睪丸等器官中等增加。在體外SOCS1可以抑制多種信號傳導途徑在細胞中超表達時可以抑制IFNS、IL2、IL3、IL4、IL6、IL12、TNFΑ、LIF、OSM抑瘤素M等細胞因子的信號轉(zhuǎn)導。SOCS1通過抑制由ILS、IFN以及LIF等所誘導的STAT活性以及TEC激酶和受體酪氨酸激酶RECEPTTYROSINEKINASERTK的活性調(diào)控細胞的分化與功能?？紤]到DC在抗原遞呈和免疫激活與耐受過程中的特殊作用尤其是體內(nèi)IMDC亞群的產(chǎn)生與細胞因子信號調(diào)控密切相關針對SOCS1負性調(diào)節(jié)IFNΓ、ILS等細胞因子信號的傳導可能對IMDC亞群產(chǎn)生具有重要的作用我們擬研究在DC分化、發(fā)育和抗原遞呈過程中SOCS1的表達及對其影響的因素探討SOCS1高表達對DC成熟、生物學特性和功能的影響LPS等炎癥因子刺激在其中的作用以及誘導T細胞耐受的效果。目前對于SOCS1和DC之間相互關系的研究主要集中在干擾SOCS1表達方面而對于高表達SOCS1對DC的影響則鮮有報道。近期研究顯示用RNA干擾技術沉默DC的SOCS1基因表達能促使DC成熟而增強其免疫原性。且SAKURAI49等研究發(fā)現(xiàn)在巨噬細胞中高表達SOCS1能夠明顯抑制腺病毒本身所誘導的初始免疫反應。因此在理論上用細胞轉(zhuǎn)基因技術上調(diào)DC的SOCS1基因表達能抑制DC成熟而增強其耐受原性。鑒于此我們構(gòu)建了高表達SOCS1的腺病毒載體轉(zhuǎn)染小鼠骨髓來源的DCBMDC檢測BMDCS的表型、吞噬能力、細胞因子分泌以及刺激同種異體T細胞增殖的能力以及對細胞信號通路的影響以驗證SOCS1的高表達是否能夠抑制DC成熟并增強其耐受原性。第一部分SOCS1腺病毒載體的構(gòu)建及其修飾的小鼠BMDC的制備腺病毒載體因其具有基因組結(jié)構(gòu)簡單、宿主細胞范圍廣、滴度高、感染效率高、無插入突變危險等優(yōu)勢因此我們選擇了ADEASYTMADENOVIRALVECTSYSTEM體系構(gòu)建SOCS1載體。首先取經(jīng)過LPS刺激4小時后的小鼠脾臟抽提其MRNA然后根據(jù)報道及GENEBANK發(fā)布的基因和蛋白序列設計帶酶切位點的特異性引物RNA逆轉(zhuǎn)錄PCRRTPCR擴增獲得小鼠SOCS1全長基因序列雙酶切后連接到ADEASYTMADENOVIRALVECTSYSTEM體系中的PSHUTTLECMV中然后與PADEASY1同源重組在293A細胞中包裝出帶有SOCS1目的基因的腺病毒PADESYSOCS1。通過PCR、酶切、測序鑒定及WESTERNBLOT檢測結(jié)果顯示攜帶小鼠SOCS1基因的腺病毒載體可高表達SOCS1蛋白說明帶有目的基因SOCS1的腺病毒構(gòu)建成功。經(jīng)過病毒的擴增及滴度檢測我們構(gòu)建的小鼠PADEASYSOCS1腺病毒獲得了較高的滴度。采用GMCSF和IL4共同刺激小鼠骨髓細胞培養(yǎng)小鼠BMDC。此法培養(yǎng)的DC在57天時大部分為未成熟DC小集落經(jīng)LPS、CPG或POLYIC刺激2436小時后DC表面可伸出大量很長的突起；經(jīng)過流式細胞儀檢測BMDC的純度可以達到80％以上符合實驗的要求。實驗分為三組第一組正常BMDC組DCONLY第二組空病毒PADEASYTMVNG轉(zhuǎn)染小鼠BMDC形成空病毒對照組DCPADEASYVNG第三組將PADEASYTMSOCS1轉(zhuǎn)染BMDC形成SOCS1高表達組DCPADCASYSOCS1。普通顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)高表達SOCS1的BMDCS所形成的集落明顯的小且突起少而鈍；熒光顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)大約80％BMDCS發(fā)出綠色熒光；同時RTPCR和WESTERNBLOT檢測上述BMDCS的SOCS1基因和蛋白的表達情況。與對照組相比實驗組SOCS1蛋白的表達明顯增多。但由于病毒載體的影響與BMDCS相比空病毒對照組也有少量的SOCS1蛋白的表達。結(jié)果證實構(gòu)建的PADEASYSOCS1腺病毒能有效介導SOCS1基因在小鼠BMDCS中表達且空病毒可以誘導BMDCS微量的表達SOCS1。第二部分高表達SOCS1對BMDC生物學特性和功能的影響在本部分BMDCS被分為6組施以不同的刺激條件。A組培養(yǎng)過程中不加任何刺激的空白對照組DCONLYB組培養(yǎng)第5天加入PADEASYTMVNG空病毒對照組DCPADEASYTMVNGC組培養(yǎng)第5天加入PADEASYTMSOCS1實驗組DCPADEASYTMSOCS1D組培養(yǎng)過程中不加任何刺激的空白對照組檢測前24小時再加入LPS刺激LPSDCE組培養(yǎng)第5天加入PADEASYTMVNG空病毒對照組檢測前24小時再加入LPS刺激LPSDCPADEASYTMVNG組F組培養(yǎng)第5天加入PADEASYTMSOCS1檢測前24小時再加入LPS刺激LPSDCPADEASYTMSOCS1組。經(jīng)過FACS、ELISA等實驗手段檢測我們發(fā)現(xiàn)高表達SOCS1能夠明顯抑制BMDCS表面分子CD40、CD80、CD86和MHCII分子的表達；BMDCS攝取抗原能力維持在高水平而刺激異記憶T細胞增殖能力不足；同時伴隨著IL12P40、IL6、IFNΓ、及TNFΑ等細胞因子分泌水平的降低?？詹《窘M則恰恰相反在一定程度上刺激了BMDCS的成熟。但高表達SOCS1能夠明顯抑制空病毒所誘導的BMDCS的成熟作用。此外NFΚB在TLR誘導的DC成熟過程中起十分重要作用主要參與了細胞因子的分泌調(diào)節(jié)。SOCS1、P13K、PKCS等信號分子通過NFΚB、P38MAPK和JNK的激活而調(diào)控DC的成熟和細胞因子的分泌。因此我們選擇其中兩個重要的相關信號分子即NFΚB和JNK初步探索高表達SOCS1對BMDCS信號通路的調(diào)節(jié)作用。結(jié)果發(fā)現(xiàn)高表達SOCS1的BMDCS中P65表達量明顯降低JNK的表達量有所升高；而LPS刺激后高表達SOCS1的BMDCS中P65表達量略微降低JNK的表達量明顯降低。因此我們推測高表達SOCS1的BMDCS在信號調(diào)節(jié)的過程中主要是P65發(fā)揮了調(diào)控作用；經(jīng)LPS刺激后主要由JNK發(fā)揮了調(diào)控作用從而抑制了DC的成熟和細胞因子的分泌。以上結(jié)果表明SOCS1在DC中的高表達能夠明顯抑制DC表型和功能的成熟增強其耐受原性并通過NFΚB和JNK信號途徑發(fā)揮調(diào)控作用為進一步在器官移植領域中如何利用免疫負向調(diào)控分子維持免疫穩(wěn)定態(tài)提供了新的依據(jù)和方法。

簡介：目的為了解A組輪狀病毒ROTAVIRUSRV在中國的流行和演變情況為中國應用和開發(fā)RV疫苗提供必需的背景資料我們在蘇州和馬鞍山兩地進行了嬰幼兒腹瀉的臨床流行病學監(jiān)測和RV的血清與分子流行病學研究評價RV腹瀉的疾病負擔情況并初步探討嬰幼兒輪狀病毒腹瀉的危險因素研究方法1選擇蘇州兒童醫(yī)院簡稱蘇醫(yī)和馬鞍山鋼鐵公司醫(yī)院簡稱馬醫(yī)為監(jiān)測點從2001年9月到2003年1月以到兩所醫(yī)院就診的5歲以下腹瀉患兒為研究對象進行流行病學調(diào)查并收集糞便標本2采用酶聯(lián)免疫吸附試驗ENZYMELINKEDIMMUNOBSBENTASSAYELISA檢測A組輪狀病毒抗原采用巢式RTPCR法確定A組RV的血清型3采用病例對照研究方法分別設立醫(yī)院對照和社區(qū)對照對RV腹瀉的影響因素進行分析4所有資料用FOXPRO雙機錄入采用SAS80進行統(tǒng)計分析研究結(jié)果1兩所醫(yī)院小于5歲的RV腹瀉患兒中以13歲為主感染的高峰均在秋冬季蘇醫(yī)RV的感染率農(nóng)村高于城市2研究期間兩醫(yī)院RV毒株的G血清型均以G3型為主其次為G1及少量的G2、G4、G9蘇醫(yī)兩年的RV感染高峰以G3型為主而馬醫(yī)2001年的RV感染高峰以G1型為主2002年則以G3型為主兩醫(yī)院RV毒株的的P基因型均以P4為主其次為P8未檢出其它型別組合型別多為P4與G1、G3的組合其次為P8與G1、G3的組合3RV腹瀉的臨床表現(xiàn)以水性腹瀉和發(fā)熱為主腹瀉患兒的住院天數(shù)與是否感染RV無關臨床表現(xiàn)與RV血清型無直接聯(lián)系RV腹瀉患兒的臨床癥狀綜合評分VESIKARISCALE為995、824均高于非RV感染的腹瀉患兒顯示前者的臨床癥狀普遍較重研究期間所監(jiān)測的兩個醫(yī)院中均未出現(xiàn)腹瀉患兒的死亡4在蘇醫(yī)和馬醫(yī)的研究對象中門診腹瀉患兒分別有4407％和2167％受到RV感染住院腹瀉患兒中分別有559％和2913％受到RV感染住院患兒所花費的平均醫(yī)療費用分別占當?shù)丶彝テ骄率杖?2以上和135在郊區(qū)和農(nóng)村的生活背景下孩子的母親年紀輕、孩子由老人看護可能會增加RV感染的機會值為118和341在對母乳喂養(yǎng)因素的研究中提示母乳喂養(yǎng)16個月可能減少RV感染015而持續(xù)12個月以上則可能增加感染RV的機會328另外經(jīng)常將幼兒帶到公共場所可能會增加RV感染的機會結(jié)論輪狀病毒感染是兩地3歲以下兒童腹瀉的主要病因病毒型別隨不同地區(qū)、不同時間有所變異僅靠改善衛(wèi)生環(huán)境和母乳喂養(yǎng)等措施尚不能有效的控制RV感染因此加強RV監(jiān)測和研制有針對性的輪狀病毒疫苗對預防嬰幼兒腹瀉以及減輕RV疾病負擔有重要作用

簡介：點擊查看更多杯狀病毒分子流行病學及病原與宿主互作機制研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：目的在進行海洋生物活性物質(zhì)分離篩選的過程中我們發(fā)現(xiàn)柄海鞘STYELACLAVAHEDMAN中的一個具有很高藥用價值的活性物質(zhì)海鞘醇這是一個既具有還原性有具有較強氧化性的甾醇類有機化合物實驗表明它具有極高的對抗乙型肝炎病毒的體外活性對于常規(guī)制劑新型的給藥體系緩控釋及靶向制劑的優(yōu)點很多以生物降解型高分子為載體的微球制劑是以人為本的科技發(fā)展方向而聚乳酸及其共聚物更是近年發(fā)展起來的一類完全生物降解的無毒的藥用載體因此我們進行了海鞘醇PLGA微球的研制使其成為具有肝靶向的長效的靜脈給藥制劑方法采用乳化溶劑揮發(fā)法制備載海鞘醇的PLGA微球并對制備過程的影響因素進行了單因素分析通過掃描電鏡照相來考察微球的形態(tài)學建立了海鞘醇的HPLC含量測定方法并進行了方法學考察通過DSC及IR光譜的方法對海鞘醇在PLGA微球內(nèi)的分散形式進行了推斷對影響微球載藥量與包封率的因素進行考察對微球的穩(wěn)定性進行了初步考察設計海鞘醇PLGA微球體外釋放實驗通過對微球釋放過程中海鞘醇的含量測定對微球體外釋放過程進行考察并對釋放結(jié)果進行模型擬合通過HBVDNA克隆轉(zhuǎn)染人肝癌細胞HEPG的2215細胞系進行了海鞘醇PLGA微球?qū)BSAG、HBEAG的抑制實驗研究通過小鼠尾靜脈注射海鞘醇PLGA微球后對不同時間各臟器及血漿中海鞘醇濃度的測定進行微球體內(nèi)分布的考察以確定其靶向性通過大鼠腹腔注射海鞘醇玉米油溶液及尾靜脈注射海鞘醇PLGA微球后對不同時間血漿中海鞘醇濃度的測定進行微球藥動學的初步考察并通過3P87軟件對藥動學參數(shù)進行求算結(jié)論綜上所述海鞘醇PLGA微球在體外對HBSAG、HBEAG有很強的抑制作用粒徑范圍在12ΜM的海鞘醇PLGA微球一次注射在體內(nèi)緩慢釋放至少可以達到2周血藥濃度保持在一個相對穩(wěn)定的范圍內(nèi)符合注射用肝靶向緩釋給藥的要求

簡介：分類號一，論文編號密級彳鷹犬博士學位論文乙型肝炎病毒X蛋白相關原發(fā)性肝癌發(fā)生中的表觀遺傳學機制研究STUDYONTHEEPIGENETICMECHANISMOFHEPATITISBVIRUSXPROTEININHEPATOCELLULARCARCINOMA20092012答辯日期2Q12笙Q主目Q2目獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學位論文是我個人在導師指導下進行的研究工作。除了文中特別加以標注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。本人承擔本聲明的法律責任。學位論文作者簽名瑯兮氐日期沙12年歲月}日學位論文版權使用授權聲明本人完全了解第二軍醫(yī)大學有關保留、使用學位論文的規(guī)定，第二軍醫(yī)大學有權保留并向國家有關部門或機構(gòu)送交論文的復印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權第二軍醫(yī)大學可以將學位論文的全部或部分內(nèi)容編入中國學位論文全文數(shù)據(jù)庫、中國優(yōu)秀博碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫等數(shù)據(jù)庫進行檢索?？梢圆捎糜坝?、縮印或掃描等復制手段保存、匯編學位論文。保密的學位論文在解密后適用本授權書學位論文作者簽名善拿I虱日期弘11年}月1日導師簽名形≠卜日期2糾乙年廠月／日

簡介：研究目的了解慢性B淋巴細胞增殖性疾病BCLPD不同亞型患者甲、乙及丙型肝炎病毒感染情況，對比侵襲性B細胞非霍奇金淋巴瘤BNHL，探討B(tài)CLPD不同亞型與肝炎病毒感染的相關性。研究方法回顧性分析該院自1994年01月至2014年01月間，733例初診BCLPD及同期132例侵襲性BNHL患者的臨床資料，比較肝炎病毒感染的差異。統(tǒng)計分析甲、乙及丙型肝炎病毒感染在各BCLPD亞型中的感染情況及相關性。結(jié)果733例BCLPD患者中，抗甲型肝炎病毒抗體HAVAB、抗丙型肝炎病毒抗體HCVAB的陽性率分別為11％和19％，與同期132例侵襲性BNHL相較，未見明顯統(tǒng)計學差異。乙型肝炎病毒表面抗原HBSAG陽性患者占79％，明顯低于同期侵襲性BNHL組79VS165％，P0001。在BCLPD患者中，HBSAG、HBEAG及抗HBCAB同時陽性者（“大三陽”）占11％，與同期侵襲性BNHL60％相較明顯降低。而HBSAG、抗HBEAB及抗HBCAB同時陽性（“小三陽”）患者的比例在BCLPD組與侵襲性BNHL組問未見明顯差異。在733例BCLPD患者中，CLL279例381％，WM119例162％，F(xiàn)L74例101％，BLPDU66例90％，SMZL48例65％，HCL33例45％，NMZL27例37％，MALT15例20％及BPLL6例08％，疑似脾邊緣區(qū)淋巴瘤SMZL40例55％，疑似套細胞淋巴瘤MCL26例36％?？笻AVAB及抗HCVAB陽性率在不同亞型BCLPD組患者中無顯著差異。但HBSAG在脾邊緣區(qū)淋巴瘤SMZL患者中的陽性率為188％，明顯高于其他BCLPD患者P0004及其他邊緣區(qū)淋巴瘤MZL患者P0005。乙肝“大三陽”在不同亞型BCLPD間無顯著差異，而乙肝“小三陽”在SMZL組占166％，明顯高于其他BCLPD組166％VS47％，P0000。在BCLPD患者中，已感染乙型肝炎病毒HBV的患者共計284例，占387％。在已感染HBV的SMZL患者中，HBSAG的陽性率為346％，高于其他BCLPD亞型患者346％VS19％，P006，但兩組間差異無明顯統(tǒng)計學意義。在已感染HBV的患者中，乙肝“大三陽”在不同BCLPD亞型之間無顯著差異，乙肝“小三陽”在SMZL組明顯高于其他BCLPD組308％VS121％，P0009。結(jié)論甲型和丙型肝炎病毒感染率在BCLPD與侵襲性BNHL及各類BCLPD間無顯著差異。乙型肝炎病毒在SMZL中感染率明顯高于其他BCLPD亞型，提示HBV在我國SMZL發(fā)生發(fā)展中可能發(fā)揮重要作用。