PRMT2對(duì)乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞侵襲與遷移的影響及機(jī)制研究.pdf

1、目的：探討蛋白精氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶2（protein. arginine. methyltransferase.2，PRMT2）對(duì)人乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231侵襲與遷移的影響及可能的機(jī)制。
　　方法：將構(gòu)建好的真核表達(dá)載體瞬時(shí)轉(zhuǎn)染至MDA-MB-231細(xì)胞，Western Blot檢測(cè)EMT相關(guān)蛋白的表達(dá)，觀察PRMT2對(duì)乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞侵襲與遷移的影響；建立PRMT2高表達(dá)的穩(wěn)定細(xì)胞系MDA-MB-231-PRMT

2、2，顯微鏡觀察PRMT2高表達(dá)后細(xì)胞形態(tài)的變化，Transwell及劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)PRMT2高表達(dá)對(duì)細(xì)胞侵襲及遷移能力的影響，Western Blot檢測(cè)EMT相關(guān)蛋白的表達(dá)，進(jìn)一步驗(yàn)證和分析PRMT2對(duì)MDA-MB-231細(xì)胞侵襲與遷移的影響；蛋白質(zhì)芯片技術(shù)檢測(cè)PRMT2影響細(xì)胞的可能信號(hào)通路，Western Blot檢測(cè)通路相關(guān)蛋白的表達(dá)，初步探討PRMT2影響乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞侵襲與遷移的機(jī)制。
　　結(jié)果:1.We

3、stern Blot結(jié)果顯示PRMT2瞬時(shí)高表達(dá)后E-cadherin的表達(dá)水平下調(diào)（p＜0.05），Slug和Vimentin的表達(dá)水平上調(diào)（p＜0.05）；PRMT2瞬時(shí)低表達(dá)后E-cadherin的表達(dá)水平上調(diào)（p＜0.05），Slug和Vimentin的表達(dá)水平下調(diào)（p＜0.05）。
　　2.PRMT2穩(wěn)定高表達(dá)后，顯微鏡觀察到明顯的形態(tài)變化，Transwell實(shí)驗(yàn)表明四環(huán)素誘導(dǎo)組細(xì)胞侵襲率較無(wú)四環(huán)素誘導(dǎo)組增加（p＜0.0

4、01），劃痕實(shí)驗(yàn)顯示細(xì)胞遷移率無(wú)明顯改變（p＞0.05），對(duì)EMT相關(guān)蛋白表達(dá)水平的影響均與瞬時(shí)轉(zhuǎn)染的結(jié)果一致。
　　3.蛋白質(zhì)芯片結(jié)果提示W(wǎng)nt/β-catenin可能為PRMT2影響細(xì)胞侵襲與遷移的信號(hào)通路，且磷酸化GSK-3β(Ser9)表達(dá)上調(diào)（p＜0.05），磷酸化β-catenin表達(dá)下調(diào)（p＜0.05）。
　　結(jié)論：1.PRMT2促進(jìn)乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞EMT形成。
　　2.PRMT2促進(jìn)乳腺癌