甘肅習用藥材黃管秦艽質量評價及其有效物質治療骨關節(jié)炎的實驗研究.pdf

1、本文以黃管秦艽（Gentiana officinalis H.Smith.）為研究材料，首先對甘肅10個產(chǎn)地黃管秦艽的質量進行了評價，為黃管秦艽的進一步開發(fā)提供理論依據(jù)；其次對黃管秦艽中總環(huán)烯醚萜苷和龍膽苦苷進行富集、分離、純化及鑒定，測定了總環(huán)烯醚萜苷的含量和其所含龍膽苦苷的含量，鑒定制備所得龍膽苦苷結構并測定了其純度，為黃管秦艽治療骨關節(jié)炎大鼠模型提供樣品；最后研究上述總環(huán)烯醚萜苷和龍膽苦苷對大鼠膝骨關節(jié)炎治療作用的研究，以期為從中

2、藥化學成分中篩選新型抗骨關節(jié)炎藥物奠定基礎。
　　本研究主要內(nèi)容包括：⑴甘肅不同產(chǎn)地黃管秦艽質量研究。采集10批甘肅不同產(chǎn)地黃管秦艽藥材，按照《中國藥典》2010年版第一部中質量評價內(nèi)容進行了外觀性狀描述、粉末特征鑒別、水分、總灰分、酸不溶性灰分、浸出物、無機元素檢查，測定了龍膽苦苷和總環(huán)烯醚萜苷的含量。結果表明黃管秦艽中水分，浸出物的含量均符合《中國藥典》2010年版第一部中關于秦艽的要求，龍膽苦苷含量為7.43％~10.55%

3、，總環(huán)烯醚帖苷類含量為22.6%~73.5%。上述研究結果為制定黃管秦艽的質量標準提供了實驗基礎。⑵黃管秦艽中總環(huán)烯醚萜苷和龍膽苦苷的制備。采用大孔吸附樹脂、柱色譜、結晶、重結晶等方法富集、分離和純化了黃管秦艽中總環(huán)烯醚萜苷、龍膽苦苷，UV測定總環(huán)烯醚萜苷的含量并用 HPLC-DAD測定其中龍膽苦苷含量，采取 NMR，IR等方法鑒定龍膽苦苷結構，并采用 HPLC-DAD測定其純度。富集純化得到的總環(huán)烯醚萜苷純度為31.5%，其龍膽苦苷含

4、量為53.12%；龍膽苦苷純度達95%以上，為黃管秦艽的開發(fā)利用及藥效研究提供了物質支持。⑶黃管秦艽中總環(huán)烯醚萜苷和龍膽苦治療骨關節(jié)炎的實驗研究。以SPF級大鼠為實驗對象，采用注射木瓜蛋白酶加L-半胱氨酸的方法建立骨關節(jié)炎大鼠模型，與現(xiàn)有治療骨關節(jié)炎藥物雙醋瑞因比較，測定分析大鼠臟器指數(shù)、大鼠血液全血粘度，采用ELISA法測定大鼠血清中IL-1β、PGE2、COX-2、COX-1、NO水平，采用HE染色法觀察大鼠關節(jié)軟骨組織病理切片，綜

5、合評價黃管秦艽中總環(huán)烯醚萜苷和龍膽苦苷對骨關節(jié)炎的治療作用。結果顯示：黃管秦艽中總環(huán)烯醚萜苷和龍膽苦苷不同劑量組與模型對照組比較，大鼠血液全血粘度有統(tǒng)計學差異（P<0.01），胸腺指數(shù)有統(tǒng)計學差異（P<0.05），各組別間脾臟指數(shù)無統(tǒng)計學差異（P>0.05），總環(huán)烯醚萜苷和龍膽苦苷不同劑量均能不同程度的降低骨關節(jié)炎大鼠血清中 IL-1β、PGE2、COX-2水平（P<0.05），但各組間大鼠血清中COX-1含量無統(tǒng)計學差異（P>0.05