甘草酸或甘草次酸配伍依托泊苷對三陰性乳腺癌MDA-MB-231細胞作用的差異及其機制初步研究.pdf

1、目的：
　　三陰性乳腺癌的雌激素受體，孕激素受體與人表皮生長因子受體2表達陰性，缺乏治療靶點，惡性程度高，目前臨床上缺乏有效的用藥與治療指南，治療預后較差而死亡率高。甘草酸臨床應用廣泛，其在人體內被代謝脫去兩分子葡萄糖成為甘草次酸。有研究表明甘草酸與甘草次酸均能抑制腫瘤生長，也有報道在抗腫瘤與抗氧化方面其藥理作用相反;但兩者對三陰性乳腺癌MDA-MB-231細胞作用的差異以及相關藥理學機制卻未見有報道。因此，本課題考察了甘草酸和甘

2、草次酸對三陰性乳腺癌細胞MDA-MB-231細胞體外生長的影響并初步探索相關的作用機制。
　　方法：
　　MTT實驗發(fā)現(xiàn)甘草酸與甘草次酸對三陰性乳腺癌MDA-MB-231細胞體外增殖作用不同。甘草次酸能夠抑制MDA-MB-231細胞的體外增殖;在非細胞毒濃度范圍內（20μM以下），甘草次酸聯(lián)用抗腫瘤藥物依托泊苷可表現(xiàn)出協(xié)同作用。通過RT-PCR與Western blot實驗發(fā)現(xiàn)，甘草次酸能夠調節(jié)拓撲異構酶Ⅱα蛋白(TOPO2

3、A)的表達，該蛋白同時也是依托泊苷的作用靶點。非細胞毒濃度的甘草次酸對MDA-MB-231細胞TOPO2A的調節(jié)作用為濃度與時間依賴性。20μM甘草次酸刺激12小時后細胞TOPO2A蛋白的表達，與對照組相比上調2.4倍，增加了依托泊苷的作用靶點，使藥物殺傷作用增強。有趣的是，刺激延長至48小時時，甘草次酸反而抑制TOPO2A蛋白，其表達水平為對照組的0.5倍。同時，20μM甘草次酸能夠損耗細胞內谷胱甘肽，降低細胞抵抗氧化應激的能力，誘導

4、細胞凋亡，進一步增強了甘草次酸對依托泊苷的協(xié)同作用。另一方面，甘草酸在0-80μM范圍內不能影響MDA-MB-231細胞的體外生長也不能增強依托泊苷對腫瘤細胞的殺傷作用。與甘草次酸相反，20μM濃度以下的甘草酸不影響TOPO2A的表達以及細胞凋亡狀態(tài)，同時能降低細胞內的活性氧，提高細胞的抗氧化能力。在細胞通路水平考察發(fā)現(xiàn)，甘草酸與甘草次酸發(fā)揮藥理學作用可能與其參與調節(jié)MAPK與AKT通路相關。
　　結論：
　　甘草次酸而不是