油茶籽皂苷分離鑒定及其抗腫瘤細(xì)胞增殖活性初步研究.pdf

1、油茶作為一種山茶科山茶屬植物，是我國(guó)特有的木本油料樹種，廣泛分布和種植于我國(guó)中部和南部各省份地區(qū)。油茶籽富含大量的不飽和脂肪酸，可用來(lái)榨取營(yíng)養(yǎng)豐富的茶油。榨油后的油茶餅粕通常被人們丟掉或簡(jiǎn)單的做為一種肥料。值得注意的是油茶餅粕中含有約10％的油茶皂苷，皂苷做為一種三萜類化合物在農(nóng)業(yè)和醫(yī)藥領(lǐng)域展現(xiàn)出了較強(qiáng)的生物活性，如抗氧化活性、降血脂活性、抗真菌活性以及抗癌細(xì)胞活性等。目前有研究報(bào)道利用LC-MS分析油茶籽餅粕中可能含有30多種油茶皂苷

2、單體，但是迄今為止據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，只有6種皂苷單體化合物從油茶籽餅粕中分離鑒定出來(lái)，其中以油茶皂苷命名的有3種，它們是油茶皂苷A1、油茶皂苷B1、油茶皂苷B2，這3種油茶皂苷單體表現(xiàn)出了顯著的細(xì)胞保護(hù)活性或者癌細(xì)胞抑制活性。因此進(jìn)一步研究油茶籽餅粕中的皂苷結(jié)構(gòu)和活性在農(nóng)業(yè)和醫(yī)藥領(lǐng)域有著重大的意義和價(jià)值。
　　本文以油茶籽餅粕為原料，采用有機(jī)試劑分級(jí)萃取，利用硅膠、凝膠、反相硅膠等柱層析和Prep-HPLC、HPLC等制備方法，對(duì)油茶籽

3、餅粕正丁醇萃取部分皂苷成分進(jìn)行分離純化；再結(jié)合紫外、紅外、高分辨質(zhì)譜、氣相質(zhì)譜、核磁等光譜分析方法對(duì)分離純化得到的皂苷單體化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定，已確定其準(zhǔn)確的化學(xué)結(jié)構(gòu)；最后采用MTT法對(duì)化合物的5種人體癌細(xì)胞體外抑制活性進(jìn)行測(cè)試。
　　本實(shí)驗(yàn)從油茶籽餅粕中共分離鑒定出7種皂苷化合物，包括6個(gè)新化合物和1個(gè)已知化合物。6個(gè)新化合物為 Oleiferasaponin C1(1)、Oleiferasaponin C2(2)、Oleifer

4、asaponin C3(3)、Oleiferasaponin C4(5)、Oleiferasaponin C5(6)和Oleiferasaponin C6(7)，1個(gè)已知化合物為Cameliasaponin B1(4)。實(shí)驗(yàn)對(duì)分離得到的化合物1-7進(jìn)行了初步的抗癌活性研究，對(duì)人肝癌細(xì)胞（BEL-7402）、人低分化前胃癌細(xì)胞（BGC-823）、人乳腺癌細(xì)胞（MCF-7）、人白血病癌細(xì)胞（HL-60）和人口腔上皮癌細(xì)胞（KB）5種常見癌細(xì)

5、胞的抑制活性結(jié)果表明化合物3對(duì)5種癌細(xì)胞均未表現(xiàn)出明顯的抑制作用，化合物1、2、4、5、6和7的抑制活性非常顯著。以化合物1和2的抑制效果為例，化合物1的IC50值：6.641μM(BEL-7402)，12.766μM(BGC-823)，5.567μM(MCF-7)，7.930μM(HL-60)，12.215μM(KB)；化合物2的 IC50值：9.601μM(BEL-7402)，13.558μM(BGC-823)，11.223μM(M