PET顯像評價他莫昔芬治療乳腺癌早期療效的實驗研究.pdf

1、第一部分18F-FDG評價他莫昔芬對乳腺癌MCF-7細(xì)胞早期療效
　　目的：觀察他莫昔芬（Tamoxifen，TAM）作用人乳腺癌細(xì)胞株MCF-7后ER表達(dá)、早期凋亡、細(xì)胞增殖及18F-FDG攝取的變化，分析TAM治療后乳腺癌細(xì)胞18F-FDG攝取與細(xì)胞增殖之間的關(guān)系，評估18F-FDG用于早期評價TAM對乳腺癌細(xì)胞療效的可行性。
　　方法：不同濃度 TAM（5×10-6、1×10-5、1.5×10-5、2×10-5、2.5

2、×10-5mol/L）作用乳腺癌MCF-7細(xì)胞24、48h后，測量18F-FDG攝取率，采用四甲基偶氮唑藍(lán)（MTT）法檢測細(xì)胞增殖情況，并計算 TAM的半抑制濃度（IC50）。流式細(xì)胞儀檢測 IC50濃度TAM作用后MCF-7細(xì)胞的早期凋亡率及細(xì)胞周期，Western blot法測定ERα、ERβ表達(dá)情況。行單因素方差分析及Pearson相關(guān)分析判斷治療后18F-FDG攝取率與細(xì)胞增殖之間的關(guān)系。
　　結(jié)果：（1）不同濃度TAM作

3、用24、48h后，對MCF-7細(xì)胞的增殖有明顯抑制作用，其24及48h增殖抑制率分別為：（7.27±6.35）％、（21.12±7.91）%、（37.60±4.78）%、（42.52±6.20）%、（98.08±0.54）%和（20.90±8.96）%、（33.01±13.85）%、（69.38±8.44）%、（95.62±1.12）%、（96.52±1.03）%。隨著 TAM濃度的升高，抑制作用明顯增大（24h:P＜0.05，r=0.

4、93；48h：P＜0.01，r=0.97）。TAM作用MCF-7細(xì)胞24和48h的IC50濃度分別為1.95×10-5 mol/L和1.24×10-5 mol/L。（2）IC50濃度TAM作用于MCF-7細(xì)胞24和48h后，其早期凋亡率分別為：（14.81±1.44）%和（20.60±2.38）%，較對照組（5.75±1.78）%和（8.13±1.95）%增高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。細(xì)胞周期檢測提示，IC50濃度TAM作用2

5、4、48h后GO/G1期細(xì)胞百分率分別為（57.24±6.90）%和（79.36±9.72）%，較對照組（29.08±3.09）%和（32.64±5.87）%增高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。（3）Western Blot結(jié)果顯示，MCF-7細(xì)胞在IC50濃度TAM作用24、48h后，ERα表達(dá)下降，ERβ表達(dá)改變不明顯。（4） TAM作用24、48h后，MCF-7細(xì)胞的18F-FDG攝取率降低，隨著TAM濃度的升高，其24及48

6、h攝取抑制率分別為：（5.13±0.80）%、（19.73±7.16）%、（53.51±3.21）%、（66.30±8.92）%、（84.93±6.04）%和（9.07±0.63）%、（43.25±7.05）%、（62.53±1.56）%、（77.79±3.68）%、（87.57±4.75）%。MCF-7細(xì)胞的18F-FDG攝取抑制率隨TAM濃度增加而增加（24h：P＜0.01，r=0.9；48h：P＜0.01，r=0.97）。（5）T

7、AM作用24、48h后，MCF-7細(xì)胞的增殖抑制率與18F-FDG攝取抑制率改變呈正相關(guān)（24h：P＜0.05，r=0.91；48h：P＜0.05，r=0.96）。
　　結(jié)論：TAM可誘導(dǎo)MCF-7細(xì)胞早期凋亡并使細(xì)胞周期的G0/Gl期百分率增加。TAM治療后MCF-7細(xì)胞的18F-FDG攝取抑制率與細(xì)胞增殖抑制率呈正相關(guān)，18F-FDG可以早期評價TAM對MCF-7細(xì)胞的療效。
　　第二部分18F-FDG,18F-FLT和

8、18F-FES系列microPET顯像評價他莫昔芬對乳腺癌荷瘤裸鼠早期療效的實驗研究
　　目的：評價18F-FDG、18F-FLT和18F-FES系列microPET顯像用于評價乳腺癌他莫昔芬早期療效的可行性，并與病理改變對照，探索其顯像機制。
　　方法：建立人乳腺癌細(xì)胞株MCF-7荷瘤裸鼠模型10只，模型分為對照組與TAM治療組，觀察 TAM短期治療后5周腫瘤生長速度改變。建立人乳腺癌細(xì)胞株 MCF-7荷瘤裸鼠模型20只，

9、模型隨機分為4組：對照組（未行顯像及治療），18F-FDG顯像組，18F-FLT顯像組，18F-FES顯像組，行TAM治療前后荷瘤裸鼠18F-FDG、18F-FLT和18F-FES系列microPET顯像，用軟件處理圖像并比較處理前后腫瘤SUV值變化。顯像后處死對照組及治療組荷瘤裸鼠，取腫瘤標(biāo)本行ERα、ERβ、GLUT-1、Ki-67和PCNA等免疫組化分析。
　　結(jié)果：（1）細(xì)胞接種法成功建模30只，建模成功率91%，實驗過程

10、中荷瘤裸鼠生長狀態(tài)較好。短期治療后，治療組腫瘤細(xì)胞生長速度較對照組緩慢。（2）對MCF-7細(xì)胞荷瘤裸鼠模型進行18F-FDG、18F-FLT和18F-FES microPET顯像，腫瘤部位顯像清晰，放射性明顯濃聚，TAM治療后，18F-FLT和18F-FES microPET顯像腫瘤部位SUV值降低。18F-FLT顯像中治療前腫瘤 SUVmax為0.85±0.09，治療后為0.72±0.08，△SUVmax為0.13±0.11，差異有統(tǒng)

11、計學(xué)意義（t=3.012，P=0.039）；18F-FES顯像中治療前腫瘤SUVmax為0.64±0.12，治療后為0.32±0.09，△SUVmax為0.32±0.03，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（t=12.930，P=0.006）。但18F-FDG顯像治療前后腫瘤部位 SUV值分別為1.12±0.16和1.05±0.11，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（t=1.033，P=0.378）。（3）乳腺癌MCF-7細(xì)胞均表達(dá)ERα、ERβ、GLUT-1、Ki-6