利用RAPD,ISSR,SRAP標(biāo)記方法對白樺遺傳多樣性的研究.pdf

1、白樺(Betula platyphylla)耐寒性強(qiáng)、適應(yīng)性好、生長速度快,是我國極為重要的山地造林樹種之一,為了進(jìn)一步提高白樺育種的效率和制定科學(xué)合理的種質(zhì)資源保護(hù)策略,則就必要對其遺傳多樣性進(jìn)行全面而系統(tǒng)的研究。本項研究通過不同標(biāo)記技術(shù)研究了白樺遺傳多樣性,主要研究結(jié)果如下:
　　 1、引物數(shù)量對白樺各遺傳參數(shù)影響不同
　　 以含有20個個體的15個白樺種源為材料,研究了SRAP不同標(biāo)記數(shù)量(5、7、9、11、13、

2、15、17對)對白樺遺傳多樣性研究結(jié)果影響,結(jié)果表明:SRAP引物數(shù)量對揭示的白樺群體總位點數(shù)、多態(tài)位點數(shù)量、群體內(nèi)與群體間遺傳變異和基因流研究結(jié)果產(chǎn)生極顯著和顯著影響,而對多態(tài)位點百分率影響不顯著。
　　 引物數(shù)量對不同種源遺傳距離和聚類結(jié)果均產(chǎn)生一定影響。引物數(shù)量為4對和7對時,遺傳距離最小的的種源分別是清源和寧夏與莫爾道嘎和桓仁,遺傳距離最大的種源分別是涼水和烏伊嶺與涼水和東方紅,此時15個種源分別聚成4類,種源間親緣關(guān)系

3、也不同。而引物數(shù)量11對以上時,遺傳距離大的種源均為涼水和草河口,遺傳距離最小的種源均為莫爾道嘎和桓仁。同時,15個種源分別聚成5個進(jìn)化群體,而每個進(jìn)化分枝中包含的種源基本相同。
　　 2、各種源樣本容量對白樺遺傳參數(shù)影響各異
　　 運用SRAP技術(shù)和17對引物,研究不同樣本容量(每個種源含有4、8、12、16、20個個體)對白樺遺傳參數(shù)的影響,結(jié)果表明:不同種源親本容量對白樺遺傳參數(shù)的影響不同,其中,樣本容量對白樺群體

4、多態(tài)位點百分率、群體內(nèi)遺傳變異和群體間遺傳變影響顯著,對總位點數(shù)、多態(tài)位點數(shù)和基因流影響不顯著。
　　 樣本容量對不同種源遺傳距離和聚類結(jié)果均產(chǎn)生一定影響。每個種源個體數(shù)量超過8個時,遺傳距離最小和遺傳距離最大的種源均相同,而且15個種源的均聚成5個類群,每個類群中包含的種源也相同。每個種源數(shù)量為4個時,其遺傳距最小的種源分別是清源和寧夏種源,遺傳距離最大的種源是桓仁和烏伊嶺種源,而且15個種源聚類成6個類群。
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5、、基于不同標(biāo)記技術(shù)的白樺遺傳多樣性研究
　　 (1)不同標(biāo)記技術(shù)揭示的白樺遺傳多樣性結(jié)果不同
　　 分別采用15個RAPD引物、15個ISSR引物和15對SRAP引物對包含15個種源,每個種源含有20個隨機(jī)個體的白樺群體研究多樣性進(jìn)行了研究,結(jié)果表明,引物數(shù)量相同和樣本容量相同的情況下,不同標(biāo)記種類得到的白樺群體遺傳多樣性參數(shù)不同。如RAPD共檢測到186個位點,平均每個引物擴(kuò)增出12.3個條帶,多態(tài)位點數(shù)185,多態(tài)位

6、點百分率99.46％?；蚨鄻有訦t為0.2394,群體內(nèi)基因多樣性Hs為0.1948,群體間遺傳多樣性Gst為0.1862,81.37％的遺傳變異存在于群體內(nèi),18.63％的遺傳變異存在于群體間；ISSR共檢測到127個位點,其中多態(tài)位點124個,多態(tài)位點百分率達(dá)到97.64％,總基因多樣性Ht為0.3438,群體內(nèi)基因多樣性Hs為0.1892,55.03％的遺傳變異存在于種群內(nèi),44.97％的遺傳變異存在于種源間；SRAP共檢測12

7、0個位點,其中多態(tài)位點118個,多態(tài)位點百分率達(dá)到98.33％,總基因多樣性Ht為0.2623,群體內(nèi)基因多樣性Hs為0.1730,65.96％的遺傳變異存在于種群內(nèi),34.05％的遺傳變異存在于種源問。
　　 (2)基于不同標(biāo)記的白樺遺傳多樣性參數(shù)之間相關(guān)性不同
　　 ISSR得到的各種遺傳參數(shù)分別與SRAP與RAPD遺傳參數(shù)之間呈顯著或極顯著相關(guān)(除SRAP與ISSR標(biāo)記間有效等位基因數(shù)),而SRAP與RAPD標(biāo)記得

8、到的各種遺傳參數(shù)相關(guān)性均不顯著
　　 (3)基于不同標(biāo)記的白樺群體間的遺傳距離和聚類關(guān)系
　　 不同標(biāo)記反映的各種源間親緣關(guān)系的遠(yuǎn)近和聚類結(jié)果不同。RAPD技術(shù)反映出輝山和草河口親緣關(guān)系最近,ISSR為清源和寧夏,SRAP則為莫爾道嘎和桓仁種源；RAPD技術(shù)揭示的15個種源中,親緣關(guān)系最遠(yuǎn)的兩個種源分別為莫爾道嘎和新疆,ISSR為淖爾和新疆,SRAP則為淖爾和涼水；RAPD將15個種源劃分為6個類群,而ISSR和SRAP