新型萘酰亞胺衍生物SLP9、SLP11抗腫瘤作用及機制研究.pdf

1、目的：本課題研究新型萘酰亞胺衍生物SLP9和SLP11的體內(nèi)和體外抗腫瘤作用及分子機制，為萘酰亞胺衍生物的研究提供實驗依據(jù)與理論參考。
　　方法：通過MTT實驗分別檢測SLP9、SLP11對肝癌細胞HepG2、SMMC-7721，結(jié)腸癌細胞HCT-116、HT-29，乳腺癌細胞MCF-7、MDA-MB-231增殖的抑制作用。通過Annexin V/PI雙染分別檢測SLP9、SLP11誘導HepG2、SMMC-7721和HCT-11

2、6細胞凋亡作用。通過AO/EB熒光染色分別從形態(tài)學上檢測SLP9、SLP11誘導HepG2、SMMC-7721、HCT-116細胞凋亡作用。通過Western blot實驗分別檢測SLP9、SLP11作用于HepG2、SMMC-7721、HCT-116細胞后，對PARP-1、Caspase-3、Bcl-2、BaX蛋白的表達的影響。通過昆明小鼠移植性肝癌H22腋下實體瘤模型、H22肺轉(zhuǎn)移模型和BALB/c小鼠結(jié)腸癌CT-26肺轉(zhuǎn)移模型探究

3、SLP9、SLP11的體內(nèi)抗腫瘤以及對肺轉(zhuǎn)移抑制作用。
　　結(jié)果：
　　1.SLP9對肝癌細胞HepG2、SMMC-7721，結(jié)腸癌細胞HCT-116、HT-29，乳腺癌細胞MCF-7、MDA-MB-231的增殖均有抑制作用。其對上述細胞作用48h，IC50分別為(5.49±0.24)μM、(3.05±0.62)μM、(7.25±0.84)μM、(10.40±0.78)μM、(17.53±1.06)μM、(11.46±0.9

4、6)μM。
　　SLP11對肝癌細胞HepG2、SMMC-7721，結(jié)腸癌細胞HCT-116、HT-29，乳腺癌細胞MCF-7、MDA-MB-231的增殖均有抑制作用。其對上述細胞作用48h，IC50分別為(6.55±0.48)μM、(4.20±0.66)μM、(7.28±0.43)μM、(18.08±1.24)μM、(12.52±1.11)μM、(11.05±0.64)μM。
　　2.SLP9對HepG2、SMMC-772

5、1、HCT-116細胞有誘導凋亡作用，并且呈時間和濃度依賴性。10μM SLP9處理這三種細胞48h，凋亡率分別達到：(39.21±11.83)％、(64.83±7.39)%、(49.50±4.72)%。AO/EB熒光染色法從細胞形態(tài)上證實SLP9能誘導HepG2、SMMC-7721、HCT-116細胞的凋亡。
　　SLP11對HepG2、SMMC-7721、HCT-116細胞有誘導凋亡作用，并且呈時間和濃度依賴性。10μM SL

6、P11處理這三種細胞48h，凋亡率分別達到：(35.06±3.48)%、(41.21±2.83)%、(36.35±12.57)%。AO/EB熒光染色法從細胞形態(tài)上證實SLP11能誘導HepG2、SMMC-7721、HCT-116細胞的凋亡。
　　3.Western Blot實驗證明SLP9通過PARP-1激活和Caspase-3介導途徑引起細胞凋亡，同時Bcl-2家族成員參與調(diào)節(jié)凋亡：表現(xiàn)出抗調(diào)成員Bcl-2下調(diào)，促調(diào)成員Bax上

7、調(diào)。
　　Western Blot實驗證明SLP11通過PARP-1激活和Caspase-3介導途徑引起細胞凋亡，同時Bcl-2家族成員參與調(diào)節(jié)凋亡：表現(xiàn)出抗調(diào)成員Bcl-2下調(diào)，促調(diào)成員Bax上調(diào)。
　　4.通過昆明小鼠H22腋下實體瘤模型和H22肺轉(zhuǎn)移模型實驗得出Amonafide、SLP9可以抑制實體瘤的生長和肺轉(zhuǎn)移，抑瘤率和抑制轉(zhuǎn)移率分別是：45.26%，52.63%和
　　39.81%，76.70%，SLP9

8、作用強于Amonafide。通過BALB/c小鼠CT-26肺轉(zhuǎn)移模型實驗得出Amonafide、SLP9可以抑制CT-26的肺轉(zhuǎn)移，抑制轉(zhuǎn)移率是：62.88%，86.71%，SLP9作用強于Amonafide。
　　通過昆明小鼠H22腋下實體瘤模型和H22的肺轉(zhuǎn)移模型實驗得出SLP11可以抑制實體瘤的生長和H22的肺轉(zhuǎn)移，抑瘤率和抑制轉(zhuǎn)移率分別是：49.47%和58.25%，SLP11作用強于Amonafide。通過BALB/c小