CCR5及其配體CCL5在川崎病外周血T淋巴細胞中的表達研究.pdf

1、目的：總結32例川崎?。↘awasaki Disease，KD）急性期患兒的臨床資料了解川崎病的臨床特點，分別以細胞免疫化學、蛋白免疫印跡法及流式細胞術檢測外周血T淋巴細胞中CCR5/CCL5的表達，以及使用CCR5配體拮抗劑后CCR5/CCL5的表達，探討CCR5/CCL5生物軸在KD炎癥急性期的可能作用，并通過CCR5與臨床炎癥因子的相關性分析，初步探討CCR5/CCL5與臨床炎癥表現(xiàn)的關系。
　　方法：(1)總結32例急性期

2、川崎病患兒臨床病史資料；(2)培養(yǎng)T淋巴細胞，MTT法確定PHA合適濃度，流式細胞術篩選確定T淋巴細胞；(3)用細胞免疫組化、蛋白免疫印跡法和流式細胞術分別檢測外周血T淋巴細胞中CCR5、CCL5的表達；(4)用流式細胞術檢測加入CCR5配體拮抗劑后CCR5/CCL5的表達；(5)分析CCR5與臨床炎癥因子的相關性。
　　結果：(1)32例川崎病患兒中男性20例，女性12例，男女比為1.7:1；年齡在6月到7.5歲，平均年齡(2.

3、10±1.83)歲，其中<1歲5例（15.6％），1歲~5歲24例（75%），>5歲3例（9.4%）；分組中冠狀動脈損害（CAL）者8例（25%），無冠脈損害者24例（75%）；熱程均超過5天，平均熱程為7.82±1.35天；楊梅舌16例（50%）；手足硬腫、指趾端、肛周脫屑18例（56.2%）；皮疹19例（59.3%）；結膜充血24例（75.0%）；頸淋巴結腫25例（78.1%）；唇紅、皸裂27例（84.3%）；輔檢可見白細胞總數(shù)及C

4、反應蛋白、血小板計數(shù)均增高，血沉明顯增快；與NCAL患兒相比較，CAL患兒外周血PLT和ESR有明顯增加﹝PLT(×10^9/L)432.9±85.6 vs367.4±70.3，ESR（mm/h）54.4±17.3 vs42.8±13.8，P<0.05，而 WBC、CRP、Hb、LDH在兩者間均無明顯差異（P>0.05）；此次彩超觀察發(fā)現(xiàn)在KD-CAL患兒中以冠狀動脈擴張最常見，冠狀動脈瘤本次所搜集資料中未發(fā)現(xiàn)，在合并冠狀動脈擴張的患兒

5、中，可同時伴有瓣膜的反流，乳頭肌回聲增強，心包積液等心臟其他改變。(2)PHA可刺激淋巴細胞的增殖，MTT法檢測發(fā)現(xiàn)使T淋巴細胞產生增殖的最適PHA濃度為1μg/m1。(3)CCR5表達于外周血T淋巴細胞表面，健康組及KD組均能檢測到陽性表達，KD組較健康組高表達CCR5。(4)用CCR5配體拮抗劑Maraviroc處理后，與前期未加入拮抗劑時相比，CCL5、CCR5在健康組表達無顯著變化，而二者在KD組的表達均顯著下降。(5)CCR5

6、的表達水平與CRP、ESR、PLT呈正相關。
　　結論：(1)本次病例收集發(fā)現(xiàn)：KD常見于男性患兒，1-5歲高發(fā)；臨床上除均有高熱外，以唇紅皸裂、球結膜充血、頸淋巴結腫大最為常見；心臟彩超檢查發(fā)現(xiàn)8例冠脈擴張中以左主干為主；實驗室檢查中WBC，CRP，ESR，PLT升高的同時可合并有心肌酶譜升高、血紅蛋白下降，其中PLT及ESR的增高在有冠脈損害的患兒中尤為明顯；此次收集的資料分析結果可能有助于早期診斷川崎病提供更多臨床依據(jù)。(2

7、)證實了CCR5及其配體CCL5在KD患兒外周血T淋巴細胞上有明確表達，CCR5表達于胞膜；有望將CCR5作為KD的免疫檢測和治療的靶標物質。(3)KD患兒CCR5、CCL5的表達水平均高于健康兒童；加入CCR5配體拮抗劑阻斷后，CCR5、CCL5在KD患兒中的表達均顯著下降；CCR5的表達水平與臨床炎性因子CRP、ESR、PLT呈正相關；推測川崎病急性期的炎癥反應與CCR5/CCL5生物軸的活化有關，并且CCR5配體CCL5可能在CC