寡雄腐霉的拮抗作用及寡雄蛋白的誘導抗性研究.pdf

1、大多數腐霉Pythium Pringsheim是植物的重要病原菌，但有些腐霉不僅對植物沒有致病作用，且對多種病原菌具有拮抗與重寄生的作用，并能誘導植物產生系統(tǒng)抗性，其中寡雄腐霉Pythium oligandrum Drechsler最受關注。本論文對寡雄腐霉的分離檢測方法進行了比較；初步研究了寡雄腐霉對多種病原真菌的拮抗作用；對寡雄蛋白進行了分離純化，并制備了多克隆抗體；初步探明了寡雄蛋白誘導黃瓜對灰霉病的抗性及其機理。本論文的研究結果

2、摘要如下： 1.從54份不同來源的土壤中，采用SSDP法、埋玻片誘集法和撒土誘集法對寡雄腐霉進行了分離鑒定，結果表明無論是在蔬菜土、海島蔬菜砂土、草坪土還是水稻土中均可分離到寡雄腐霉，其中撒土誘集法分離到的寡雄腐霉數最多，分離出的寡雄腐霉最易純化。同時比較了用黃色鐮刀菌、茄絲核菌和灰葡萄孢三種真菌誘集分離寡雄腐霉的效果，結果是用黃色鐮刀菌最為有效。 2.通過平板對峙培養(yǎng)對寡雄腐霉與8種重要植物病原真菌及2種人體足癬病原菌

3、(紅色毛癬菌和石膏樣毛癬菌)的作用進行了研究，結果表明寡雄腐霉能有效地抑制這8種植物病原真菌的菌絲生長，對石膏樣毛癬菌和紅色毛癬菌也有抑制作用。環(huán)境掃描電鏡觀察表明，寡雄腐霉對尖孢鐮刀菌黃瓜?；秃蛢煞N毛癬菌都有明顯的重寄生作用，寡雄腐霉與病原菌的菌絲體緊密接觸后，寄主菌細胞壁變薄、扭曲，原生質膜縊縮或破裂，原生質凝集成團或流出，菌絲體干癟、萎縮、破裂，最后死亡，而寡雄腐霉菌絲仍然健康、飽滿、光滑。 3.對寡雄腐霉的液體培養(yǎng)基配

4、方進行了優(yōu)化，在PO培養(yǎng)液中加1/2 PDB能使寡雄腐霉分泌出更多的寡雄蛋白。用硫酸銨沉淀法結合SDS-PAGE法，PF-2D法檢測，分離純化出分子量約為10KDa，等電點為4.5左右的純寡雄蛋白。用EDAC和OVA雙偶聯的抗原、直接凝膠磨碎的抗原和EDAC單偶聯的抗原分別對雄性大白兔經過5次免疫后，獲得了寡雄蛋白的多克隆抗體。用雙偶聯的比用單偶聯的抗原，能獲得效價更高的多克隆抗體。 4.對寡雄蛋白誘導黃瓜產生的系統(tǒng)獲得抗性進行