冷榨油茶籽制備油茶籽粕蛋白及多肽的研究.pdf_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、本文以低溫冷榨油茶籽粕為原料,對(duì)油茶籽粕蛋白提取工藝及其功能性質(zhì)進(jìn)行了研究。利用優(yōu)化工藝提取的油茶籽粕蛋白,酶解制備油茶籽多肽及血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(angiotensinconvertingenzyme,ACE)抑制肽,優(yōu)化了制備多肽及ACE抑制肽的工藝,利用高效液相色譜對(duì)多肽的分子量分布及氨基酸組成進(jìn)行了測(cè)定和分析,通過(guò)體外模擬試驗(yàn)研究了油茶籽多肽對(duì)活性氧自由基清除的效果。主要研究結(jié)論如下:
   1油茶籽粕蛋白提取最佳工藝條件

2、通過(guò)L9(34)正交實(shí)驗(yàn),確定最佳提取參數(shù)為:料液比為1:25,pH值為10,浸提時(shí)間為80min,浸提溫度為45℃,蛋白提取率達(dá)57.8%。
   2酶解油茶籽粕蛋白制備多肽工藝研究以水解度為指標(biāo),采用四因子二次回歸正交旋轉(zhuǎn)組合試驗(yàn),對(duì)中性蛋白酶酶解油茶籽粕蛋白的研究建立起的相關(guān)回歸模型為:Y=-205.520625-0.000581*X1+2.240417*X2+46.334167*X3+0.261667*X4-0.0000

3、00177*X12+0.000012692*X1*X2-0.026592*X22+0.000233*X1*X3+0.004500*X2*X3-3.434167*X32+0.000265*X1*X4+0.027000*X2*X4+0.275000*X3*X4-0.649167*X42中性蛋白酶水解油茶籽蛋白的最佳反應(yīng)條件是:酶解溫度46.8℃,酶解時(shí)間4.3h,酶解pH7.2,底物濃度3.0%,加酶量8028.2u/g底物,水解度達(dá)到12

4、.4%。
   3油茶籽粕蛋白功能性質(zhì)研究油茶籽粕蛋白的氨基酸總量為43.38g/100g蛋白質(zhì),其中谷氨酸含量最高為9.67g/100g蛋白質(zhì),油茶籽粕蛋白大部分不溶于水,而溶于稀堿液。蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)在pH5左右。
   4油茶籽多肽分子量分布及氨基酸組成分析油茶籽多肽的分子量主要集中在3000Da以下,其中分子量1000Da以下所占面積最大,達(dá)到83.73%,肽鏈的平均長(zhǎng)度PCL為8.4,平均相對(duì)分子質(zhì)量Mw為942

5、.3Da。超濾(Mw3000Da)后,分子量<1000Da的小分子肽所占的比率大幅度提高,上升到97.54%。肽鏈的平均長(zhǎng)度.PCL為8.06,平均相對(duì)分子質(zhì)量Mw為905.1Da。
   5油茶籽多肽生物活性研究采用三因素二次回歸正交旋轉(zhuǎn)組合試驗(yàn),建立ACE抑制肽的抑制率與溫度、底物濃度、酶與底物的質(zhì)量比三因子的數(shù)學(xué)回歸模型:Y=-700.499176+30.442000*X1+5.646534*X2-2.555909*X3-

6、0.323605*X12+0.002000*X1*X2-0.698722*X22+0.236841*X1*X3+0.112727*X2*X3-1.124574*X32ACE抑制肽制備的最佳反應(yīng)條件是:酶解溫度48.6℃,底物濃度4.4%,酶與底物的質(zhì)量比4.2%,酶解pH7.2,酶解時(shí)間3h,此時(shí)ACE抑制理論最大值為46.24%。
   通過(guò)采用脫氧核糖法、鄰苯三酚自氧化法、分光光度法分別考察了油茶籽多肽清除羥基自由基、DPP

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