趨化因子CCL17在絨毛滋養(yǎng)細(xì)胞的表達(dá)及對(duì)外周血CCR4+T細(xì)胞的趨化作用.pdf

1、目的：探討趨化因子CCL17在絨毛滋養(yǎng)細(xì)胞中的表達(dá)及在母胎免疫中的調(diào)節(jié)作用。
　　方法：收集2015年6月至2015年8月在廣西醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院自愿要求行人工流產(chǎn)術(shù)的正常妊娠婦女5例，收集絨毛組織，免疫組織化學(xué)法定位檢測(cè)趨化因子CCL17的表達(dá)情況。抽取正常育齡期婦女外周血，分離外周血單個(gè)核細(xì)胞（PBMC）,使用0ng/mL(對(duì)照組)、10ng/mL、100ng/mL濃度的重組人CCL17對(duì)正常婦女外周血單個(gè)核細(xì)胞（PBMC）

2、進(jìn)行4次趨化實(shí)驗(yàn)，每次設(shè)雙副孔。收集下室細(xì)胞行流式細(xì)胞術(shù)，對(duì)比三組趨化后CD4+CCR4+T細(xì)胞、CD4+CCR4+CD25-T細(xì)胞、CD4+CCR4+CD25+T細(xì)胞、CD4+CD25+CD127LOW/-T細(xì)胞、CD4+CD25+CD127LOW/-中CCR4+T細(xì)胞的數(shù)目以及CCR4的表達(dá)率。
　　結(jié)果：⑴免疫組織化學(xué)結(jié)果：早孕絨毛滋養(yǎng)細(xì)胞表達(dá)CCL17。⑵0ng/mL、10ng/mL、100ng/mL的重組CCL17組遷移

3、到 Transwell小室下室內(nèi)CD4+CCR4+T細(xì)胞的細(xì)胞分別是639±380個(gè)、1188±440個(gè)、1298±396個(gè)，10ng/mL組與對(duì)照組間無差別（P＞0.05），100ng/mL組的細(xì)胞較對(duì)照組增多（P<0.05）。⑶0ng/mL、10ng/mL、100ng/mL組遷移到下室的CD4+CCR4+CD25-T細(xì)胞數(shù)分別是423±250個(gè)、618±196個(gè)、701±260個(gè)，三組間無差別（P＞0.05）。⑷0ng/mL、10n

4、g/mL、100ng/mL組遷移到Transwell小室下室內(nèi)CD4+CCR4+CD25+T細(xì)胞的細(xì)胞數(shù)分別是212±129個(gè)、564±270個(gè)、593±143個(gè)，與對(duì)照組相比,10ng/mL組與100ng/mL組細(xì)胞數(shù)均明顯增多（P<0.05）,但10ng/mL、100ng/mL組之間無差別（P＞0.05）。⑸0ng/mL、10ng/mL、100ng/mL的重組CCL17組中到達(dá)Transwell小室下室內(nèi)CD4+CD25+CD127

5、LOW/- T細(xì)胞數(shù)分別是97±50個(gè)、355±148個(gè)、442±38個(gè)，與對(duì)照組相比，10ng/mL、100ng/mL組均明顯增多（P＜0.05），但10ng/mL與100ng/mL組間比較無差別（P＞0.05）。⑹0ng/mL、10ng/mL、100ng/mL的重組CCL17組中到達(dá)Transwell小室下室內(nèi)CCR4+的CD4+CD25+CD127LOW/- T細(xì)胞數(shù)分別是71±38個(gè)、277±124個(gè)、333±52個(gè)，與對(duì)照組相

6、比，10ng/mL、100ng/mL組均明顯增多（P<0.05），但10ng/mL、100ng/mL之間無差別（P＞0.05）。⑺CD4+CD25+CD127 LOW/-T細(xì)胞上CCR4的表達(dá)率均高達(dá)70％以上。0ng/mL、10ng/mL、100ng/mL組表達(dá)率分別為72.7±4.8%,、76.9±4.7%、74.9±6.6%，三組間無差別（P＞0.05）。
　　結(jié)論：①早孕絨毛滋養(yǎng)細(xì)胞表達(dá)CCL17。②CCL17不能募集CD