X射線吸收光譜學(xué)與晶體學(xué)結(jié)合的鋅金屬蛋白酶Acutolysin-A和Acutolysin-C酶活中心結(jié)構(gòu)與功能研究.pdf

1、本論文的研究晶體學(xué)是目前研究蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的最主要手段，而XAS方法在金屬蛋白中的金屬格點(diǎn)結(jié)構(gòu)研究方面有著獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。蛋白質(zhì)晶體學(xué)可以完整的測(cè)定生物大分子結(jié)晶態(tài)的整體三維結(jié)構(gòu)，而XANES定量化分析可以給出溶液態(tài)蛋白分子的金屬位點(diǎn)更為精確的局域結(jié)構(gòu)。本文采用蛋白質(zhì)晶體學(xué)(PX)與X射線吸收光譜學(xué)(XAS)相結(jié)合的方法，系統(tǒng)測(cè)定了不同pH值下的鋅金屬蛋白酶Acutolysin-A的晶體結(jié)構(gòu)和Acutolysin-C的鋅中心溶液態(tài)局域結(jié)構(gòu)以及其

2、pH7．5下的晶體結(jié)構(gòu)，為研究蛋白水解酶活性機(jī)理提供了精確而豐富的結(jié)構(gòu)信息基礎(chǔ)。 BioXAS已經(jīng)發(fā)展為一個(gè)專門(mén)的研究領(lǐng)域，這方面的報(bào)道也已經(jīng)很多。然而，前人的研究工作集中于EXAFS方法和定性的使用XANES方法，無(wú)法得到金屬格點(diǎn)周?chē)康牧Ⅲw結(jié)構(gòu)信息。MXAN的出現(xiàn)使得從金屬蛋白的XANES譜出發(fā)得到金屬格點(diǎn)的局域精細(xì)結(jié)構(gòu)成為可能，極大的提升了BioXAS的研究能力。然而，由于這種方法的專業(yè)性，使得XANES定量化分析的實(shí)