煙草內(nèi)源性抗煙草花葉病毒(TMV)活性成分研究.pdf

1、植物病毒是農(nóng)業(yè)上非常嚴(yán)重的病害，往往給農(nóng)作物的產(chǎn)量造成巨大的損失。近年來，植物源抗病毒物質(zhì)以其特有的優(yōu)勢成為抗病毒藥劑篩選中的一個(gè)熱點(diǎn)。本研究以心葉煙（Nicotiana glutinosa）和K326(Nicotiana tabacum CV，K326）為寄主材料，以煙草花葉病毒（tobacco mosaic virus， TMV）為供試毒源，采用活性跟蹤法和現(xiàn)代的分離技術(shù)手段，對煙草內(nèi)源性抗TMV的活性成分進(jìn)行了研究，主要的研究結(jié)果

2、如下：
　?。?）利用半葉枯斑法及葉圓片懸浮篩選法對云煙203，心葉煙，K326三個(gè)品種烤煙的全株、根、莖、葉、煙杈甲醇提取物進(jìn)行抗TMV活性測定。研究結(jié)果顯示：三種烤煙的全株、根、莖、葉和煙杈甲醇提取物對TMV體外鈍化、保護(hù)和治療均具有一定的抑制活性，根的活性最好，相對于全株對TMV的抑制率提升較多；莖次之，葉和杈較差。三個(gè)品種煙草根部提取物經(jīng)普通煙草K326活體驗(yàn)證，表現(xiàn)出明顯的劑量效應(yīng)。
　?。?）利用半葉枯斑法對云煙

3、203，心葉煙，K326三個(gè)品種烤煙根部不同極性溶劑的提取物進(jìn)行抗TMV的活性研究，發(fā)現(xiàn)三個(gè)品種烤煙根部乙酸乙酯部分對TMV的鈍化作用、保護(hù)作用以及治療作用較強(qiáng)。
　?。?）對K326根部的乙酸乙酯萃取物用硅膠劃段后，二氯甲烷：甲醇9:1(Fr.2)部分活性進(jìn)一步增強(qiáng)，對TMV侵染的鈍化、保護(hù)及治療作用的抑制率分別達(dá)到93.06％、85.03%、71.54%；對Fr.2部分進(jìn)一步劃段分成三部分后，三部分對TMV侵染均表現(xiàn)出較強(qiáng)的活

4、性。經(jīng)過對根部各提取物進(jìn)一步活性驗(yàn)證，F(xiàn)r.2、Fr.2-1、Fr.2-2、Fr.2-3表現(xiàn)出與寧南霉素相近的活性。
　?。?）利用多種現(xiàn)代分離技術(shù)（silsca gel、Sephadex LH-20、ODS、HPLC、MCI）對K326根部的進(jìn)行成分分離；利用MS、NMR、IR、UV等光譜技術(shù)對分離得到的化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。從K326的根部分離得到化合物40個(gè)，鑒定了17個(gè)化合物。結(jié)構(gòu)類型包括木質(zhì)素（1-2）、黃酮（17）、香豆

5、素（4-12）和苯環(huán)衍生物（3，13-16）等，其中2個(gè)新化合物(1-2)。它們分別是：Spondlakin A(1)，SpondlakinB(2)，1-β-D-glucopyranosyl-2,6-dimethoxy-4-Propenylphenol(3)，Micromelin(4)，Acetylhydromicromelin A(5),DihydromicromelinA(6)，DihydromicromelinB(8)，Hopey

6、hopin(8)， Nodakenin(9)，Scopoletin(10)，Scopolin(11)，Magnolioside(12),2-Methoxy-4-(2-propenyl)phenylβ-D-glucopyranoside(13)，Benzyl-β-D-glucopyranoside(14)，Dictamnoside A(15)，2-(4-Ethylphenyl)ethanol(16)，5,7-Dihydroxyl-3,8,