MicroRNA-181b-5p在哮喘氣道嗜酸性粒細(xì)胞炎癥中的作用與機(jī)制.pdf

1、背景：氣道嗜酸性粒細(xì)胞炎癥是哮喘的一個(gè)關(guān)鍵特征。氣道上皮細(xì)胞在氣道嗜酸性粒細(xì)胞炎癥中有關(guān)鍵的作用。MicroRNA（miRNA）是非編碼單鏈RNA分子，長(zhǎng)度約為20-24個(gè)核苷酸，廣泛存在于人體組織器官中，參與轉(zhuǎn)錄后調(diào)控，我們推測(cè)氣道上皮細(xì)胞 MicroRNA（miRNA）參與的氣道嗜酸粒細(xì)胞炎癥的形成。
　　方法：將8例哮喘患者和4例正常對(duì)照的氣道上皮組織的RNA進(jìn)行miRNA微陣列,并分析12個(gè)對(duì)象的microRNA表達(dá)譜，選

2、出表達(dá)改變最明顯的20個(gè)microRNA進(jìn)行分析和PCR驗(yàn)證，PCR驗(yàn)證和另外一項(xiàng)納入了21個(gè)哮喘患者和10個(gè)正常對(duì)照的隊(duì)列研究均提示了氣道上皮細(xì)胞的miR-181b-5p表達(dá)下調(diào)。我們通過定量PCR檢測(cè)了72例哮喘患者和35例正常對(duì)照的血漿miR-181b-5p的表達(dá)水平，并對(duì)血漿和氣道上皮的miR-181b-5p的表達(dá)水平，血漿和嗜酸性粒細(xì)胞炎癥進(jìn)行了相關(guān)性分析。我們通過生物信息學(xué)方法預(yù)測(cè)了miR-181b-5p的靶基因 SPP1，

3、并在 BEAS-2B細(xì)胞中進(jìn)行了靶基因的驗(yàn)證。我們?cè)陔x體實(shí)驗(yàn)中對(duì)miR-181b-5p在炎癥細(xì)胞因子IL-1β和CCL11表達(dá)中的作用進(jìn)行了探討。
　　結(jié)果：哮喘患者氣道上皮miR-181b-5p相對(duì)正常對(duì)照表達(dá)下調(diào)，氣道上皮miR-181b-5p表達(dá)水平與誘導(dǎo)痰嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)和氣道上皮嗜酸性粒細(xì)胞炎癥呈負(fù)相關(guān)。哮喘患者血漿miR-181b-5p表達(dá)也下調(diào)并與氣道上皮miR-181b-5p表達(dá)相關(guān)。哮喘患者血漿miR-181b-

4、5p和氣道嗜酸性粒細(xì)胞之間呈明顯的負(fù)相關(guān)關(guān)系。糖皮質(zhì)激素治療后血漿miR-181b-5p表達(dá)上調(diào)。我們證明了SPP1是miR-181b-5p的靶基因之一。在人氣道上皮細(xì)胞中，miR-181b-5p通過靶基因SPP1上調(diào)了IL-13誘導(dǎo)的IL-1β和CCL11的表達(dá)，IL-13可以誘導(dǎo)miR-181b-5p的表達(dá)量下調(diào)，地塞米松可以使 miR-181b-5p表達(dá)量恢復(fù)，并且抑制 IL-13誘導(dǎo)的SPP1，IL-β和CCL11的表達(dá)。