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文檔簡介
1、目的:
觀察藥物帕歌斯(Pagosid,PGS)的干預(yù)對實驗性自身免疫性腦脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)大鼠脊髓中神經(jīng)絲蛋白(neurofilament protein,NFP)及CCL5(CCChemokine Ligand5)表達(dá)的影響,探討其對EAE是否有神經(jīng)保護作用及可能的作用機制,為MS的臨床治療提供新思路和實驗依據(jù)。
方法:
2、78只成年雌性Wistar大鼠隨機分為5組:正常組(N組)、免疫誘導(dǎo)組(EAE組)、免疫誘導(dǎo)組+小劑量PGS組(LPGS組)、免疫誘導(dǎo)組+大劑量PGS組(HPGS組)、免疫誘導(dǎo)組+激素組(PAT組)。使用自制完全免疫抗原(GPSCH-CAF)誘導(dǎo) EAE模型。N組不作任何處理,EAE組造模后不予給藥,LPGS組、HPGS組分別予以PGS20mg/kg· d、100mg/kg· d灌胃,PAT組予以醋酸潑尼松8mg/kg·d灌胃。比較各組
3、大鼠的發(fā)病率并進行神經(jīng)功能評分,并分別于第7天、第14天、第21天處死后取脊髓行Bielschowsky銀染色、NFP及CCL5免疫組化染色。
結(jié)果:
1.各組實驗大鼠的發(fā)病率:EAE組發(fā)病率為88.89%;PGS干預(yù)組及PAT干預(yù)組發(fā)病率較EAE組降低(P<0.05);HPGS組發(fā)病率較LPGS組低(P<0.05)。
2.神經(jīng)功能評分:在免疫誘導(dǎo)后第7天、第14天、第21天分別予以評分,在第14、21天,
4、LPGS組、HPGS組及PAT組神經(jīng)功能評分均低于EAE組;第14天HPGS組、PAT組神經(jīng)功能評分低于LPGS組(P<0.05);三個時間點來比較,7天組、21天組與14天組比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),而7天組與21天組比較沒有統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
3.組織病理學(xué):Bielschowsky銀染色示N組軸索大多走形方向一致,結(jié)構(gòu)緊密,連續(xù)性好,粗細(xì)較均勻,其余各組都不同程度地出現(xiàn)軸索改變,如結(jié)構(gòu)紊亂,連續(xù)性
5、破壞,空泡樣缺失、斷裂。
4.免疫組織化學(xué)染色:
4.1大鼠脊髓中NFP的表達(dá):染色結(jié)果示五組均有NFP陽性表達(dá),其中N組表達(dá)最多;EAE組NFP陽性表達(dá)較同期N組明顯減少,而HPGS組、LPGS組、PAT組藥物干預(yù)后,NFP陽性表達(dá)神經(jīng)元數(shù)較同期EAE組增多,且差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);三個時間點比較,7天組、21天組與14天組比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),而7天組與21天組比較沒有統(tǒng)計學(xué)意義(P
6、>0.05)。
4.2大鼠脊髓中CCL5的表達(dá):染色結(jié)果示除N組外,其余四組均有CCL5陽性表達(dá),其中EAE組CCL5陽性表達(dá)較同期其他組明顯增多;藥物干預(yù)組CCL5陽性表達(dá)量有所減少,且HPGS組、PAT組CCL5表達(dá)量較同期LPGS組為低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);三個時間點比較,7天組、21天組與14天組比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),而7天組與21天組比較沒有統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
結(jié)論
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