魷魚(yú)墨黑色素及黑色素鐵生物活性的研究.pdf

1、魷魚(yú)墨是魷魚(yú)加工過(guò)程中的廢棄物，其主要化學(xué)成分是黑色素和蛋白多糖復(fù)合體。研究表明魷魚(yú)墨具有抗腫瘤、調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能、誘導(dǎo)多種細(xì)胞因子等生理活性，并一直認(rèn)為其主要的活性成分為多肽片斷、酸性多糖、酪氨酸酶以及微量元素。黑色素是以吲哚結(jié)構(gòu)為主體的異聚物，能作為自由基的接受體而阻斷自由基連鎖反應(yīng)，且能螯合多種金屬離子。目前國(guó)內(nèi)外對(duì)魷魚(yú)墨黑色素的研究多集中于其結(jié)構(gòu)和理化性質(zhì)，有關(guān)其生物活性的報(bào)道較少。為了系統(tǒng)評(píng)價(jià)魷魚(yú)墨黑色素的營(yíng)養(yǎng)及藥用功效，進(jìn)一

2、步合理開(kāi)發(fā)利用魷魚(yú)墨提供理論依據(jù)，本文從魷魚(yú)墨中提取了高純度黑色素，進(jìn)一步降解制備了水溶性黑色素，并利用其螯合特性制備了黑色素螯合鐵，并對(duì)其生物活性進(jìn)行了研究。 通過(guò)連續(xù)皮下注射氫化可的松建立小鼠免疫機(jī)能低下模型，以不同劑量的魷魚(yú)墨不溶性黑色素灌胃模型小鼠，探討了魷魚(yú)墨不溶性黑色素對(duì)小鼠免疫機(jī)能的調(diào)節(jié)作用。結(jié)果表明，魷魚(yú)墨不溶性黑色素可顯著提高免疫低下模型小鼠的脾及胸腺指數(shù)、血清溶血素含量(HC50)，小鼠遲發(fā)性變態(tài)反應(yīng)及脾淋巴

3、細(xì)胞轉(zhuǎn)化能力，顯著促進(jìn)小鼠NK細(xì)胞殺傷活力及巨噬細(xì)胞吞噬能力。提示魷魚(yú)墨不溶性黑色素對(duì)機(jī)體特異性及非特異性免疫機(jī)能具有顯著調(diào)節(jié)作用。 以頸背部皮下注射D-半乳糖建立小鼠衰老模型，通過(guò)灌胃不同劑量的魷魚(yú)墨不溶性黑色素，研究了魷魚(yú)墨不溶性黑色素的免疫調(diào)節(jié)作用。結(jié)果顯示，魷魚(yú)墨不溶性黑色素能顯著促進(jìn)小鼠血清及肝臟中SOD和GSH-PX活力及皮膚中羥脯氨酸含量，降低MDA及腦脂褐質(zhì)含量；提示魷魚(yú)墨不溶性黑色素具有顯著的抗氧化、抗衰老功能

4、。 研究了魷魚(yú)墨不溶性黑色素對(duì)重金屬的脫除作用。將小鼠隨機(jī)分為正常組、黑色素組、重金屬組、黑色素+重金屬組。分別灌胃基礎(chǔ)溶液、魷魚(yú)墨不溶性黑色素溶液、混合重金屬溶液(Ba、Cd、Cr、Pb)魷魚(yú)墨不溶黑色素+混合重金屬溶液。結(jié)果表明，與重金屬組比較，黑色素+重金屬組小鼠股骨、血樣中重金屬離子的含量顯著降低，糞便中重金屬排泄了顯著升高，表明魷魚(yú)墨不溶性黑色素能有效阻礙食物中重金屬離子在體內(nèi)的吸收和累積，促進(jìn)體內(nèi)重金屬離子排出體外，

5、，減輕重金屬對(duì)機(jī)體的危害。 采用低鐵飼料并輔以尾靜脈定期放血法建立缺鐵性貧血(Iron deficiency anemia，IDA)大鼠模型，灌胃不同劑量的魷魚(yú)墨黑色素鐵。結(jié)果顯示，魷魚(yú)墨黑色素鐵能夠顯著提高IDA大鼠血紅蛋白(Hb)含量、紅細(xì)胞(RBC)數(shù)、紅細(xì)胞壓積(HCT)、紅細(xì)胞平均體積(MCV)、血清鐵(SI)含量，有效降低紅細(xì)胞內(nèi)游離原卟啉(FEP)濃度濃度，顯著促進(jìn)IDA大鼠貧血癥狀的恢復(fù)。魷魚(yú)墨黑色素鐵對(duì)IDA大

6、鼠紅系造血具有促進(jìn)作用。 通過(guò)飼喂高脂飼料建立小鼠實(shí)驗(yàn)性高脂血癥小鼠模型，研究了魷魚(yú)墨不溶性黑色素及水溶性黑色素對(duì)實(shí)驗(yàn)性高脂血癥小鼠脂質(zhì)代謝的調(diào)節(jié)作用及其機(jī)理。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，魷魚(yú)墨不溶性黑色素及水溶性黑色素均能顯著降低高膽固醇血癥大鼠血清TC、TG、LDL-c含量及動(dòng)脈粥樣硬化指數(shù)(Atherosclerosis index，AI)(P<0.05)；顯著降低肝臟TC、TG含量；顯著提高糞便中總脂質(zhì)、膽固醇和膽汁酸的含量。并能顯著

7、提高肝臟中棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶-1(Carnitine palmitoyl transterase-1，CPT-1)、β-過(guò)氧化物酶體(β-oxidation peroxisomal) 和磷脂酸磷酸酶 (Phosphatidic acid phophyhydrolase，PAP)的活力。提示魷魚(yú)墨黑色素及水溶性黑色素能有效改善添加膽固醇引起的脂質(zhì)代謝紊亂，抑制脂質(zhì)在消化道內(nèi)的吸收，并促使其通過(guò)排泄途徑排出體外。其主要作用機(jī)理是魷魚(yú)墨黑色素及水溶

8、性黑色素能促進(jìn)脂質(zhì)在體內(nèi)的B一氧化和異化作用。 采用MTT法檢測(cè)魷魚(yú)墨水溶性黑色素對(duì)H2O2損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖活性的影響。結(jié)果表明魷魚(yú)墨水溶性黑色素能顯著保護(hù)H2O2：損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞的正常增殖，顯著提高高脂血癥小鼠血清中NO含量，提示其通過(guò)提高細(xì)胞的抗氧化能力，增強(qiáng)細(xì)胞膜的穩(wěn)定性，對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞起到保護(hù)作用。 選取4株具有代表性的腫瘤細(xì)胞，采用MTT法檢測(cè)2種分子量的Me-W對(duì)不同腫瘤細(xì)胞株增殖活性的影響，結(jié)果表明，