胚胎和成年神經(jīng)前體細(xì)胞的相關(guān)研究：Ⅰ多巴胺促進(jìn)胚胎紋狀體細(xì)胞的存活：氧化應(yīng)激和內(nèi)源性NADPH氧化酶的作用;Ⅱ利用Bystin和Trophinin識(shí)別成年大鼠腦SVZ和RMS中不同類型的細(xì)胞.pdf

1、Ⅰ多巴胺促進(jìn)胚胎紋狀體細(xì)胞的存活：氧化應(yīng)激和內(nèi)源性NADPH氧化酶的作用 胚胎發(fā)育早期腦中多巴胺系統(tǒng)的出現(xiàn)提示多巴胺可能對(duì)腦發(fā)育過程有一定影響。本文發(fā)現(xiàn)，多巴胺能夠顯著促進(jìn)培養(yǎng)中的胚胎紋狀體細(xì)胞的存活。多巴胺受體拮抗劑不能阻斷多巴胺的保護(hù)作用。S-apomorphine是R-apomorphine的異構(gòu)體，它不具備R-apomorphine和多巴胺的受體激動(dòng)作用，但保留了它們的抗氧化特性。S-apomorphine能夠完全模擬多

2、巴胺和R-apomorphine的保護(hù)作用，提示多巴胺對(duì)胚胎紋狀體細(xì)胞的保護(hù)作用不需要受體的激活，而可能需要其抗氧化的特性。此外，我們發(fā)現(xiàn)在胚胎紋狀體組織中有NADPH氧化酶mRNA的表達(dá)，且該酶具有活性。Diphenyleneiodonium(DPI)或apocynin，NADPH氧化酶的抑制劑能夠模擬多巴胺對(duì)胚胎紋狀體細(xì)胞的促存活作用。多巴胺和DPI都能夠降低培養(yǎng)中負(fù)氧離子的水平。在檢測多巴胺對(duì)胚胎皮層細(xì)胞的作用時(shí)沒有發(fā)現(xiàn)有意義的促

3、存活作用，盡管胚胎皮層組織也有NADPH氧化酶的表達(dá)。該酶在紋狀體和皮層中的表達(dá)水平?jīng)]有顯著差異。這些結(jié)果提示，多巴胺對(duì)胚胎的紋狀體細(xì)胞具有保護(hù)作用，這種保護(hù)作用很可能同多巴胺自身的抗氧化特性相關(guān)。NADPH氧化酶可能參與了氧化應(yīng)激的產(chǎn)生。 Ⅱ利用Bystin和Trophinin識(shí)別成年大鼠腦SVZ和RMS中不同類型的細(xì)胞 成年腦的室管膜下區(qū)(subventricularzone，SVZ)進(jìn)行著活躍的神經(jīng)發(fā)生，來自SVZ

4、的細(xì)胞經(jīng)過嘴側(cè)遷移通路(rostralmigratorystream，RMS)到達(dá)目的地嗅球。目前，能夠區(qū)分成年腦SVZ和RMS中不同細(xì)胞類型的分子標(biāo)記還為數(shù)不多。本文發(fā)現(xiàn)，參與發(fā)育早期胚胎植入過程的兩種分子，trophinin和bystin，在成年大鼠腦中的SVZ和RMS有強(qiáng)表達(dá)。在SVZ和RMS中，免疫熒光雙標(biāo)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)bystin和膠質(zhì)纖維酸性蛋白(glialfibrillaryacidicprotein，GFAP)、Ki-67以及

5、巢蛋白(nestin)有共表達(dá)，而同多聚唾液酸神經(jīng)細(xì)胞黏附分子(polysialicacid-neuralcelladhesionmolecule，PSA-NCAM)沒有共表達(dá)，說明這些bystin陽性的細(xì)胞為B類細(xì)胞。在SVZ中，trophinin同GFAP沒有共表達(dá)，同Ki-67和nestin有共表達(dá)。Trophinin陽性細(xì)胞中僅部分細(xì)胞同時(shí)表達(dá)PSA-NCAM，說明它們?yōu)锳類細(xì)胞。其它的trophinin陽性細(xì)胞則既不表達(dá)GFA

6、P，也不表達(dá)PSA-NCAM，提示它們可能是C類細(xì)胞。向側(cè)腦室中注射阿糖包苷可清除SVZ中的trophinin陽性細(xì)胞，保留bystin陽性的細(xì)胞。停止注射阿糖包苷后，這些bystin陽性的細(xì)胞開始分裂增殖，隨后產(chǎn)生了增殖活躍的trophinin陽性PSA-NCAM陰性的細(xì)胞。而后，PSA-NCAM陽性細(xì)胞出現(xiàn)，SVZ得以重建。這些特征提示SVZ中部分trophinin陽性細(xì)胞是C類細(xì)胞。相反地，在RMS，絕大部分trophinin陽性